研究黃芩苷提取方法和高效液相含量測定情況分析

摘 要：目的：本次主要對黃芩苷在實驗之中的提取方法展開分析，了解HPLC（高效液相）含量的相關測定狀況。方法：經正交實驗設計，考查指標為黃芩苷總量，應用最佳的提取方法，應用HPLC法對黃芩苷的含量展開相應的測定。結果：提取的次數對水煎煮提取的工藝產生的極為明顯的影響，其中提取的時間和溶劑倍數并沒有明顯的差異。考慮提取時間、能源成本，最佳水煎煮提取方法是藥材量水煎煮的12倍，進行三次，每次1小時。在轉移率實驗之中，平均轉移率超過77.5%，RSD為1.60%;提取方法合理且穩定。在工藝驗證實驗之中，黃芩苷含量為89.9%，RSD為1.15，篩選的工藝合理且穩定，可進行控制。在0.04655-0.4655ug范圍之內其線性關系良，其加樣回收率超過99.0%。討論：這種提取黃芩苷的方法穩定且合理，在實驗中的可實踐性高。應用HPLC進行含量測定，可保障數據結果的準確性和精準性，且實驗重復性佳，可在黃芩提取物含量控制之中應用該方法。

關鍵詞：HPLC;黃芩苷;含量測定;提取方法

黃芩為唇形科植物，黃芪本身可起到瀉火解毒、清熱燥濕、安胎以及止血的效果。黃芩中主要是以黃芩苷、黃芩苷元以及漢黃芩素等成分，其中黃芩苷是最為有效的成分，主要可起到抗過敏、抗腫瘤和抗炎的效果。近些年來，臨床的研究發現黃芩苷可有效的對HIV病毒感染、復制產生阻止作用，成為了艾滋治療的有效藥物[1]。為了保障黃芩能夠更好的被利用，本次主要是應用黃芩苷總量作為本次的考察指標，對黃芩苷在實驗之中的提取方法展開分析，了解HPLC（高效液相）含量的相關測定狀況。

1 儀器和試藥

1.1 儀器

本次主要是應用高效液相色譜儀、超聲波清洗儀、旋轉蒸發儀、循環水真空泵、真空干燥箱、電子恒溫水浴鍋。應用的試劑為：乙醇、磷酸、氫氧化鈉、鹽酸、水（超純水）、甲醇。

1.2 藥品

本次主要是應用黃芩藥材，藥材主要是購買于藥材市場，經過鑒定為正品的黃芩，黃芩苷對照品。

1.3 方法

本次實驗設計主要是應用正交實驗展開，水煮提取因受到多個因素產生的影響，其中主要包括由提取時間、溶劑倍數以及提取次數。在單個因素實驗的基礎之上，對三個因素進行分別設置，其中主要是應用L9正交表，誤差項極為空白列，將黃芩苷干膏之中把黃芩苷總量作為本次考察的指標，將黃芩苷提取重量和黃芩苷百分含量進行相乘，極為黃芩苷的總量。在進行樣品制備的時候，需要準備好9份黃芩藥材，每一份均為80克。按照正交實驗表之中列出的條件，先進行水煎煮，300目濾布進行過濾，濾液濃縮成400毫升，冷卻到和室溫保持一致，之后進行抽濾，將濃鹽酸進行適量的加入，之中pH值在1-2之間。把沉淀防治在80攝氏度水浴之中保持1小時，室溫靜置，進行抽濾。沉淀應用蒸餾水洗滌，直至pH值為中性。在70攝氏度的狀態之下進行減壓干燥，之后對其進行稱重。在轉移率實驗之中，準備好3份藥材，每一份為240克，按照工藝選定的最佳條件進行制備，對黃芩苷的轉移率進行測定。干膏重量和干膏之中黃芩苷含量相乘，將所得數據除以藥材重量和藥材之中的黃芩苷的含量，即為黃芩苷的轉移率。在工藝驗證實驗之中，取3份黃芩藥材，每一份為500克，選用優選的提取方法進行純化工藝。黃芩苷的含量進行測定的時候，取黃芩苷標準品溶液、波長范圍掃描200-400nm，濃度為46.52ug/mL，最強吸收為277nm，將其作為檢測波長。

2 結果

經過實驗統計計算、方差結果分析展開判斷，提取的次數對水煎煮提取的工藝產生的極為明顯的影響，其中提取的時間和溶劑倍數并沒有明顯的差異。考慮提取時間、能源成本，最佳水煎煮提取方法是藥材量水煎煮的12倍，進行三次，每次1小時。在轉移率實驗之中，平均轉移率超過77.5%，RSD為1.60%;提取方法合理且穩定。在工藝驗證實驗之中，黃芩苷含量為89.9%，RSD為1.15，篩選的工藝合理且穩定，可進行控制。在0.04655-0.4655ug范圍之內其線性關系良，其加樣回收率超過99.0%。

3 討論

國內關于黃芩苷的提供方法研究文獻有諸多報道，提取工藝主要是由超濾法、溫浸法、微波法以及煎煮法。在實際工業生產之中，黃芩大多是是應用水提酸沉法進行提取，因此黃芩苷的提取方法、制備方法在臨床研究之中變得越加重要[2]。在本次研究之中，經過實驗統計計算、方差結果分析展開判斷，提取的次數對水煎煮提取的工藝產生的極為明顯的影響，其中提取的時間和溶劑倍數并沒有明顯的差異。考慮提取時間、能源成本，最佳水煎煮提取方法是藥材量水煎煮的12倍，進行三次，每次1小時。在轉移率實驗之中，平均轉移率超過77.5%，RSD為1.60%;提取方法合理且穩定。在工藝驗證實驗之中，黃芩苷含量為89.9%，RSD為1.15，篩選的工藝合理且穩定，可進行控制。在0.04655-0.4655ug范圍之內其線性關系良，其加樣回收率超過99.0%。概而言之，這種提取黃芩苷的方法穩定且合理，在實驗中的可實踐性高。應用HPLC進行含量測定，可保障數據結果的準確性和精準性，且實驗重復性佳，可在黃芩提取物含量控制之中應用該方法。

參考文獻：

[1]馬敏怡.高效液相色譜法測定解毒祛痰濃縮丸中黃芩苷的含量[J].新疆中醫藥，2017，35（06）：39-42.

[2]楊必浩，周應碩.高效液相色譜法同時測定龍膽瀉肝片中龍膽苦苷、梔子苷和黃芩苷的含量[J].系統醫學，2017，2（08）：127-131.

作者簡介：

井子伊禧（1985- ），女，彝族，四川金陽人，當前職務：中藥室副主任，當前職稱：助理工程師，本科學歷，研究方向：中藥檢測、醫藥化工。