關(guān)于紫外分光光度法測(cè)定土壤過氧化氫酶活性的研究

許廣元

摘 要：土壤中過氧化氫酶活性高低，將直接影響土壤的肥力，它是現(xiàn)代生物研究分析的主要內(nèi)容。基于此，本文采取實(shí)驗(yàn)分析法，著重對(duì)紫外分光光度法測(cè)定土壤過氧化氫酶活性的結(jié)果進(jìn)行剖析，以達(dá)到充分發(fā)揮技術(shù)優(yōu)勢(shì)，實(shí)現(xiàn)科學(xué)性、綠色化農(nóng)業(yè)開發(fā)的目的。

關(guān)鍵詞：紫外分光光度法；土壤過氧化氫酶；活性測(cè)定

引言：過氧化氫酶活性分析，是土壤透氣性、營(yíng)養(yǎng)含量等方面檢測(cè)的重要指標(biāo)之一。研究發(fā)現(xiàn)：利用精準(zhǔn)性、高效率的過氧化氫酶活性檢驗(yàn)方式，對(duì)土壤情況進(jìn)行綜合檢測(cè)，不僅節(jié)省了土壤環(huán)境治理的投資成本，也能夠?yàn)榭茖W(xué)調(diào)節(jié)土壤肥力帶來方法借鑒。由此，關(guān)于紫外分光光度法測(cè)定土壤過氧化氫酶活性的探究，是現(xiàn)代生物工程研究的理論代表。

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c材料

1.1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

土壤中過氧化氫酶活性，是土壤中有機(jī)物活性和反應(yīng)強(qiáng)度檢測(cè)的直接表現(xiàn)。通過紫外分光廣度法對(duì)土壤中過氧化氫酶活性的探究，可借助雙氧水、高錳酸鉀溶液，在紫光照射下出現(xiàn)過氧化氫酶活性變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果也進(jìn)一步明確了過氧化氫酶活性檢測(cè)技術(shù)分析優(yōu)化帶來的便捷性，進(jìn)而為綠色化、循環(huán)性農(nóng)產(chǎn)業(yè)開發(fā)提供方法參考。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

本次實(shí)驗(yàn)中所選用的土壤包括：紅壤、黃壤、黃棕壤三類。

實(shí)驗(yàn)中所有藥品、器材包括：濃度為0.3%的雙氧水，1.3mol/L硫酸、飽和鋁鉀礬、高錳酸鉀、紫外分光光度計(jì)、以及振蕩器、三角容器等[1]。

2、實(shí)驗(yàn)方法與步驟

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

對(duì)實(shí)驗(yàn)中所用原料進(jìn)行初步處理，操作過程為：（1）30%的雙氧水稀釋100倍；（2）濃硫酸40ml進(jìn)行稀釋，按照2：25的標(biāo)準(zhǔn)調(diào)節(jié)即可。（3）將3g高錳酸鉀放置在1升的溶解杯子中，并進(jìn)一步精確測(cè)量其中草酸的含量。

實(shí)驗(yàn)中分別運(yùn)用高錳酸鉀和紫光對(duì)土壤過氧化氫酶活性、土壤基本性質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。

2.2 實(shí)驗(yàn)步驟

按照實(shí)驗(yàn)一般流程，將操作要點(diǎn)歸納為：（1）分別取三種土壤樣品2g，并將其分別放入到三角瓶中，加入35ml蒸餾水，搖均后放入3-5ml的雙氧水，震蕩15min。取下后立即放入飽和鋁鉀礬溶液0.5m。靜置5-10min后，將土壤中水分濾干后用吸光器進(jìn)行處理。（2）取土壤樣本2g，放置到三角瓶中，按以上標(biāo)準(zhǔn)加入蒸餾水、雙氧水后，震蕩，加入飽和鋁鉀礬，并在盛有稀釋過的硫酸液體中融合，濾干后滴入高錳酸鉀至紫色，分析實(shí)驗(yàn)效果。（3）按照過氧化氫酶活性計(jì)算公式，計(jì)算實(shí)驗(yàn)結(jié)果。其一，紫外分光光度測(cè)定過氧化氫酶計(jì)算：F=A1×T/G。其中“F”表示土壤中過氧化氫酶含量，“A1”表示樣品溶液吸光能力，“T” 表示過氧化氫克數(shù)，“G”表示土樣重量。其二，R=（V-V1）C ，其中“V”表示體積溶液中高錳酸鉀的體積，“V1”表示溶液所消耗的高錳酸鉀體積，“C”表示土壤重量[2]。（4）采取常規(guī)土壤檢測(cè)法，采取有機(jī)質(zhì)硫酸重鉻酸鉀外加熱法進(jìn)行光度分散效果處理；同時(shí)，運(yùn)用電位法測(cè)定土壤的PH值。

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

3.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

運(yùn)用兩種方法對(duì)土壤過氧化氫酶活性進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果表明：（1）第一次檢驗(yàn)土壤樣本中過氧化氫酶活值為5.17，第二次樣本檢驗(yàn)的結(jié)果為5.29，且差異變化系數(shù)分別為：3.81、5.17，誤差值P分別為0.03和0.32；（2）土壤樣本檢驗(yàn)初步進(jìn)行過氧化氫融合后，土壤中有基質(zhì)含量為0.67，無基質(zhì)含量0.10。靜置3-5min后，土壤中有基質(zhì)含量為0.64，無機(jī)質(zhì)含量0.05，說明實(shí)驗(yàn)中土壤的無基質(zhì)在實(shí)驗(yàn)中發(fā)生了變化。（3）實(shí)驗(yàn)加入稀釋后的濃硫酸過濾后，土壤中有基質(zhì)數(shù)含量為0.16，無基質(zhì)0.14，溶液中有基質(zhì)數(shù)含量為0.74，無基質(zhì)0.76。

3.2 實(shí)驗(yàn)討論

過氧化氫酶活性檢驗(yàn)，是綠色農(nóng)業(yè)種植中常見的土壤狀況分析檢測(cè)指標(biāo)，它不僅實(shí)現(xiàn)了土壤中有機(jī)物成分的科學(xué)性檢測(cè)，也是一種有效的土壤資源綜合利用探究方式。本次實(shí)驗(yàn)中為了證明紫外光光度分法，在土地過氧化氫酶活性中測(cè)定應(yīng)用的價(jià)值，采取對(duì)比分析法，對(duì)土壤中過氧化氫酶活性的檢驗(yàn)情況進(jìn)行了綜合探究，實(shí)現(xiàn)了現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)資源的整合與運(yùn)用。

3.2.1 紫外分光光度法測(cè)定方法便捷

紫外分光光度法用于土壤中過氧化氫酶的檢測(cè)方法中，可保障土壤實(shí)踐檢測(cè)值的便捷性。其一，傳統(tǒng)的高錳酸鉀檢驗(yàn)測(cè)定法，主要利用土壤中酸堿反應(yīng)情況，測(cè)定土壤中過氧化酶的含量。而運(yùn)用紫外分光光度法進(jìn)行測(cè)定時(shí)，可直接利用光度分層儀器，對(duì)土壤中有基質(zhì)和無基質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，且檢驗(yàn)中無需多次進(jìn)行檢測(cè)溶液的調(diào)配，因此，檢測(cè)過程自然比較便捷。其二，紫外分光光度法是數(shù)字化儀器性綜合性檢測(cè)，它充分利用了紫光對(duì)土壤分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行分層的特性，對(duì)實(shí)驗(yàn)樣本土壤中營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行測(cè)定。由此，測(cè)定過程是系統(tǒng)性、批量性的檢測(cè)，實(shí)際檢測(cè)結(jié)果可靠性也比較高。

3.2.2 紫外分光光度法可對(duì)土壤成分進(jìn)行分析

紫外分光光度法測(cè)分析法進(jìn)行土壤中過氧化氫測(cè)定時(shí)，也可以結(jié)合土壤原有成分分析資料，對(duì)土壤的營(yíng)養(yǎng)含量、土壤保水性等方面進(jìn)行測(cè)定，由此，紫外分光光度法的應(yīng)用，也是一種延伸性土壤檢測(cè)分析手段。

首先，土壤樣本檢驗(yàn)初步進(jìn)行過氧化氫融合后，土壤中有基質(zhì)含量為0.67，無基質(zhì)含量0.10。靜置3-5min后，土壤中有基質(zhì)含量為0.64，無機(jī)質(zhì)含量0.05，這一結(jié)果也側(cè)面說明了本次檢驗(yàn)樣本土壤中有機(jī)質(zhì)物質(zhì)含量較多。

其次，結(jié)合本次土壤實(shí)驗(yàn)前分析資料可知：三種樣品本身的有機(jī)質(zhì)含量分別為：10.15g/kg、15.14g/kg、19.12g/kg，土壤中含有堿解氮含量分別為：80.91g/kg、95.66g/kg、109.30g/kg，含有有效磷量分別為：11.03g/kg、5.89g/kg、1.13g/kg。土壤中豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，能夠通過紫外分光光度法測(cè)定中有基質(zhì)和無基質(zhì)的含量情況給予綜合反饋。由此，紫外分光光度法的應(yīng)用具有檢測(cè)效果好、檢測(cè)范圍廣的特征。

3.2.3 紫外分光光度法誤差值較低

紫外分光光度法應(yīng)用于土壤中過氧化酶檢測(cè)過程中，具有檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、誤差值低的優(yōu)勢(shì)。如，本次實(shí)驗(yàn)中第一次檢驗(yàn)土壤樣本中過氧化氫酶活值為5.17，第二次樣本檢驗(yàn)的結(jié)果為5.29，且差異變化系數(shù)分別為：3.81、5.17，誤差值P分別為0.03和0.32，兩次數(shù)據(jù)對(duì)比差異性不大，也說明紫外分光光度法對(duì)土壤中過氧化氫酶活性檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性較高。

結(jié)論：綜上所述，關(guān)于紫外分光光度法測(cè)定土壤過氧化氫酶活性的研究，是現(xiàn)代生物研究技術(shù)實(shí)踐中綜合應(yīng)用的體現(xiàn)。在此基礎(chǔ)上，本文將方法測(cè)定討論結(jié)果歸納為：紫外分光光度法測(cè)定方法便捷、紫外分光光度法可對(duì)土壤成分進(jìn)行分析、紫外分光光度法誤差值較低三方面。因此，本篇文章的研究結(jié)果，將為新技術(shù)科學(xué)應(yīng)用提供新思路。

參考文獻(xiàn)：

[1]王群，劉朝巍，徐文娟.紫外分光光度法測(cè)定玉米過氧化氫酶活性新進(jìn)展[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2016，32（15）：159-165.

[2]楊蘭芳，曾巧，李海波，閆靜靜.紫外分光光度法測(cè)定土壤過氧化氫酶活性[J].土壤通報(bào)，2011，42（01）：207-210.