I群4型禽腺病毒卵黃抗體接種雞后在體內(nèi)消長規(guī)律的研究

腺病毒是全球家禽和野禽常見的傳染病原之一。多數(shù)腺病毒可在健康禽體內(nèi)存在并復(fù)制，不表現(xiàn)臨床癥狀或臨床癥狀非常輕微，但可成為混合感染時的條件性病原；腺病毒有時也可作為原發(fā)性病原，引起禽類的多種病癥。

腺病毒可分為A、B、C、D、E5個種12個血清型，我國主要流行A、B、C三種基因型，共6個血清型（火雞1型、1型、4型、5型、8a/b型），但是近期在豫南、皖北、蘇北、魯西北和膠東地區(qū)流行的禽腺病毒主要是血清4型和8a/b型，造成雞群的死亡率較高，發(fā)病急，有蔓延的趨勢。安卡拉?。ㄐ陌e水-肝炎綜合征 ）就是由Ⅰ群腺病毒、血清4型引起來的。該病多發(fā)于肉雞，近期也開始感染817和麻雞，以及產(chǎn)蛋雞的育成雞，并且育成雞發(fā)病死亡率還非常高。Ⅰ群禽腺病毒的12個血清型交叉保護性較差，所以在防控上必須選用與流行株匹配的疫苗株和卵黃抗體才能有效遏制疫情的蔓延。

由于目前對I群4型禽腺病毒卵黃抗體在本動物體內(nèi)的代謝規(guī)律還缺少系統(tǒng)研究，影響了該卵黃抗體在臨床上的正確使用。為此，本研究采用I群4型禽腺病毒卵黃抗體注射SPF雞，并監(jiān)測雞注射抗體后不同時間點的血清抗體陽性轉(zhuǎn)換率，通過研究抗體在動物體內(nèi)的代謝規(guī)律，以期為正確使用I群4型禽腺病毒卵黃抗體防治心包積水-肝炎綜合征提供理論依據(jù)。

一、材料

1.I群4型禽腺病毒卵黃抗體：批號201701、201702、201703，瓊擴效價均不低于1 ∶4，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備。

2.I群4型禽腺病毒檢驗用強毒：批號FAV-HYQS-03-2，病毒含量107.38TCID50/0.1mL，規(guī)格為2.0mL/瓶，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備、鑒定、保管和供應(yīng)。

3.I群4型禽腺病毒瓊擴抗原：批號FAV-HY-K-01，效價不低于1 ∶2，規(guī)格為2.0mL/瓶，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備、鑒定、保管和供應(yīng)。

4.I群4型禽腺病毒陽性血清：批號FAV-HY-Y-01，效價不低于1 ∶64，規(guī)格為2.0mL/瓶，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備、鑒定、保管和供應(yīng)。

5.I群4型禽腺病毒陰性血清：批號HY-Y-01，規(guī)格為2.0mL/瓶，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備、鑒定、保管和供應(yīng)。

6.SPF雞：21和42日齡，由哈藥集團生物疫苗有限公司五常SPF雞場提供。

二、方法

1.血清抗體陽性轉(zhuǎn)化標準的確定。取實驗室試制的201501批抗體肌肉注射21日和42日齡SPF雞各80只，每只1.0mL。在抗體注射后16、24、48、72、96、120、144和168h，分別從抗體試驗組雞中隨機抽取10只，分別采血、分離血清。采用瓊擴試驗（見規(guī)程附注2）進行I群4型禽腺病毒抗體效價測定，并將采血后的雞肌肉注射I群4型禽腺病毒強毒，每只0.1mL（含106.0TCID50）；同時每個時間點取同批次同日齡SPF雞各10只，不注射抗體，作為攻毒對照雞；另選取10只SPF雞作為健康對照。

2.抗體注射雞體內(nèi)消長規(guī)律試驗。每批抗體肌肉注射21日和42日齡SPF雞各90只，每只1.0ml；取同批次同日齡SPF雞各10只，不注射任何藥品作為健康對照。在抗體注射后16、24、48、72、96、120、144、168和192h，分別從抗體試驗組雞中隨機抽取10只，分別采血、分離血清。采用瓊擴試驗（見規(guī)程附注2）進行I群4型禽腺病毒抗體效價測定。共計進行3批抗體試驗。

三、結(jié)果

1.血清抗體陽性轉(zhuǎn)化標準的確定結(jié)果（見表1～2）

從表1～2結(jié)果可以看出，卵黃抗體注射的21日和42日齡SPF雞，在注射后16～168h，血清中I群4型禽腺病毒抗體效價為1 ∶1～1 ∶4，當血清抗體瓊擴效價不低于1 ∶2時，能保護雞抵御I群4型禽腺病毒強毒的攻擊。各抽檢時間點攻毒對照組雞均90%～100%發(fā)病，剖檢試驗雞，死亡和發(fā)病雞均呈典型的心包積液及肝臟腫大和壞死的病理變化。健康對照組血清在試驗過程中I群4型禽腺病毒抗體效價均為0，且全部健活。

表1 抗體注射21日齡雞血清中I群4型禽腺病毒抗體陽性轉(zhuǎn)化標準的確定結(jié)果

表2 抗體注射42日齡雞血清中I群4型禽腺病毒抗體陽性轉(zhuǎn)化標準的確定結(jié)果

2.抗體注射雞體內(nèi)消長規(guī)律試驗（見表3～4）

從表3結(jié)果可以看出，卵黃抗體注射的21日齡SPF雞，在注射后16h血清中I群4型禽腺病毒抗體血清陽轉(zhuǎn)率為60%，24～144h血清陽轉(zhuǎn)率為90%～100%，168～192h血清陽轉(zhuǎn)率為60%～80%；健康對照組血清在試驗過程中I群4型禽腺病毒抗體效價均為0。

表3 抗體注射21日齡雞不同時間血清中I群4型禽腺病毒抗體效價及陽轉(zhuǎn)率測定結(jié)果

表4 抗體注射42日齡雞不同時間血清中I群4型禽腺病毒抗體效價及陽轉(zhuǎn)率測定結(jié)果

（續(xù)表）

從表4結(jié)果可以看出，卵黃抗體注射的42日齡SPF雞，在注射后16h血清中I群4型禽腺病毒抗體血清陽轉(zhuǎn)率為50%～60%，24～144h血清陽轉(zhuǎn)率為90%～100%，168～192h血清陽轉(zhuǎn)率為60%～80%；健康對照組血清在試驗過程中I群4型禽腺病毒抗體效價均為0。

綜上表1～4試驗結(jié)果可以看出，21日齡和42日齡雞注射抗體后，I群4型禽腺病毒血清抗體均為不低于1:2時，對雞具有保護作用，即血清抗體陽性轉(zhuǎn)化標準應(yīng)確定為血清抗體效價不低于1:2。

四、結(jié)論

1.抗體注射雞后，當血清抗體的瓊擴效價不低于1:2時，抗體對雞具有較好的保護效果，可作為血清抗體陽性轉(zhuǎn)化的抗體效價臨界值。

2.卵黃抗體注射SPF雞，24h后可循環(huán)全身達到峰值，并穩(wěn)定在峰值持續(xù)一段時間至120h，其間血清I群4型禽腺病毒抗體陽性轉(zhuǎn)化率為100%；注射后144～168h血清抗體效價下降，但仍然維持在一定水平，血清I群4型禽腺病毒抗體陽性轉(zhuǎn)化率為80%～90%，192h血清I群4型禽腺病毒抗體陽性轉(zhuǎn)化率為60%～80%。

3.由抗體的消長規(guī)律得出，卵黃抗體的有效保護時間為6d，但為保證卵黃抗體的臨床使用效果，將抗體的被動免疫保護期確定為5d。