宮頸上皮內瘤變級別與感染不同HR-HPV亞型的相關性研究

陸敬巧，閆首珍，時蕭陽，沈 鑫

（宿遷市第一人民醫院婦產科，江蘇 宿遷 223800）

近年來，子宮頸癌的發病率呈逐年升高的趨勢，對女性的身體健康造成極大的威脅。相關研究表明，宮頸癌在女性惡性腫瘤中的占比為10%～12%，已然成為女性最為常見的惡性腫瘤之一[1-2]。而宮頸上皮內瘤變（CIN）屬于誘發子宮頸癌相應癌前病變，相關研究表明，CIN疾病的發生與發展和人乳頭瘤病毒（HPV）感染存在密切關系，尤其是高危型的HPV（HR-HPV）對于人宮頸的上皮細胞具有持續性刺激的角化作用，能夠誘發腫瘤基因相應激活及分裂增殖[3]。目前關于宮頸上皮內瘤變級別與感染不同HR-HPV亞型的相關性的研究不多。因而，此次研究基于我院婦產科所收治的行TCT與病理檢查及HPV-DNA分型檢測的患者作為研究對象，然后對CIN患者感染HPV狀況及CIN級別與感染不同HR-HPV亞型的相關性予以分析與總結。課題研究過程中為了減低患者檢查過程中的不舒適感及方便高級別宮頸上皮內瘤變患者治療，申請發明專利2個：一種多用途陰道拉鉤（專利號：201710403240.X）目前進入實質審查階段；申請實用新型專利3個：一種婦產科用便捷式窺陰器（專利號：201720625506.0，已授權）；一種四葉片陰道拉鉤（專利號：201720625342.1，已授權）；一種便捷式多藥物適用型宮頸上藥器（專利號：201920274158.6，第二發明人）。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

以我院婦產科于2018年2月～2019年2月期間所接收的行宮頸液基細胞學與HPV-DNA分型檢測的600例患者作為此次研究對象，TCT及病理學檢查，共診斷出520例CIN患者，患者年齡分布在18～76歲，中位年齡為（36.85±9.24）歲，其中CIN 1患者348例，占比為66.92%，CIN 2、3患者172例，占比為33.08%。

1.2 方法

（1）TCT與病理檢查

運用TCT配套一次性使用宮頸采樣拭子，收集患者宮頸以及宮頸管脫落的上皮細胞于細胞保存液內，將樣本送至病理科細胞室檢查，診斷標準依照國際癌癥協會所制定的“子宮頸細胞學Bethesda報告系統(2004年版)[4]。經TCT檢查存在異常的各患者，給予陰道鏡檢查，依據標準步驟實施檢查，針對宮頸組織施以活檢，相應病理診斷參依照WHO所制定的關于國際疾病的分類標準(2003年版)[5]。

（2）HPV分型檢測

運用人乳頭瘤病毒基因分型（25型）檢測試劑盒的PCR-反向點雜交法對25種HPV亞型進行檢測，本試劑盒采用PCR體外擴增（由美國MBI公司所研制的PE9600型擴增儀）和DNA反向點雜交相結合的基因檢測技術。通過HPV特異引物，擴增出包含25種HPV基因型的目標片段，再將擴增產物與固定在膜務上的型特異性探針進行雜交，依據雜交信號來判斷是否有這些HPV基因型的存在。HR-HPV亞型共15種，包括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66及HPV68。

1.3 統計學分析

運用SPSS 19.0統計分析軟件，以百分率（%）作為HRHPV各亞型感染相應評價指標，同時對HR-HPV檢出率給予x2檢驗，以logistic回歸分析HR-HPV各亞型感染和CIN病變級別之間的相關關系，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 CIN患者中HPV亞型感染情況分布

520例CIN患者中，共464例患者感染HPV，陽性率為89.23%，其中宮頸上皮內瘤變低等級CIN（CIN 1）患者為348例，相應占比為66.92%，患者年齡分布在18-75歲，中位年齡為(36.78±9.35)歲，HPV的感染率為86.21%(300/348)；宮頸上皮內瘤變高等級CIN（CIN 2、3）患者共172例，相應占比為33.08%，患者年齡分布在19～76歲，平均年齡為(36.86±9.18)歲，HPV的感染陽性率為90.70%(156/172)；對兩組患者的一般資料、HPV感染的陽性率等予以統計學分析，結果有P＞0.05，不具有統計學意義。

348例CIN 1患者中共檢出21種HPV亞型，其中HRHPV亞型占比依次為HPV16、HPV58、HPV52、HPV33及HPV31，如下表1所示；172例CIN 2、3患者中，共檢出19 種HPV亞型，其中HR-HPV亞型占比依次為HPV16、HPV158、HPV133、HPV152和HPV131型，如下表2所示。

表1 CIN1患者中HR-HPV亞型檢出率[n=348]

表2 CIN 2、3患者中HR-HPV亞型檢出率[n=172]

2.2 HR-HPV感染亞型與CIN疾病級別之間的相關關系

520例CIN患者中，CIN 1患者為348例，相應占比為66.92%，CIN 2、3患者共172例，相應占比為33.08%，不同CIN級別患者中HPV16與HPV52型檢出率比較差異具有統計學意義（x2分別為，P＜0.05），而其余亞型于CIN不同級別患者中的檢出率比較差異不具有統計學意義（P＞0.05）。

Logistic回歸分析如下表3所示，可以看出HPV16、HPV33與患者CIN級別呈正相關性，而HPV52、HPV59與CIN級別呈負相關性。

表3 Logistic回歸分析[n=520]

3 討論

相關調查發現，近年來，宮頸癌的發病率逐年上升，在女性的惡性腫瘤占據第2位，對女性健康的產生極大地威脅。宮頸癌從癌前病變逐步發展并最終癌化，因而及早診斷及時給予針對性的干預措施對改善患者預后具有積極的意義。張賢等[6]通過研究認為，及早發現并給予有效的治療有助于降低宮頸癌的發病率與病死率。近年來隨著對宮頸癌研究的不斷深入，HR-HPV于宮頸癌疾病的發生與發展中所表現出的作用越來越清晰，極大地提升了對宮頸癌疾病的篩查效率。

相關研究表明，人黏膜的上皮細胞與皮膚為HPV最主要，也是最常見的感染位置，且感染組織與宿主的特異性也較高。萬曉春等[7]通過研究表明，將近90%以上的CIN患者其病變部位在宮頸外口的鱗狀細胞。對于HR-HPV主要是借助母嬰的垂直傳播及直接接觸等各種方式進行傳播，若HR-HPV長期的持續性感染將極易導致CIN疾病的發生[8]。因而，對HR-HPV給予早期的檢測對于改善患者治療預后具有積極的意義。有研究認為，HR-HPV感染屬于CIN疾病的主要致病因素，同時其也是誘發宮頸癌的必要條件。相關研究表明，HR-HPV和CIN級別存在高度的相關性，且與CIN 2、3的相關性要比CIN1更為明顯，這對疾病的轉歸和預后評估具有較大的意義和價值[9]。

此次研究對患者施以HPV-DNA的分型檢測，結果表明CIN 1與CIN 2、3患者高危亞型的感染率分別為86.21%和90.70%，對比差異不具有統計學意義（P＞0.05）。同時發現CIN1和CIN2、3之間患者感染HR-HPV亞型種類及占比存在差異，CIN1中CIN 1患者中共檢出21種HPV亞型，其中HR-HPV亞型占比依次為HPV16、HPV58、HPV52、HPV33及HPV31；CIN2、3中共檢出19種HPV亞型，其中HR-HPV亞型占比依次為HPV16、HPV158、HPV133、HPV152和HPV131型。其中，HPV16與HPV52亞型與不同級別CIN患者中的檢出率對比差異具有統計學差異(P＜0.05)。經Logistic回歸分析表明，HR-HPV各亞型中HPV16、33、52及59型與CIN病變程度存在相關性，其中HPV16、HPV33型與CIN病變級別呈正相關性，HPV52、HPV59型與CIN病變級別呈負相關性。楊英捷等對以往相關研究進行總結時發現，HR-HPV亞型中HPV16、HPV3l、HPV33和宮頸病變級別存在密切的相關性，這與本文研究結果相似。

綜上所述，CIN病變級別與HR-HPV感染存在密切的關系，而HPV16、HPV52與CIN病變級別呈正相關性，且HPV16、HPV52亞型感染是患者出現高瘤變的危險因素。