齊墩果酸抑菌活性的初步研究

黑育榮 劉彥超

【摘? ?要】 以20種植物病原菌為供試菌種，采用離體抑菌活性測定法系統地測定了齊墩果酸的抑菌譜和抑菌毒力。結果表明，齊墩果酸對多種植物病原菌具有抑制作用，對油菜菌核病菌、番茄早疫病菌、煙草赤星病菌、白菜黑斑病菌、楊樹潰瘍病菌、棉花黃萎病菌和小麥赤霉病菌菌絲生長的抑制效果高于對其它供試病原菌，其中對番茄早疫病菌和白菜黑斑病菌防效最高，其有效中濃（EC50值）分別為59.3和74.0mg L-1。本研究結果為將齊墩果酸開發為植物原殺菌劑提供了一定的理論依據。

【關鍵詞】 齊墩果酸;植物病原菌;抑菌譜;植物源殺菌劑

齊墩果酸（oleanolic acid，簡稱OA），屬于五環三萜類化合物，化學名稱3β-hydroxy-olea-12-en-28-oic acid，在多種植物中以游離體和配糖體的形式存在 [1]。

以往對于齊墩果酸的研究都在于醫藥和醫用方面進行的較多[2-3]，相比之下，對其農藥學活性的測定較不多見。僅有的農藥學活性還主要集中在其殺蟲活性[4]。本實驗就從其農藥抑菌活性入手，進行農藥菌種活性篩選，測定OA的抑菌譜，為開發出新型高效的殺菌農藥和為下一步對OA進行結構修飾和衍生物的合成等試驗提供參考資料和奠定基礎。

1? 材料與方法

1.1? 供試菌株

20種植物病原菌菌株（見表1）均由西北農林科技大學無公害農藥研究服務中心提供。

1.2? 供試藥劑

齊墩果酸（98%）（安耐吉化學試劑公司），50%速克靈可濕性粉劑（奧邦生物科技（北京）有限公司）

1.3? 培養基

馬鈴薯瓊脂培養基（PDA培養基）。

1.4? 抑菌活性測定方法

1.5? 數據處理方法

測定所得數據采用SPSS 13.0進行統計分析，數據間多重比較采用Duncan氏新復極差法進行。

2? 結果與分析

2.1? 齊墩果酸的抑菌譜的確定

由表1可知，齊墩果酸對多種植物病原菌具有抑制作用，但其抑菌效果并不理想，抑菌譜較窄。100mg/L的供試濃度下，對20種病原菌的抑制率都普遍不高，其中對玉米大斑病菌、蘋果輪紋病菌 、水稻稻瘟病菌、黃瓜炭疽病菌、棉花立枯病菌、黃瓜枯萎病菌、番茄灰霉病菌、小麥根腐病菌、辣椒疫霉病菌、蘋果腐爛病菌、小麥紋枯病菌的抑制率都在30%以下，對蘋果腐爛病菌則完全無效。但對于小麥赤霉病菌、煙草赤星病菌、油菜菌核病菌、棉花黃萎病菌、番茄早疫病菌、楊樹潰瘍病菌、白菜黑斑病菌防效在40%以上，其中最高為對番茄早疫病菌抑制率為77.42%，對白菜黑斑病菌和油菜菌核病菌也有較好的防治效果。而當供試濃度降至50mg/L時，齊墩果酸對番茄早疫病菌、油菜菌核病菌的抑制率仍高于30%，但對其他大多數菌種幾乎都未表現出明顯抑制效果，尤其對蘋果腐爛病菌、小麥根腐病菌和黃瓜炭疽病菌抑制率為0。齊墩果酸分別在50mg/L和在100mg/L濃度下對煙草赤星病菌、小麥赤霉病菌、棉花黃萎病菌、番茄早疫病菌、楊樹潰瘍病菌、白菜黑斑病菌等6種病原菌的抑制作用。

2.2? 齊墩果酸對6種病原菌的抑制毒力測定

在對齊墩果酸進行抑菌譜測定的基礎上，測定了其EC50值，由表2可見，齊墩果酸對番茄早疫病菌的毒力最高，EC50為59.3 mg L-1;對白菜黑斑病菌和煙草赤星病菌的毒力次之，EC50分別為74.0和94.8mg L-1;而對棉花黃萎病菌、楊樹潰瘍病菌和小麥赤霉病菌的毒力較差，EC50分別為111.3、 108.1和115.8mg/L。由此可以看出，齊墩果酸對于番茄早疫病菌和白菜黑斑病菌在適當濃度內具有一定的防效，有必要對其進行結構修飾后在進行進一步的活性測定，以篩選出活性更高的衍生物。

3? 討論

本研究表明齊墩果酸對多種植物病原菌具有抑制作用，尤其對于番茄早疫病、白菜黑斑病等6種菌株具有較明顯的抑制作用。五環三萜具有廣泛的抑菌活性，對其進行抑菌活性研究，可望發現新的抑菌先導物。

以往對齊墩果酸的研究多在于消炎、免疫抑制[5]、抑制血小板凝集、降糖[6]、抗氧化[7]和利尿[8]等，及護肝[9]、抗高血脂[10]、抗動脈粥樣硬化[11]、抗腫瘤[12]等，對其農用活性關注甚少。本實驗從農用抑菌活性入手，測定了其殺菌譜，為下一步對它進行結構修飾和衍生物的合成等試驗提供參考資料和奠定基礎。

齊墩果酸在植物界分布廣泛，這為研究并開發齊墩果酸的農用抑菌活性提供了必要的原料來源。近年來，為了進一步增強齊墩果酸的生物活性，改善溶解性，提高生物利用度，對齊墩果酸的化學結構修飾與構效關系的研究也引起人們的普遍關注。以五環三萜為活性先導物，研究其化學結構與生物活性的關系，是研制新型農用殺菌劑的一條有效途徑。