酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)及其在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用

石寶琴

黃岡市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所 湖北黃岡 438000

酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（ELISA）在檢測(cè)的時(shí)候，主要是利用酶具有催化作用的特性，然后再根據(jù)抗原抗體反應(yīng)中的特殊性能進(jìn)行完全的檢測(cè)。在檢測(cè)的過(guò)程中，抗原、抗體會(huì)直接吸附至檢測(cè)物體的表面上，與此同時(shí)還會(huì)保持自身的活動(dòng)，而且，在和酶結(jié)合之后所形成的物體都可以維持自身的活性。酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)從20世紀(jì)末就已經(jīng)被開發(fā)利用。伴隨科學(xué)技術(shù)的不斷提升，這項(xiàng)技術(shù)也已經(jīng)逐漸的成熟。現(xiàn)如今已經(jīng)開發(fā)研制出更多的檢測(cè)方式。例如：雙抗體夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法等等。其中雙抗體夾心法是屬于不競(jìng)爭(zhēng)類的反應(yīng)，不競(jìng)爭(zhēng)類的反應(yīng)技術(shù)在檢測(cè)食品的過(guò)程中，主要是用復(fù)合物形成量進(jìn)行有效的判斷和分析。因?yàn)闄z測(cè)過(guò)程中具有非常高的敏感性，檢測(cè)過(guò)程在一定程度上會(huì)非常迅速，所以酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)已經(jīng)成為現(xiàn)如今食品檢測(cè)領(lǐng)域中被廣泛使用的技術(shù)。在藥物殘留和違禁品藥物等方面都有非常普遍的應(yīng)用[1]。

1 酶聯(lián)免疫吸附分析的形式

酶聯(lián)免疫吸附主要有三種，分別是：固體酶聯(lián)免疫吸附分析方式，這主要是根據(jù)固定的載體進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，固定的載體形態(tài)主要有三種，分別是磁珠、試管和微孔板；板式的酶聯(lián)免疫吸附分析法是現(xiàn)如今使用最為廣泛的形式；試紙條免疫吸附分析法是屬于定性的檢測(cè)技術(shù)，和試劑盒子相比較擁有比較方便和快捷等優(yōu)勢(shì)；管式酶聯(lián)免疫吸附法，可以增強(qiáng)反應(yīng)物的體積，從而實(shí)現(xiàn)高性能的實(shí)驗(yàn)，而且可以作為一種色杯直接進(jìn)行檢測(cè)。

2 酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用

2.1 農(nóng)藥殘留的檢測(cè)

農(nóng)藥殘留主要是指一些動(dòng)物和植物在特殊的環(huán)境中可能使用過(guò)一些農(nóng)藥。這些農(nóng)藥被儲(chǔ)存起來(lái)，在其外表或者內(nèi)部存在的農(nóng)藥原型以及代謝物等雜質(zhì)。根據(jù)近幾年的新聞報(bào)道可知，大量的使用農(nóng)藥，導(dǎo)致糧食和蔬果中存在的農(nóng)藥殘留非常大，而且持續(xù)的呈上漲趨勢(shì)。農(nóng)藥殘留已經(jīng)成為我國(guó)現(xiàn)如今非常重視的問題之一。檢測(cè)農(nóng)藥殘留利用傳統(tǒng)的方式將會(huì)消耗大量的財(cái)力和人力，而且對(duì)實(shí)驗(yàn)的環(huán)境和器皿要求都極高。然而酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的操作非常的簡(jiǎn)單和方便，可以快速的檢測(cè)出大量存在農(nóng)藥殘留的物體，已經(jīng)被很多國(guó)家運(yùn)用。發(fā)達(dá)國(guó)家在20世紀(jì)末就已經(jīng)開始控制農(nóng)藥殘留，并且建立了相關(guān)的檢測(cè)體系，研究出了快速檢測(cè)食物農(nóng)藥殘留的試劑盒。因此，我國(guó)也加大了對(duì)這項(xiàng)技術(shù)的投入，實(shí)現(xiàn)了酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，檢測(cè)范圍可以精確到ng和pg的水平[2]。

2.2 動(dòng)物中獸藥殘留的檢測(cè)

獸藥殘留主要是指在動(dòng)物或者相關(guān)的產(chǎn)品中，例如：牛奶、肉類和雞蛋等食品中發(fā)現(xiàn)存在的藥物或者代謝物，其中包括的獸藥殘留等相關(guān)雜質(zhì)。獸藥殘留的問題也逐漸的越來(lái)越嚴(yán)重，當(dāng)人們?cè)谑秤眠^(guò)量的藥物殘留時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)中毒的現(xiàn)象。嚴(yán)重的危害人們的身體健康。伴隨酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的發(fā)展，在進(jìn)行獸藥殘留檢測(cè)的時(shí)候，主要采用的是活化酯法，合成具有2-甲基-5-硝基咪唑通用結(jié)構(gòu)的半抗原制備相應(yīng)通用結(jié)構(gòu)抗體。利用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)可以檢測(cè)不同動(dòng)物身上的藥物殘留，并且回收率范圍在85%-108%之間，檢測(cè)限達(dá)1．9×10-4mg/L。與此同時(shí)，研究出酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)檢測(cè)出食品里存在紅霉素殘留，其回收范圍在69%-107%之間。由此可得，酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的結(jié)果更加的方便和高效。

2.3 食品中違禁添加物的檢測(cè)

伴隨近幾年，“瘦肉精事件”的不斷發(fā)酵，食品中的違禁添加物也被重視。“瘦肉精”的學(xué)名為鹽酸克侖特羅，是一種人工合成的興奮劑。瘦肉精可以被人體或者動(dòng)物很好的吸收，以此提升動(dòng)物的瘦肉率，被很多無(wú)良的商家加以利用。但是，瘦肉精對(duì)人類的身體有非常大的危害，長(zhǎng)期大量的使用會(huì)出現(xiàn)頭暈、心悸等中毒現(xiàn)象，嚴(yán)重情況下，可能會(huì)發(fā)生癌變和畸形[3]。一些相關(guān)的工作人員已經(jīng)研究出動(dòng)物中的檢測(cè)限達(dá)0．05ng/ml，和其他的激素存在交叉反應(yīng)。

2.4 轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)

伴隨轉(zhuǎn)基因食物漸漸進(jìn)入人們的視野，轉(zhuǎn)基因食品的安全性已經(jīng)成為目前食品安全需要格外重視的問題。因?yàn)楝F(xiàn)如今還沒有達(dá)成共識(shí)。所以有很多的國(guó)家依然對(duì)轉(zhuǎn)基因食品實(shí)行嚴(yán)格的控制，比如在轉(zhuǎn)基因食品的包裝上標(biāo)明。轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)主要也是通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，檢測(cè)的原理主要是通過(guò)對(duì)一些特殊的蛋白進(jìn)行分析，從而檢測(cè)出食物中是否含有轉(zhuǎn)基因成分。

2.5 病原微生物檢測(cè)

現(xiàn)如今，病原微生物也是導(dǎo)致食品污染的一個(gè)重要原因。普通的檢測(cè)方式主要是利用分離培養(yǎng)或者是進(jìn)行微生物實(shí)驗(yàn)。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，其檢驗(yàn)的時(shí)間比較長(zhǎng)，而且一般需要6-7個(gè)小時(shí)。而且有很多的細(xì)菌，例如大腸桿菌很容易隨著環(huán)境的變化進(jìn)入一種休眠的狀態(tài)，而如果進(jìn)入合適的環(huán)境中會(huì)立刻復(fù)蘇，但是依然具有致病的危險(xiǎn)。因此，通過(guò)常規(guī)的方式會(huì)存在一些遺漏，然而利用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)可以有效的防止這種現(xiàn)象出現(xiàn)。

2.6 其他成分的檢測(cè)

在食品安全中，有一些過(guò)敏性的殘留物檢測(cè)也是需要重視的內(nèi)容。食品中的過(guò)敏性殘留物問題已經(jīng)成為現(xiàn)如今甚至全世界都面臨的一個(gè)重大問題，引起廣大社會(huì)群體的關(guān)注。根據(jù)FAO的報(bào)告，食品中容易出現(xiàn)過(guò)敏性的有牛奶、雞蛋等八種，這些食品中都含有蛋白質(zhì)，所以在進(jìn)行檢測(cè)的時(shí)候通常使用夾心酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)[4]。

3 結(jié)語(yǔ)

食品安全已經(jīng)成為現(xiàn)如今非常重要的問題之一，在進(jìn)行食品檢測(cè)的過(guò)程中，利用酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)可以簡(jiǎn)化其檢測(cè)步驟，實(shí)現(xiàn)高效檢測(cè)，不僅提升了靈敏性，而且投入成本較低，不會(huì)產(chǎn)生放射性污染等等，具有非常明顯的優(yōu)勢(shì)，在食品安全檢測(cè)中具有重要的作用。