HPLC法測定安康顆粒中阿魏酸的含量

袁文洪 高宇明 謝艷 何琴 吳秀清

【摘?要】目的：采用HPLC法測定安康顆粒中阿魏酸的含量。方法：色譜柱Waters XSelect HSS T3（4.6×250 mm，5 μm）;流動相：甲醇-0.085%磷酸溶液（25∶75）為流動相，等度洗脫;流速：1.0 mL/min;檢測波長：316 nm;柱溫：30 ℃。 結果：阿魏酸對照品在0.224-2.247 μg/mL濃度范圍內與峰面積線性關系良好，r=0.9994;平均回收率為100.31%（RSD=1.58%）。 結論：所采用的方法準確、可靠，可行性及重復性良好，能有效控制安康顆粒的質量。

【關鍵詞】安康顆粒;阿魏酸;高效液相色譜法

【中圖分類號】R284.1?【文獻標志碼】A?【文章編號】1007-8517（2019）19-0042-02

Abstract：Objictive To establish a HPLC method for the simultaneous content determination of ferulic acid in Ankang Granules.Methods The analysis of methanol-0.085% phosphoric acid（25∶75） extract of Ankang Granules was performed on a 30℃ thermostatic InertsiL?Waters XSelect HSS T3（4.6×250 mm，5 μm），with the mobile phase comprising of methanol-water flowing at 1.0 mL/min. Results Ankang Granules showed good linear relationships within their own ranges（ r=0.9994），whose average recoveries were 100.31%，with the RSDs of 1.58%.?Conclusion This sensitive，teliable and accurate mehtod can be used for the quality control of Ankang Granules.

Key?words：Ankang Granules;Ferulic Acid;HPLC

安康顆粒是由紅參、銀耳、當歸、山藥、豬脊髓、鹿茸、山楂等七位藥材煎煮制成的顆粒劑，具有安和五臟、健腦安神的功效，主要用于治療頭目眩暈、耳鳴、四腳乏力疲軟、食欲不振、睡眠不深、多夢等癥。現執行標準為《國家食品藥品監督管理局國家藥品標準WS3-B-2888-98-1》[1]，檢驗項目僅有性別和理化鑒別兩項，均較簡單，不能有效控制該樣品質量。在安康顆粒處方組成中，當歸用量較大，為主要組成部分，當歸的主要有效成分為阿魏酸。本實驗建立HPLC法測定安康顆粒中阿魏酸的含量，為該制劑質量控制提供參考。

1?儀器與材料

1.1?儀器?LC-20AT液相色譜儀（含SPD-20A檢測器，島津）;MS205DU電子天平（梅特勒托利多），水浴鍋 。

1.2?材料?阿魏酸對照品（批號110773-201614，中國食品藥品檢定研究院）。理氣舒心片（批號：20180803、20190309、）。甲醇（色譜純，Fisher公司），磷酸，水為注射用水;

2?方法與結果

2.1?溶液的制備

2.1.1?對照品溶液的制備?取對照品阿魏酸適量，精密稱定，加甲醇制成濃度為11.236 μg/mL的對照品溶液。

2.1.2?供試品溶液制的制備?取研細安康顆粒約10 g，精密稱定，精密加甲醇10mL，稱定重量，加熱回流30min，冷卻后用甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.45 μm濾膜過濾，即得供試品溶液。

2.2?色譜條件?色譜柱在：Waters XSelect HSS T3（4.6×250 mm，5 μm）;流動相：甲醇-0.085%磷酸溶液（25∶75）;流速：1.0 mL/min;檢測波長：316 nm;柱溫：30 ℃。色譜圖見圖1、圖2。

2.3?線性關系考察?精密吸取“2.1.1”項下對照品溶液適量，加甲醇溶液稀釋制備成濃度分別為0.224、0.449、0.899、1.124、2.247 μg/mL系列混合對照品溶液，按照“2.2”項下的條件進行測定。以對照品的質量濃度為橫坐標（X）、峰面積為縱坐標（Y）進行線性回歸，Y=83328X-1355.2，r=0.9994，表明阿魏酸在該0.224～2.247濃度范圍內線性關系良好。

2.4?精密度試驗?精密吸取“2.1.1”項下對照品溶液，在“2.2”項色譜條件下，連續進樣6次，測得其RSD分別為0.13%，表明儀器精密度良好。

2.5?穩定性試驗?精密稱取研細的安康顆粒粉末，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液。于制備后0、2、4、8、16在“2.2”項色譜條件下進樣，測得其RSD為1.08%，表明供試品溶液在16 h內穩定性良好。

2.6?重復性試驗?精密稱取研細的安康顆粒粉末，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液6份，在“2.2”項色譜條件下進樣，測得其RSD為2.85%，表明該方法重復性良好。

2.7?加樣回收率試驗?取6份已知含量的研細的安康顆粒粉末約10 g，精密稱定，精密加入“2.1.1”項下對照品適量后，按按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，在“2.2”項色譜條件下進樣，以外標法計算各阿魏酸的量，計算其加樣回收率，結果見表1。

2.8?樣品含量測定?取安康顆粒供試品，按“2.1.2”項下方法平行制備供試品溶液各2份，在“2.2”項下色譜條件下進樣，以外標法計算阿魏酸的含量，結果見表2。

3?分析與討論

3.1?指標成分選擇?在該藥品處方組成中，僅有紅參、當歸在《中國藥典》2015年版[2]中收載有含量測定項。經過試驗發現，紅參因處方量較小，且經過煎煮后，轉移到制劑中的人參皂苷量較低，導致無法檢出。故本實驗選擇當歸中的阿魏酸進行含量測定，以評估安康顆粒的質量。

3.2?測定方法選擇?樣品前處理方面，本實驗考察了甲醇提取、70%甲醇提取、乙醇提取、70%乙醇提取，發現甲醇提取出的阿魏酸量最高，故最終選取了甲醇作為提取溶劑。

綜上所述，本實驗所建立的高效液相色譜方法操作簡單，重復性好，可在較短時間內實現安康顆粒中阿魏酸的含量測定。因此，該方法可用于安康顆粒的質量控制與評價。

參考文獻

[1]國藥典委員會.衛生部藥品標準.中藥成方制劑（第八冊）[S].1993：87.

[2]國藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫藥科技出版社，2015.

（收稿日期：2019-07-23?編輯：劉斌）