一例水貂感染犬瘟熱病毒的診治*

王建軍，王玉茂**

(山東省濱州畜牧獸醫研究院，山東濱州256600)

犬瘟熱（canine distemper，CD）是由犬瘟熱病毒（canine distemper virus，CDV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病[1]，CDV 感染的宿主范圍非常廣泛，除食肉目的8 個科動物均易感外，其還感染偶蹄目豬科靈長目獼猴屬內多種動物[2]，近年來隨著我國毛皮動物養殖業的快速發展，水貂感染CDV 常有發生，CDV已成為威脅我國水貂養殖業的頭號傳染病，嚴重降低了我國水貂養殖業的經濟效益，嚴重危害我國水貂養殖業甚至毛皮動物養殖業的健康發展。2018 年7 月，某水貂場飼養的幼貂率先發生了一種以體溫升高、食欲減退、死亡前抽搐、口吐白沫為主要特征的疑似CDV 感染疫情，現將整個診斷和治療過程匯報如下。

1 發病情況

該水貂場共飼養水貂3，000 余只，2018 年7 月初，陸續有幼貂開始發病，發病水貂主要表現為體溫升高、食欲減退、死亡前抽搐、口吐白沫，曾經使用抗生素進行治療，但臨床癥狀不但未見好轉且逐步嚴重。

2 臨床癥狀

發病水貂體溫升高至41 ℃左右，進食減少甚至無進食，精神沉郁，鼻鏡干燥，鼻部黏著豆腐渣樣的干燥物，眼部具有膿性眼眵，被毛蓬亂，無光澤，病初糞便呈蛋清樣，后期糞便呈黑色煤焦油樣，一般水貂在出現癥狀后3～5d 內死亡，死亡前期可見病貂運動失調，肌肉震顫，抽搐，口吐白沫，上吐下瀉，口咬籠網并發出刺耳的怪叫聲。

3 剖檢病變

對病死水貂進行解剖，可見內臟器官廣泛性出血，肺臟出血、肺泡塌陷，肝臟腫大、質脆、表面有出血斑，脾臟腫大、壞死、具有出血點，腸道呈出血性炎癥，腸粘膜脫落，喉頭和氣管環出血、充血。

4 實驗室診斷

根據發病情況、臨床癥狀和剖檢病變特征初步診斷懷疑為CDV 感染，無菌采集病死水貂的肺臟、肝臟、脾臟等病變組織進行實驗室PCR 檢測。根據于紅鴿等[3]建立的水貂犬瘟熱病毒RT-PCR檢測方法設計合成1 對CDV 特異性檢測引物，該對引物可特異性擴增片段大小為287 bp 的CDV 3N 蛋白基因。將采集的病料樣品加入3 倍體積滅菌生理鹽水中，利用勻漿機以1，000 rpm 搗碎1 min，取混懸液以12，000 rpm 離心5 min，吸取上清液。利用病毒基因組RNA 提取試劑盒（購自北京百泰克生物科技有限公司）提取病料上清液的基因組RNA。利用合成的CDV 特異性檢測引物對基因組RNA 進行一步法RT-PCR 擴增。一步法RT-PCR 反應體系為：2×Buffer 12.5 μL、上下游引物各0.5 μL、酶0.5 μL、RNA 5 μL、補水至25 μL。一步RT-PCR 反應程序為：50 ℃30 min；95℃5 min；95 ℃30 s，51 ℃30 s，72 ℃30 s，30 個循環；72 ℃8 min。RT-PCR 擴增產物經瓊脂糖凝膠電泳檢測顯示，擴增產物在大小約為287 bp 處具有一條特異性條帶，與預期擴增的片段大小完全一致，表明臨床病料樣品經CDV 特異性檢測為陽性。根據該水貂場的臨床發病特征以及實驗室PCR 檢測結果，綜合判定發病水貂感染了CDV。

5 治療措施

致病原確定為CDV 后，立即對病死水貂及其污染物進行無害化處理；對發病水貂隔離飼養；利用戊二醛消毒液對水貂及飼養環境進行徹底噴霧消毒；發病水貂立即注射CDV 單克隆抗體，注射劑量為2 mL/kg·bw，連續注射3d；對發病水貂靜脈注射白介素營養液（含5%葡萄糖），注射劑量為3 mL/kg·bw，連續注射7d；對未發病水貂緊急免疫接種二倍劑量的CDV 疫苗；對全場水貂大群投喂黃芪多糖，提高全場水貂的免疫力和抗病力；對全場水貂注射硫酸慶大霉素，防止發生繼發感染。經過采取上述綜合性治療措施，水貂死亡數量急劇下降，癥狀較輕的發病水貂逐漸好轉，更重要的是沒有新發病例，三天后無死亡水貂出現，一周后水貂基本全部恢復健康，此次疫情最終得到了有效控制。

6 討論

近幾年，隨著人們生活質量和消費觀念的逐步提高以及我國政府對特種經濟動物養殖優惠政策的不斷落地，我國毛皮動物養殖業得到了前所未有的快速發展，水貂的養殖規模與養殖密度穩定增長，但隨之而來的傳染病流行發生率亦隨之提高，素有"毀滅性傳染病"之稱的水貂犬瘟熱病毒的感染亦不斷增加。雖然我國大多數水貂養殖場均將水貂犬瘟熱列為主要疫病進行了疫苗免疫接種，但受到病毒潛伏期、水貂體況、免疫耐受、疫苗質量、免疫程序等方面的限制，水貂犬瘟熱疫苗的免疫接種常常出現免疫失敗[4]。本病例中，雖然該養殖場的種水貂已免疫接種過水貂犬瘟熱疫苗，但在幼貂母源抗體水平逐漸下降的時間點，未能及時對其進行疫苗的再次免疫接種，屬于免疫程序不合理導致了以往犬瘟熱疫苗的免疫失敗，最終導致了此次犬瘟熱疫病的爆發。根據當前我國疫病防控能力，疫苗免疫接種仍是控制犬瘟熱等烈性傳染病的重要法寶，故對于水貂犬瘟熱的綜合防控應該采取以加強生物安全和疫苗免疫接種為主的防控措施，同時加強母源抗體和疫苗免疫抗體的監測，科學合理的調整免疫程序，確保疫苗的免疫效果，避免免疫失敗。█