2017―2018年棉花推廣品種SSR標記純度檢測簡報

付小瓊，李超，李楚逸，彭軍*

（1.中國農業科學院棉花研究所/ 棉花生物學國家重點實驗室，河南安陽455000；2.鄭州大學，鄭州450001）

筆者多年利用簡單重復序列（Simple sequence repeat，SSR）分子標記檢測國家棉花區試參試品種的真實性和純度， 同時也協助部分省種子管理站檢測省級棉花區試品種的純度，積累了一些經驗。2017年、2018年繼續承擔了一些種子企業的雜交種和親本純度檢測的工作，現總結如下。

1 材料與方法

1.1 材料

2017年受9 家棉種企業和科研單位等的委托，承擔了雜交種和親本純度鑒定工作，接受雜交棉樣品100 份，親本樣品161 份。

2018年受13 家棉種企業和科研單位等的委托，承擔了雜交種、常規種和親本純度鑒定工作，接受雜交棉樣品152 份，親本樣品21 份及常規品種樣品13 份。

1.2 檢測方法

水磨棉仁，離心后抽提上清液作模板，采用15對核心引物進行檢測，具有快速、低污染的特點[1]。

1.3 判別方法

15 對核心引物擴增的圖譜有2 對以上的圖譜與標準圖譜不一致判定為雜株。通過圖譜與親本比對可以判斷雜株的不同類型，有母本、父本，有雜交雜株，也有混入的其他常規棉種子。 SSR 標記純度為符合標準圖譜的種子數占總檢測數的百分率。 根據多年的檢測經驗， 雜交種在80%以上為合格，在生產上優勢表現明顯。 如果母本與雜交種形態差異較大的品種，母本漏制種的比例需要嚴格控制，SSR標記純度應保證在90%以上才能判定為合格[2-5]。

2 結果與分析

2.1 雜交棉SSR純度檢測結果

2017年檢測的100 份雜交種SSR 標記純度均在80%以上， 均達到合格水平， 其中有82 份SSR標記純度在90%以上（表1）；2018年檢測的152 份雜交種均在80%以上， 均達到合格水平， 其中有132 份在90%以上（表2），總體制種質量較好。各制種公司所有雜交種批次中沒有用F2冒充F1現象，沒有人為摻雜現象，純度較差的種子均是由自交造成的。

2.2 2013―2018年種子企業雜交種純度檢測的比較

由表3 可知，2013年雜交種純度差，SSR 標記純度在80%以上僅占39.9%；2014、2015年各批次的SSR 標記純度均在80%以上；2016年有2 個批次SSR 純度在80%以下，98.7%的批次在80%以上；2017、2018年各批次SSR 標記純度均在80%以上，其中2018年SSR 標記純度大于90%的比例為86.8%，為6年中最高。 可見，近幾年生產上雜交棉種子質量不斷提高， 純度明顯優于2014年之前的雜交種[2-5]。

表1 2017年各棉種企業委托鑒定雜交種的SSR 標記純度檢測結果

表2 2018年各棉種企業委托鑒定雜交種的SSR 標記純度檢測結果

表3 2013―2018年送檢雜交種樣品的純度分布

2.3 制種親本的檢測結果

2017年檢測了3 個公司的161 個批次的親本純度，SSR 標記純度在 83.3%～100.0%，7 個批次的純度在90%以下（表4）；2018年檢測了4 個公司的21 個批次的親本純度，SSR 標記純度在83.3%～100.0%，90%以下的批次僅為 2 個（表 5），總體情況較好。對純度90%以下的親本在制種前要加強去雜的工作。

表4 2017年雜交制種的親本檢測結果

2.4 常規品種的SSR純度檢測結果

2018年檢測常規棉品種批次13 個，SSR 標記純度在83.3%～100.0%，SSR 標記純度在90%以下的批次有3 個（表6）。 常規棉保純相對簡單，但也要注意收獲前的去雜，保證棉種的純度，保持品種的種性，延長品種的使用年限。

表5 2018年雜交制種的親本檢測結果

表6 2018年棉花常規品種檢測結果

3 結論與建議

3.1 親本的純度是保證雜交種純度的前提條件

在親本繁殖過程中要提純復壯，收獲時要單收、單曬和單軋，加工中的各個環節要注意清理機器，貯存時標簽應詳細。檢測中發現，某些公司由于親本純度不高或發放親本時發生錯誤，導致雜交種報廢不能用作商品種子。 因此，來年制種前要認真去雜，保證制種時親本的純度高。

3.2 適度控制制種戶的制種面積，減少自交鈴

近幾年純度偏低的批次主要原因均為自交鈴偏多，是由早晨剝大花現象導致的。 在人力缺少的情況下，應減少制種戶的制種面積，以利于保證質量。而且制種地塊布局應適當分散，以便解決用工問題。

3.3 職責分明，建立互信互利的制種合作機制

在親本純度較高的前提下制種，年終收種子時進行分子檢測，合格的回收，不合格的不收，嚴格按合同執行，保障雙方的利益。 種子公司適當減少一些監控環節，節省成本，讓利于制種農戶，提高農戶的自覺性。

3.4 提高F1的質量，利于科學合理利用F2

目前西北內陸棉區為主栽棉區，有很大一部分為風險棉區，前期氣溫不穩定，后期降霜早，生產上要推廣早發早熟的品種，雜交棉為首選類型，早熟品種（雜交種）易脫葉雜質少，有利于機采棉的發展。 但目前人工制種成本過高，在雜交一代不能滿足生產需求的情況下，可考慮利用F2的剩余優勢。而F2較大面積的應用依賴于F1的質量。

3.5 培養種子流通環節的誠信意識

種子企業在收獲種子時送樣檢測，監控種子的制種質量是有必要的。 而在后期的流通經營環節中，一經換手又存在檢測問題，這種互不信任的現象增加了檢測的工作量， 增加了種子經營的成本。種子經營要以誠信為本， 避免中途調包或以次充好，形成良好的經營流通合作方式。