卷柏炭化物對消化性潰瘍病理觀察研究

田奎蓉，任莉娜，王 嫘，王梓琪，李春鳴，劉俊林

（西北民族大學 生命科學與工程學院，甘肅 蘭州 730030）

卷柏，屬卷柏屬（Selaginella）植物，蕨類植物門石松綱（Lycopsida）卷柏科（Selaginellaceae），為植物界少見的單科單屬植物[1]，主要生長于沙漠地區，因其草葉枯萎后遇水又能重新煥發生機，并在短時間內恢復綠色，又被稱為“復活草”，這與其植株中所生物堿成分卷柏酸(selaginellic acid)有關[2]，復活草在中醫診療中被廣泛用于治療經閉痛經、跌撲損傷等病癥[3]，其碳化炮制后還具有化瘀止血的功效[4-5]。鄧祥堅等[6]研究還發現江南卷柏提取劑能加強 ADP 誘導的血小板聚集的能力，江南卷柏提取物還能降低高血脂小鼠血清中 TG和 TC 升高 HDL-C 水平[7]。卷柏藥用價值極高，具有良好的研究前景。近年來在江南卷柏中發現了多種具有生物活性的物質，其作用研究開發廣泛[8]。

消化性潰瘍是一種常見的消化系統疾病，非甾體類消炎藥 (Non-steroidal anti-inflammatory drugs, NSAIDs) 是引發胃及十二指腸等消化性潰瘍的主要病因[9]。近年來，以阿司匹林為主的非甾體類藥物得到越來越廣泛的應用。阿司匹林具有止痛、解熱、抗炎的功效，尤其是其抗血小板聚集的作用已成為心腦血管疾病治療和預防的常規藥物, 長期服用易引發消化不良，甚至消化道潰瘍、出血、穿孔等嚴重的并發癥[10]。研究采用中醫古法對卷柏進行炭化炮制[4-5]得到卷柏粉末對阿司匹林致大鼠消化性潰瘍模型進行干預治療，以探究卷柏炭化炮制品對消化性潰瘍模型的治療效果。

1 材料與方法

1.1 藥品、材料與儀器

無水乙醇、氯化鈉、甲醛、冰醋酸、二甲苯(均為分析純)，購自天津市富宇精細化工有限公司;醇溶性伊紅、蘇木精，購自上海伯奧生物科技有限公司；各熔點石蠟，上海標本模型廠生產。常規試劑購自天津大茂化學試劑廠。

Nikoncoolpix 4500 數碼照相機(日本尼康公司)；LEICA Histo stat 820 石蠟切片機；LEICA-DM500 光學顯微鏡（德國萊卡公司生產)；BX-UCB/BX61 圖像采集系統、Image-Pro Plus 6.0 圖像測量分析系統(日本奧林巴斯公司)。

1.2 試驗動物

30 只Wister 大鼠（雌雄各半），體重200～300 g 由蘭州獸醫研究所提供。

1.3 試驗方法

1.3.1 卷柏炭的制備 取潔凈的卷柏，置鍋內用武火炒至外表焦黑色，內呈焦黃色，噴淋清水，取出，低溫烘干，粉碎研磨，過60目篩[5]，保存備用。

1.3.2 灌胃藥液的煎制 取1.3.1中的卷柏碳化物5 g置于500 ml燒杯中加入200 ml蒸餾水文火煎制20 min，過濾取上清液，重復三次，合并上清液，旋轉蒸發，冷凍干燥，4℃保存備用。

1.4 阿司匹林所致大鼠消化性潰瘍模型模型建立

30 只Wister 大鼠（雌雄各半）給予阿司匹林溶液（2.5 mg/kg）灌胃造模為期 7 d，建立阿司匹林致消化性潰瘍模型小鼠模型（以大鼠出現便隱血陽性確定模型建立）[11]建模期間記錄體重、飲食、精神狀態等生理指標。

1.5 消化性潰瘍模型的治療

將成模大鼠分成分成 5 個組，分別為炭化低、中、高劑量組(2.5、5.0、10 mg/kg）卷柏炭水煎液灌胃，陽性對照組給予葵花胃康靈（20 mg/kg），陰對照組給予等量蒸餾水進行灌喂。治療7 d，快速采血，解剖分離胃腸，觀察記錄小鼠十二指腸潰瘍、十二指腸穿孔、出血點數量根據潰瘍評分標準記錄大鼠十二指腸潰瘍程度[12]。

1.6 統計學分析

采用 SPSS 統計軟件進行統計學分析，計量結果以`x±s 表示，多組間比較采用單因素方差分析與 T 檢驗判斷其顯著性。

1.7 組織切片制作

對治療后大鼠分組進行解剖，取其十二指腸用10%甲醛進行固定，然后制作HE染色病理組織切片。

2 結果與分析

如表1所示，陰性對照組十二指腸潰瘍指數遠大于正常組和各試驗組；陽性對照組、炭化高、中劑量組大鼠血清十二指腸潰瘍指數均極顯著降低；炭化低劑量組十二指腸潰瘍指數與陰性對照組相比有所降低；陰性對照組十二指腸潰瘍指數遠高于正常組，其中以碳化高劑量組降低最為顯著。

表 1 各組潰瘍指數比較(`x±s)

圖1所示，十二指腸組織大量炎性細胞浸潤、淋巴組織增生、腸化生、黏膜淺層形成淋巴濾泡、腸腺增生壞死。炭化高劑量組較中低劑量組炎性細胞浸潤較輕微，無淋巴濾泡生成，陽性對照組的腸絨毛結構依然存在。

圖1 大鼠十二指腸病理組織切片(HE×200)

3 結論

消化性潰瘍是較為常見的消化內科疾病，酗酒、不良生活習慣、非甾體類消炎藥等因素均可引發消化性潰瘍[13]。選用阿司匹林溶液建立大鼠消化性潰瘍模型。對干預治療的大鼠組織制作病理組織切片結果顯示試驗組大鼠十二指腸均有不同程度的病理變化。十二指腸潰瘍的病理特征主要表現為大量炎性細胞浸潤、淋巴組織增生、腸化生、黏膜淺層形成淋巴濾泡、腸腺增生。試驗數據表明炭化高劑量組(10 mg/kg)對胃潰瘍治療效果較好。