如何做好實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品采集保存與運(yùn)輸

文│金彩虹（山東省龍口市畜牧獸醫(yī)站）

張碧雪（山東省龍口市新嘉街道畜牧獸醫(yī)站）

曲文（山東省龍口市石良鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站）

在動(dòng)物疫病防控工作中，疫病監(jiān)測(cè)起著非常重要的作用。真實(shí)可靠的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)數(shù)據(jù)為動(dòng)物疫病的預(yù)防、診斷、治療等工作提供了科學(xué)依據(jù)。筆者認(rèn)為，在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作中，要想保證檢測(cè)數(shù)據(jù)真實(shí)有效，首先要確保檢測(cè)樣品的可靠性，因此樣品的采集、保存與運(yùn)輸至關(guān)重要。

一、樣品的采集

1.制定合理的采樣方案。采樣前，要根據(jù)檢測(cè)要求，制定合理的采樣方案，明確采樣目的、采樣方法、采集對(duì)象、采集場(chǎng)所、使用器材、采集份數(shù)、數(shù)量以及采樣人員等。

2.采樣技術(shù)。采樣人員事先要經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)，熟練掌握采樣技術(shù)，避免因采樣技術(shù)不熟練，導(dǎo)致被采樣動(dòng)物遭受過大的應(yīng)激反應(yīng)或傷害，甚至死亡。例如采集幼雞心臟血時(shí)，如果采樣人員不熟練采樣技術(shù)，就有可能造成因扎針位置、深淺度不規(guī)范，導(dǎo)致幼雞內(nèi)出血甚至死亡。因此，采樣前一定要熟練掌握操作技術(shù)。

3.采樣原則。在進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查、監(jiān)督檢驗(yàn)工作中，一般采取隨機(jī)抽樣的原則對(duì)群體進(jìn)行評(píng)價(jià)，根據(jù)抗體水平的高低和整齊度，評(píng)價(jià)疫苗的免疫效果和群體抗感染能力。在疫病診斷過程中，需要選擇有代表性的病死動(dòng)物的新鮮胴體進(jìn)行剖檢，采取病灶附近的組織作為檢驗(yàn)樣品。

4.無菌采集。采集的樣品應(yīng)保證無外源性污染，如在采血前，對(duì)進(jìn)針局部進(jìn)行酒精棉球擦拭消毒，使用滅菌針頭和注射器采樣。采集環(huán)境樣品和棉拭子時(shí)，使用的棉棒要提前進(jìn)行滅菌，采集后將樣品立即放入加蓋離心管或密封袋內(nèi)密封保存。

5.不同樣品的采集要求不同。在采集動(dòng)物血清樣品時(shí)，采完血首先要靜置，待其完全凝固后再移動(dòng)，如果采血后立即運(yùn)輸，會(huì)極易發(fā)生溶血或者呈現(xiàn)膠胨狀，影響檢測(cè)結(jié)果；采集含抗凝劑的樣品后，應(yīng)立即晃動(dòng)采集管，使抗凝劑和樣品充分混合，以免血液凝集；采集動(dòng)物棉拭子時(shí)，要確保棉棒蘸取足夠多的分泌物或排泄物等，否則視為無效采樣；在采取病死動(dòng)物的組織樣品時(shí)，要選擇剛死亡的新鮮動(dòng)物胴體，最好不要超過死亡后6小時(shí)。

6.樣品惟一性標(biāo)識(shí)。采集的樣品應(yīng)按要求做好編號(hào)，不能重復(fù)，以免混淆，被采畜禽也應(yīng)做好標(biāo)記，要讓樣品和來源動(dòng)物一一對(duì)應(yīng)，以便檢測(cè)結(jié)果可追溯，保證檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性和可靠性，切忌“張冠李戴”，混淆檢測(cè)結(jié)果。

7.采樣記錄要填寫規(guī)范。要認(rèn)真填寫動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)采樣單，詳細(xì)記錄采樣地點(diǎn)、場(chǎng)點(diǎn)名稱、動(dòng)物種類、樣品名稱、飼養(yǎng)規(guī)模、樣品數(shù)量、樣品編號(hào)、動(dòng)物免疫情況、疫病健康狀況等。采樣單上一定要有采樣人員和畜主的簽字或蓋章。采樣單要一式三份，一份采樣場(chǎng)點(diǎn)留存，一份采樣人員或其單位留存，一份隨檢測(cè)樣品送到檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室存檔。

8.采樣人員做好個(gè)人防護(hù)。很多病原微生物都會(huì)引起人畜共患病，如布魯氏桿菌病、弓形蟲病、附紅細(xì)胞體病等都是人畜共患傳染病。所以在采樣前，采樣人員要戴好手套、口罩，穿好隔離服等防護(hù)用品，避免采樣過程中感染病原微生物而發(fā)病。然而，在實(shí)際操作過程中，許多人往往忽視這一點(diǎn)。如采集牛羊等畜種血樣時(shí)，有些采樣人員嫌麻煩，不愿穿隔離服，也不愿戴口罩和手套，直接接觸病畜，如果采樣人員手上有傷口或者不徹底消毒就進(jìn)食，很容易感染人畜共患病。

二、樣品的保存

采集的樣品要按要求保存，需要分離血清的樣品要用離心機(jī)離心，取上清液保存。棉拭子要保存在保存液中，采集病料應(yīng)根據(jù)樣品特點(diǎn)以及保存時(shí)間，確定冷藏保存或冷凍保存，冷凍樣品不可反復(fù)凍融，以免影響檢測(cè)結(jié)果。樣品采集后要密封保存防止泄漏，污染環(huán)境。

三、樣品的運(yùn)輸

要用最短的時(shí)間，將樣品隨同采樣單安全送達(dá)指定實(shí)驗(yàn)室。需要低溫保存的樣品要加放冰袋，并在保溫箱中低溫保存和運(yùn)輸，最好有專車專人送到實(shí)驗(yàn)室。

運(yùn)輸樣品及采樣單的包裝：同一場(chǎng)點(diǎn)的樣品和采樣單放在一個(gè)包裝袋內(nèi)，不要與其他場(chǎng)點(diǎn)的樣品和采樣單混放；同一場(chǎng)點(diǎn)的不同樣品要分開包裝，比如組織樣品和血清樣品要分開包裝，不能混放；同一場(chǎng)點(diǎn)內(nèi)的組織樣品和血清樣品分開包裝后，可以再將兩者和采樣單放在同一個(gè)大的包裝袋內(nèi)。

總之，樣品的采集、保存與運(yùn)輸是整個(gè)檢測(cè)工作的第一步，也是非常關(guān)鍵的一個(gè)環(huán)節(jié)。因此，采集人員一定要嚴(yán)肅認(rèn)真地對(duì)待采樣工作，把實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品的采集、保存與運(yùn)輸做得更好。