化學(xué)原料藥的分析方法驗證、轉(zhuǎn)移與確認(rèn)

吳耿鋒，金泉泉，龔 珊

（上虞京新藥業(yè)有限公司，浙江杭州 312369）

中國是化學(xué)原料藥的出口大國。對于我國的化學(xué)原料藥來說，歐美國家是重要出口對象，在申請化學(xué)原料藥出口、對出口注冊文件進(jìn)行呈報過程中，企業(yè)應(yīng)結(jié)合自身實際情況進(jìn)行化學(xué)原料藥的分析方法驗證，同時對有關(guān)文件進(jìn)行證明并提供相應(yīng)資料；化學(xué)原料藥分析方法構(gòu)建與重現(xiàn)及驗證、轉(zhuǎn)移、確認(rèn)是重要構(gòu)成部分。通過化學(xué)原料藥分析方法的驗證、轉(zhuǎn)移與確認(rèn)，可以對質(zhì)量控制分析方法滿足檢驗要求與否進(jìn)行有效證明，可以對檢驗工作人員的操作能力進(jìn)行有效證明。

1 化學(xué)原料藥分析方法的定義與種類

根據(jù)有關(guān)指導(dǎo)性文件，化學(xué)原料藥分析方法就是指進(jìn)行分析的方式，需要對所有分析檢測需要的步驟進(jìn)行詳細(xì)描述，如試劑的配制、樣品、儀器的運用等。

化學(xué)原料藥分析方法具體如下：

第一類，即為測試化學(xué)原料藥主成分含量的分析方法；第二類，即為測試化學(xué)原料藥雜質(zhì)的分析方法；第三類，即為測試化學(xué)原料藥化學(xué)性能的分析方法；第四類，即為化學(xué)原料藥的鑒別實驗。

2 化學(xué)原料藥分析方法的驗證

2.1 系統(tǒng)適用性

系統(tǒng)適用性，就是指綜合多種不同的分析方法，系統(tǒng)性評估被分析的樣品組成、實驗操作規(guī)程、分析設(shè)備、儀器等，以對整個分析系統(tǒng)的可靠性、可適用性進(jìn)行確定。一般情況下，系統(tǒng)適用性實驗，主要包括分離度、拖尾因子、重復(fù)性等參數(shù)。

2.2 專屬性

專屬性，就是指當(dāng)輔料、降解產(chǎn)物、雜質(zhì)等成分可能存在時，精準(zhǔn)、可靠測定被分析物的能力。在完成其他驗證項目以后，方可進(jìn)行專屬性驗證項目。針對專屬性研究，還涉及分析典型樣品，應(yīng)選用較為靈敏的分析方法，同時能夠準(zhǔn)確定位雜質(zhì)。假如無法獲取雜質(zhì)，可以選擇其他替代品取代雜質(zhì)進(jìn)行相關(guān)研究。在色譜條件下，可以對相應(yīng)的混合溶液進(jìn)行合理配制，以對可識別程度進(jìn)行檢驗。其中，在編制研究報告時，應(yīng)將不同方法的綜合鑒別、獲得的結(jié)論、鑒別等記錄在內(nèi)。針對在色譜條件下所進(jìn)行的含量測定、純度檢查，需要將色譜圖相關(guān)信息進(jìn)行詳細(xì)說明，包括已知雜質(zhì)的分離度、雜質(zhì)的出峰順序、雜質(zhì)的定位等。

2.3 回收精密度、范圍、線性、準(zhǔn)確性

（1）線性

線性，就是指樣品內(nèi)的被測物與檢測結(jié)果在規(guī)定范圍中呈正比。在線性測量指定雜質(zhì)、藥品主要成分含量時，應(yīng)選用對照品或者標(biāo)準(zhǔn)品。在進(jìn)行線性測試時，不得低于5個不同的濃度水平，且每個濃度水平均應(yīng)配制3份。在配制不同濃度水平的溶液時，可以選用儲備溶液再稀釋的配制方法。一般情況下，在進(jìn)行配制時，會選用一個批號的可靠樣品，為避免出現(xiàn)誤差，需要根據(jù)溶液來選用相同批號的樣品，然后對所有測試結(jié)果與回收率進(jìn)行計算。

（2）回收精密度

回收精密度，就是指在評估回收率、線性的過程，可以選用每個濃度水平回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，以進(jìn)行計算。

（3）準(zhǔn)確性

準(zhǔn)確性，就是指利用本方法所得到的測定結(jié)果，其與實際情況比較近似的程度，大多數(shù)情況下主要通過回收率與線性而取得準(zhǔn)確性。

（4）范圍

范圍，就是指可以達(dá)到一定的線性、準(zhǔn)確性、精密度。大多數(shù)情況下，通過回收精密度、回收率、線性來獲取范圍。

2.4 精密度

第一，精密度，就是指在指定測試條件下，針對同一個樣品，在對其進(jìn)行多次取樣后而獲取的不同測定結(jié)果之間的接近程度。大多數(shù)情況下，精密度的表示方法包括相對標(biāo)準(zhǔn)偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差、一般偏差。

第二，測試精密度，就是指在較短時間間隔與同一操作條件下的精密度。例如，在各種實驗條件不變的條件下與較短時間下，重復(fù)分析測定來自于樣品中抽取的若干個供試品。

第三，方法精密度，就是指同一個分析工作者利用相同樣品來對6份樣品溶液進(jìn)行分別配制與測試。

第四，中間精密度，就是指利用相同樣品，兩位分析工作者對6份樣品溶液進(jìn)行分別配制，為對平時檢測中可能會產(chǎn)生的區(qū)別進(jìn)行有效模擬，對各種不同的試劑、儀器進(jìn)行使用，同時在不同時間條件下進(jìn)行有關(guān)測試。假如并不存在我們所關(guān)心的樣品成分，在這種情況下，可以在樣品中加入相應(yīng)不存在的成本，以獲取相應(yīng)值。

2.5 定量限與檢測限

定量限，就是指可以被常規(guī)定量的、具有一定精準(zhǔn)度、精密度的樣品的最低濃度。信噪比、各種色譜柱之間與各種儀器之間等各種方法條件均會影響定量限。

檢測限的檢測，能夠稀釋分析物，直至無法檢測本濃度下的分析物。

2.6 耐用性

耐用性，就是指故意稍微改動實驗參數(shù)時，不會對檢測結(jié)果造成影響的可靠性。假如各種分析條件會影響檢測結(jié)果，在這種情況下需要驗證分析條件。一般情況下，在實驗過程中，需要研究敏感度比較高的參數(shù)。其中，Ⅰ類耐用性的可接受標(biāo)準(zhǔn)為≤士1%，Ⅱ類耐用性的可接受標(biāo)準(zhǔn)為≤士0.2%，Ⅲ類耐用性的可接受標(biāo)準(zhǔn)為≤士3%。

3 化學(xué)原料藥分析方法的確認(rèn)

針對化學(xué)原料藥分析方法的確認(rèn)，美國藥典并未對其進(jìn)行詳細(xì)說明，僅提出了一些指導(dǎo)性建議。第一，通過進(jìn)行系統(tǒng)適用性實驗，以對檢驗系統(tǒng)滿足方法要求、實驗室的實際操作水平進(jìn)行有效證明；第二，對分析方法的復(fù)雜程度進(jìn)行判斷；第三，對檢驗結(jié)果具有一定影響的重要方法參數(shù)、分析方法的重要操作步驟進(jìn)行合理確定；第四，將分析方法的復(fù)雜程度作為主要依據(jù)，選取非常重要的一些分析方法學(xué)參數(shù)來進(jìn)行相關(guān)觀察。綜上所述，不難發(fā)現(xiàn)，對于化學(xué)原料藥分析方法的確認(rèn)來說，系統(tǒng)適用性實驗是重要內(nèi)容，通過進(jìn)行系統(tǒng)適用性實驗，能夠?qū)z驗系統(tǒng)滿足方法要求、實驗室的實際操作水平進(jìn)行有效證明，不過只是開展系統(tǒng)適用性實驗，并不能完全達(dá)到分析方法確認(rèn)的要求，還需要選用其他一些比較重要的方法學(xué)參數(shù)，各種檢測方法對應(yīng)不同的確認(rèn)內(nèi)容。

4 化學(xué)原料藥分析方法的轉(zhuǎn)移

化學(xué)原料藥分析方法轉(zhuǎn)移，就是指對符合標(biāo)準(zhǔn)的實驗室選用的操作過程或者分析測試方法進(jìn)行轉(zhuǎn)移。通過進(jìn)行化學(xué)原料藥分析方法的轉(zhuǎn)移，能夠?qū)z驗結(jié)果的質(zhì)量進(jìn)行有效保證，確保各種實驗室之間能夠獲取可靠、精準(zhǔn)、一致的檢測結(jié)果。

迄今為止，針對化學(xué)原料藥分析方法的轉(zhuǎn)移，美國藥典中記錄的有關(guān)化學(xué)藥品分析方法轉(zhuǎn)移是當(dāng)前僅有的指導(dǎo)性文件。由生產(chǎn)企業(yè)的研發(fā)實驗室轉(zhuǎn)移至質(zhì)控實驗室，這是一種常見的分析方法轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。作為質(zhì)控實驗室，應(yīng)對本實驗室能夠?qū)ρ邪l(fā)實驗室制定的分析方法的成功操作進(jìn)行有效證明。其中，比對性實驗是最為簡單的一種證明方法，即通過利用研發(fā)實驗室制定的分析方法，質(zhì)控實驗室比對研發(fā)實驗室測定的結(jié)果與相同樣品測定的結(jié)果，根據(jù)比對結(jié)果，達(dá)到轉(zhuǎn)移之前所確定的接收標(biāo)準(zhǔn)，則表明化學(xué)原料藥分析方法的轉(zhuǎn)移獲取成功。此外，針對方法建立實驗室的分析方法，實驗室能夠?qū)ζ涑晒κ褂茫枰贫ㄏ鄳?yīng)有效的文件系統(tǒng)，以對其進(jìn)行有效證明。

5 結(jié)束語

首先對化學(xué)原料藥分析方法的定義與種類進(jìn)行詳細(xì)論述，然后分別闡述了化學(xué)原料藥分析方法的驗證、轉(zhuǎn)移與確認(rèn)，有助于藥品生產(chǎn)企業(yè)實驗室質(zhì)控工作質(zhì)量的提高，能夠有效指導(dǎo)藥品的注冊工作。作為化學(xué)藥品生產(chǎn)企業(yè)，應(yīng)全面驗證化學(xué)原料藥分析方法，同時根據(jù)GMP 要求，將具體規(guī)范化管理工作做好。