冬蟲夏草多糖提取物對緩解小鼠運動應急性疲勞的影響*

黃學惠

（百色學院，廣西 百色 533000）

冬蟲夏草（Ophiocordyceps sinensis）是我國的一種名貴中草藥材，已有1 200 多年的歷史，與人參、鹿茸并稱為我國氣血滋補最好的三大補品[1]。從生物學角度說，我國古代中醫驗明，冬蟲夏草具有滋陰補腎，益氣養血、止血化瘀、化解疲憊勞咳的功效[2]。現代醫學研究證明，冬蟲夏草對治療腫瘤生長具有顯著抑制功效，同時還能延緩衰老，提高人體機能。特別是冬蟲夏草的提取物蟲草多糖，富含多類超氧化酶，是總酚和黃酮等活性成分俱佳的抗氧化劑，在增強人體免疫力方面具有明顯效果[3]。在2005 年，我國醫學專家已經驗證了當前冬蟲夏草多糖成分對人體免疫力提升、抗心律失常、抗輻射、提高身體機能方面具有極大功效，其多糖成分對現代醫學保健具有良好的醫學價值和經濟價值[4]。目前由于人為因素的影響，冬蟲夏草特殊的生產環境已經被過度挖掘和破壞，野生的冬蟲夏草更為稀有，已難以滿足當前醫藥市場的需要。隨著現代生物提取技術的不斷發展，已經可以大規模提取人工冬蟲夏草的提取物多糖成分，在醫療保健上的應用愈加廣泛，具有極大的開發前景[5]。近幾年來，有關醫藥學專家發現，蟲草多糖成分可以通過調節人體淋巴細胞，提高機體免疫功能，尤其對于緩解應急性疲勞具有良好的效果。運動員、警察、消防員等高體能消耗和運動機能組織損傷的主要人群，在比賽或者工作中，往往存在短時間內的爆發式能量消耗。根據其運動能量消耗曲線，利用冬蟲夏草多糖成分，可以對其進行能量補充，降低運動應急性損傷等負面影響。試驗以小鼠為試驗目標，重點研究冬蟲夏草多糖提取物對緩解應急性疲勞的影響，為當前運動型營養補充劑的制備提供一定參考[6]。

1 材料方法

1.1 研究材料

人工分離冬蟲夏草真菌，由云南大學生物試驗室進行。首先在培養基上連續培養60 d，去除雜質后收集子實體烘干，利用中草藥粉碎機粉碎成碎末，再用蒸餾水提取核心營養成分。利用氯化鈣去除成分中的蛋白，再用酒精沉淀后烘干成淡黃色多糖分粉末，稱重后確定多糖含量為8%。利用苯酚硫酸法測定當前冬蟲夏草多糖提取物測定濃度為65%左右[7]。

4-二硝基氟苯（NDFB）該試劑由上海市試劑一廠提供，使用前需要用高密度天平稱取50 mg，將其溶解在5 mL 左右的丙酮麻油溶液中，溶液內丙酮和麻油的配比為1∶1.25 左右。722 可見光光度計，由上海市優科生產廠提供。

1.2 研究對象分組

利用單因子隨機法進行試驗，將60 只試驗小鼠進行原始培育，即僅喂食小鼠基礎營養飼料和飲用水，確保其身體機能發展大體相同[8]。基礎飼料營養成分如表1 所示。

表1 小鼠培養基礎飼料營養成分Tab.1 Nutrient composition of basal feed for mouse

1.3 研究方法

培育20 日后，對小鼠進行體能檢測，剔除20只體能發育較差小鼠。將余下的40 只打亂劃分到試驗組和對照組中。令試驗組和對照組小鼠在同樣的訓練泳池中，每日進行同樣時長的游泳訓練，體能訓練的時間為7 d。其中試驗組小鼠在每日訓練完畢后，使用上述配備的10 mg·kg-1體重的冬蟲夏草多糖成分，對照組小鼠則使用安慰劑，安慰劑的核心成分是葡萄糖，2 組小鼠需要在試驗研究人員嚴格劑量控制下使用各自補充試劑[9]。

因為研究所用的蟲草多糖整體應用了自然水提取方法獲取，可以有效減少因為溫度調節和熱效應原因導致的蟲草內多糖成分的結構變化，防止其生物活性降低，以及提取過程中出現損耗等問題，整體安全性更強。最重要的是，因為提取的蟲草多糖成分經過試驗室質檢部門的嚴格審查，多糖內部不含有多巴胺等興奮成分。

此次研究共對當前參與試驗的40 只小鼠進行2次抽血化驗，第1 次為試驗開始前凌晨，第2 次為試驗結束后次日凌晨， 2 次抽血均在小鼠空腹下進行。測定當前小鼠血液中免疫球蛋白相關性指標，以及補體C3 和C4。檢測儀器均為國家級配比分析儀，具體檢測方法為免疫比濁，根據當前血液的總補體活性機構，根據756 型分光儀進行溶血測定[10-11]。

最終的數據分析采用SPSS 22.5 對所有檢驗數據進行樣本處理機分析，其中P＜0.05。

2 試驗結果及分析

2.1 蟲草多糖對小鼠血液免疫球蛋白影響

冬蟲夏草多糖提取對小鼠血清免疫球蛋白影響測試結果見表2。

表2 冬蟲夏草多糖提取對小鼠血清免疫球蛋白影響測試結果Tab.2 Test results of the effects of Ophiocordyceps sinensis polysaccharides extraction on acute fatigue serum immunoglobulin

將上述試驗結果進行匯總，根據表2 數據可以看出，經過7 d 的試驗訓練，試驗組1 和試驗組2 的小鼠其血項中的IgG、 IgM、 以及IgA 均發生了明顯的變化。以小鼠原始的血項數據進行對比，可以看出試驗組1 進行體能訓練后的小鼠，其血清指標中，三者均出現明顯降低，（P＜0.05）。而試驗組2 的小鼠IgG 和IgA 則出現明顯的升高趨向。從試驗組2小鼠的血清指標檢測數據可以看出，試驗組2 小鼠服用冬蟲夏草多糖提取物后，可以改變因為高強度運動和疲勞導致的IgG、IgM 下降。大量的試驗也證明了蟲草多糖成分對緩解機體疲勞有額外幫助[12]。

2.2 冬蟲夏草多糖提取對小鼠補體系統影響試驗檢測

將2 組試驗用小鼠的數據與試驗前小鼠數據進行對比，可以獲取表3 數據。

表3 冬蟲夏草多糖提取對應急性疲勞影響下小鼠補體系統的影響Tab.3 Effects of Ophiocordyceps sinensis polysaccharide extraction on the complement system of mice under the influence of acute fatigue

由表3 可以看出經過周期體能訓練后，試驗組1的小鼠內血清C3 值和CH50 值明顯下降，而C4 值卻沒有出現明顯的降低。由此證明，應急性疲勞會對血清中的C3 和CH50 指標生物活性產生明顯的影響性，而對C4 則無明顯干擾。而試驗組2 小鼠的血清中，C3 值和C4 值不僅沒有出現降低的情況，反而明顯提高，CH50 值也有顯著上升。由此可見蟲草多糖提取物的確可以增強運動員血清補體系統的恢復程度。將試驗組1 和試驗組2 的血液檢測樣本進行對比，試驗組2 小鼠在經過周期訓練以后，與對照組比較，血清中的C3、C4、CH50 值均有明顯的提高，說明機體出現應急性疲勞以后，予以補充冬蟲夏草多糖成分不僅可以對應急性疲勞導致的C3、C4、CH50 活性降低現象產生抑制，還可以有效促進小鼠補體系統功能進行增強。從整體上來說，冬蟲夏草多糖提取物對應急性運動訓練導致的機體自身補體系統活性指標衰減的情況具有良好的抑制作用。

3 討論

3.1 蟲草多糖對小鼠血液免疫球蛋白的影響

應急性疲勞一般出現在短時間內劇烈的高強度應變性運動，對機體自身的疲勞度和爆發程度有著較為嚴格的要求。IgG、IgM 以及IgA 代表小鼠機體內血液中的3 種免疫球蛋白，即血液抗體，其與當前機體恢復性能的好壞具有密切關系。大量試驗證明了血清免疫球蛋白IgG、IgM 以及IgA 的變化可以直接主導機體的疲勞程度和恢復程度。冬蟲夏草多糖成分中的蛋白質維生素和核心微量元素可以有效補充血液氧原料，修復淋巴細胞，提高機體免疫力。

3.2 蟲草多糖對小鼠補體系統的影響

通過上述試驗分析可以看出，冬蟲夏草活性糖分提取物對機體補體系統的活性力具有積極的促進作用，對于出現應急性疲勞的小鼠喂食冬蟲夏草多糖成分，可以在一定程度上保持其身體機能，有效提高自身免疫力，降低小鼠運動應急性疲勞產生的影響，從而縮減疲勞恢復時間。根據上述試驗可以看出，對照組和試驗組小鼠均經過等質量的高強度體能運動，對照組小鼠的血清檢測樣本顯示了除C4指標沒有明顯減少外，其他活性指標均出現明顯降低，證明了運動應急性疲勞會直接抑制機體血清，以及C3 和CH50 的活性值，同時極有可能造成運動員機體修復損傷，減少機體細胞的修復力。試驗組小鼠因為補充了冬蟲夏草多糖成分，不僅有效避免了當前機體產生的活性降低現象，而且增強了小鼠機體補體系統的恢復能力。機體血清C3 和C4 值沒有降低，反而有所提高，不僅避免了機體在應急性疲勞是活性降低的情況，更可以增強運動員的補體系統，提高運動員訓練效果。

4 結論

蟲草多糖成分可以有效提高小鼠血液中C3、C4和CH50 的活性力，增強機體血清免疫球蛋白的影響性和機體免疫力，提高機體補體系統組成成分的含量，緩解小鼠運動應急性疲勞，促進機體水平能力的不斷提高。同時，蟲草多糖成分對當前機體的活性成分具有良好的補充作用，在實際應用中，能夠補充高能耗人員出現應急性疲勞現象時的體內活性。此外蟲草不含任何興奮劑成分，兼顧保肝功能，對人體具有諸多益處。