不同地區奶牛源抗生素耐藥及耐藥基因攜帶情況研究進展

張雪婧，蒲萬霞

(中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所 中國農業科學院新獸藥工程重點開放實驗室甘肅省新獸藥工程重點實驗室，甘肅 蘭州 730050)

2018年，全球原料奶產量約為8.27億t，較2017年增長2%，主要增產貢獻為亞洲[1]。養殖過程中，由于抗生素的大量使用，動物體內產生大量耐藥菌。隨著農業的發展，環境中的抗生素作為一類新型的污染物已成為國內外關注的焦點。大部分的抗生素不能在動物體內完全代謝，可通過動物的糞便或尿液排出體外，進入到環境中，從而影響環境中微生物群落結構[2-5]。已有研究發現，在土壤、水源、動物養殖環境介質中均檢測到耐藥基因[6-7]。本研究對全國大部分地區奶牛源抗生素耐藥情況及耐藥基因檢出情況進行綜述，旨在為了解奶牛源抗生素耐藥情況及臨床指導用藥提供參考。

1 奶牛場中常見病原菌耐藥情況

1.1 大腸埃希菌

奶牛乳房炎是奶牛養殖過程中發病率高的疾病之一。目前，抗生素治療奶牛乳房炎仍然是最常用及最有效的方法，由于抗生素不合理及大量濫用，導致奶牛乳房炎病原菌產生耐藥性，且耐藥菌株呈不斷增多趨勢，甚至出現超級耐藥菌株，給奶牛乳房炎的臨床治療帶來了很大的挑戰[8]。張咚咚等[9]對北京地區奶牛乳房炎細菌耐藥情況調查發現，患病奶牛乳樣中所分離的菌株對萬古霉素、氧氟沙星等高度敏感，對青霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟等高度耐藥。Sakwinska等[10]發現，奶牛乳房炎患病奶牛乳樣中分離菌株對青霉素高度耐藥。章慧等[11]研究發現，上海地區奶牛乳房炎患病乳樣中分離菌株對青霉素、氨芐西林耐藥率達到100%，且存在多重耐藥情況。吳明光[12]研究發現，山東地區分離的奶牛乳房炎源大腸埃希菌對氟苯尼考、頭孢曲松、頭孢他啶、恩諾沙星4種藥物高度敏感;對新霉素等7種藥物耐藥。高健鵬等[13]對新疆地區研究發現，奶牛乳房炎對青霉素、鏈霉素、四環素等抗生素耐受。大部分地區奶牛場均存在奶牛乳房炎的病例，由于抗生素的不規范使用導致細菌耐受及多重耐藥菌株的出現，對青霉素、頭孢類抗生素耐藥情況最為嚴重。

1.2 金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌是一種革蘭氏陽性菌，是引起奶牛乳房炎的重要致病菌之一，感染率達50%以上[14]。趙艷坤等[15]通過對金黃色葡萄球菌耐藥性及變遷情況研究發現，奶牛乳房炎對青霉素、氨芐西林抗生素耐藥情況嚴重。高攀[16]對新疆地區奶牛乳房炎病例研究發現，金黃色葡萄球菌對青霉素、氨芐西林耐藥嚴重。馮小慧等[17]發現，內蒙古地區金黃色葡萄球菌對青霉素、復方新諾明等高度耐藥。王洪海等[18]發現，金黃色葡萄球菌對環丙沙星、慶大霉素和頭孢他啶的敏感性高，無乳鏈球菌對頭孢他啶、克林霉素的敏感性較高，停乳鏈球菌對慶大霉素、克林霉素的敏感性較高，對青霉素耐藥。陜西某牛場中奶牛隱性乳房炎對鏈霉素、青霉素、阿莫西林、氨芐西林耐藥率高[19]。天津地區奶牛場中奶牛對大環內酯類、林可酰胺類藥物耐藥率普遍較高[20]。金黃色葡萄球菌作為奶牛養殖中常見的致病菌，抗生素的廣泛使用使其耐藥情況比較嚴重，尤其以青霉素、氨芐西林等耐藥嚴重，并且多重耐藥現象普遍存在于各地區。

1.3 鏈球菌

田曉英等[21]調查發現，華北地區四省奶牛場中鏈球菌分離株對苯唑西林和青霉素完全耐藥，對四環素類藥物耐藥性較高，對喹諾酮類和氨基糖苷類藥物耐藥性較低，華北地區鏈球菌總檢出率較低，但多重耐藥情況嚴重。向敏等[22]對湖北省奶牛場進行調查發現，鏈球菌對青霉素鈉、頭孢噻呋鈉抗性強，但對穿心蓮、魚腥草等中藥材比較敏感。杜琳等[23]對我國部分地區奶牛乳房炎致病菌進行研究發現，鏈球菌分離株數較少，分離出的革蘭氏陽性菌對氨曲南的耐藥率最高，革蘭氏陰性菌對氨芐西林的耐藥率最高。郭玉茹等[24]發現，遼寧某牛場中奶牛對頭孢氨芐、磺胺類藥物耐藥率達到100%，對苯唑西林、林可霉素耐藥率達到80%以上，并且多重耐藥現象嚴重。昆明地區奶牛場對青霉素嚴重耐藥，且出現7種藥物同時耐藥的情況[25]。鏈球菌存在于奶牛養殖環境中，但檢出株數較少，鏈球菌的耐藥率和多重耐藥現象也很嚴重，在臨床治療中，可嘗試選用中西結合或選用抗生素替代物，以降低抗生素的耐藥情況。

2 奶牛場中耐藥基因檢測

耐藥基因作為一種新型環境污染物，廣泛存在于環境中，借助質粒、整合子、轉座子等可移動遺傳元件在細菌之間進行水平基因轉移[26-27]。由于抗生素大部分會以原藥形式排出體外，養殖場中的動物糞便中存有大量的耐藥菌和耐藥基因，危害到畜禽及人類健康。北京地區畜禽養殖場周邊農田中蔬菜樣品檢測發現，磺胺類、四環素類抗生素耐藥基因檢出率達到100%，并檢測出禁用多年的氯霉素耐藥基因(cmlA)[28]。對廣西地區畜禽產品檢測發現，耐藥基因qnrA檢出率達到91.18%，blaTEM檢出率達100%，并且多重耐藥情況嚴重[29]。于長泳[30]對遼寧省奶羊場中磺胺類耐藥基因進行檢測發現，sul1基因檢出率最高，與藥敏試驗結果中病原菌對磺胺類藥物高度耐藥結果相符。河北省7個地區的420份乳房炎奶牛乳樣中，喹諾酮類(gyrA、qnrB)和大環內酯類(ermB)耐藥基因檢出率高[31]。寧夏地區畜產品中，磺胺類(sul1、sul2)和四環素類(tetE)耐藥基因的檢出率較高[32]。

3 小結

作為農業大國，畜產品的食品安全與人類健康息息相關。我國是世界上最大的抗生素生產國和使用國[33]，抗生素的不規范使用使得耐藥菌、耐藥基因大量產生。黃廷鵬[34]對甘肅省金昌地區奶牛抗生素的用藥進行調研發現，由于長期單一地使用抗生素治療牛病，導致奶牛個體出現不同程度的耐藥。動物在養殖過程中抗生素的用量大，抗生素通過糞便、尿液等排出進入環境中，對土壤、水源等均造成不同程度的污染。從銀川市規模奶牛養殖場糞便、污水和土壤中分離鑒定出429株細菌，條件致病菌占88.55%，主要以金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和托爾豪特鏈球菌為主[35]。奶牛養殖場中廢物的排放對人和動物的健康存在潛在風險，若不經處理直接排放或還田施用，將對養殖環境和自然環境造成威脅。對各地區奶牛源抗生素使用情況調查發現，雖然各地區養殖環境、飼養方法等存在地域差異，但實際生產中抗生素種類大體一致，青霉素類、頭孢類、四環素類等抗生素的耐藥情況嚴重。耐藥基因檢出率與抗生素的耐藥情況有關，但磺胺類、四環素類、β-內酰胺類耐藥基因檢出率高。在實際生產中，可選用中西藥結合或以中藥為主的治療方案，降低藥物的耐藥和多重耐藥現象。