硫化氫供體偶聯4-苯胺基喹唑啉衍生物EGFR 抑制劑的設計、合成及生物活性評價

癌癥近年來已成為嚴重威脅人類生命健康的主要殺手之一。據世界衛生組織(WHO)數據顯示：2018年新增癌癥患者1810萬例，死亡955.5萬例，分別是2012年的1.28倍和1.17倍。根據相關資料數據顯示：中國惡性腫瘤的新發病例和死亡病例分別占全球病例的23.7%和30.2%。表皮生長因子受體(EGFR)的高表達與異常表達將會引起正常細胞向癌細胞的轉變，因此EGFR已成為靶向抗癌藥物重要的作用靶點之一。目前，已上市的具有代表性的表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)有：第一代的以吉非替尼(Gefitinib)，第二代的阿法替尼(Afatinib)以及第三代的奧希替尼(Osimertinib， AZD9291)。 EGFR-TKI的問世無疑給癌癥患者帶來了康復的曙光，但是隨著服用時間的增長，每種EGFR-TKI藥物均會出現獲得性耐藥的問題。

近期，徐州醫科大學劉毅教授課題組與美國堪薩斯大學合作，該課題組在以往對4-苯胺基喹唑啉衍生物研究的基礎上，設計并合成了兩個系列含有硫化氫供體的4-苯胺基喹唑啉類衍生物9a～9h(喹唑啉母核的7-位含有H2S供體)和15a～15f(喹唑啉母核的6-位含有H2S供體)。在所合成的目標化合物中，化合物9h對TEL-EGFR-L858R-BaF3的抑制活性最好，與陽性對照藥AZD9291處于同一水平；特別是化合物9h對正常人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)的細胞毒性要遠小于AZD9291。

用激酶法測定化合物的抑制活性發現，化合物9h對BaF3、 TEL-EGFR-BaF3、 TEL-EGFR-C979S-BaF3、 TEL-EGFR-T790M-L858R-BaF3的GI50值分別為：>10 μM、 >10 μM、 0.0069 μM、 6.03 μM；值得一提的是，化合物9h對TEL-EGFR-L858R-BaF3抑制活性(GI50=0.008 μM)與陽性對照藥AZD9291((GI50<0.003 μM)為同一數量級。體外抗增殖實驗結果表明，化合物9h對A549(EGFR攜帶)和H3255(EGFR-L858R突變)兩種細胞系(GI50值分別為：>10 μM和0.7873 μM，同時對L858R突變的細胞系表現出良好的抑制活性。在研究化合物9h的細胞毒作用時發現，其對正常人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)的IC50值大于10 μM，而陽性對照藥AZD9291的IC50值為7.278 μM，這說明9h較AZD9291對人體更為安全。在細胞水平上發現9h依賴于劑量來抑制H3255 細胞中EGFR的磷酸化，其主要阻滯細胞增值的G0-G1期。該課題組使用自制的硫化氫探針(NIR-HS)對化合物硫化氫的釋放進行評價，化合物9h釋放H2S的數量及速度均優于其它化合物。因此，化合物9h作為拮抗EGFR-L858R陽性突變的潛在候選化合物具有進一步探索和研究的價值。

編委簡介：

蔡志強(1980-)，男，漢族，遼寧阜新人，博士，副教授，主要從事新藥研究與開發，參與國家自然科學基金面上項目1項，主持遼寧省自然科學基金項目1項，遼寧省教育廳科學研究項目2項，沈陽市科技局項目1項。曾獲第二屆“最美青年科技工作者”國家級候選人、“第八屆遼陽青年五四獎章”、“阜新杰出科技工作者”等榮譽稱號。