蔣汶潔 王威
【摘要】PCR技術即聚合酶鏈式反應,是一種在體外酶促合成特定基因或DNA片段的分子生物學技術,因其靈敏、快速、簡便、特異性強等優點,現已廣泛應用于多個領域。本文闡述了PCR技術的原理、發展歷程及其在口岸傳染病檢測、保護瀕危野生鳥類等不同領域中的應用。PCR 技術雖應用廣泛,但其發展和運用受到多種因素的影響,利用實驗室的質量控制手段來保證檢測結果能從根本上減少誤差產生的概率,從而為PCR技術應用的準確檢出提供有力的保證。
【關鍵詞】PCR技術;傳染病檢測;食品檢測
一、PCR技術的原理
PCR技術即“聚合酶鏈式反應”,是一種在體外模擬發生在細胞內的DNA快速擴增特定基因或DNA序列的復制過程的技術,從而滿足對核酸的體外研究和應用。一般情況下,PCR由以下3個基本反應所組成:一、高溫變性即加熱待擴增的DNA樣品及反應體系,使雙鏈DNA變成單鏈模板DNA;二、低溫退火即降低反應溫度,使引物與兩條單鏈模板發生退火作用,并結合在靶DNA區段兩端的互補序列的位置上;三、適溫延伸即將反應體系的溫度上升到72℃保溫數分鐘,在DNA聚合酶的作用下,dNTPs分子便將引物的3'端加入并沿著模板DNA分子按5'到3'方向延伸,合成新的DNA互補鏈。如此反復加溫冷卻,短短數分鐘就可以把目標DNA進行多次擴增,只要有足夠的DNA聚合酶和足夠的4種脫氧核苷三磷酸,PCR反應的全過程就可以不斷的循環重復。
二、PCR技術的發展歷程
1953 年,沃森和克里克發表的DNA雙螺旋模型標志著分子生物學的誕生,這一成果也被譽為20世紀以來生物學方面最偉大的發現。……