AFP-L3、AFP、GP73、ALP聯合檢測對原發性肝癌的診斷價值研究

孫艷華 夏瑞雪 王寧 鮑越

目前，血清腫瘤標志物已成為諸多惡性腫瘤疾病早期診斷與鑒別的主要手段之一，現階段常用甲胎蛋白(AFP)作為原發性肝癌診斷的血清標志物，但因該標志物單獨檢測缺乏較高的敏感度與特異度，故還應與其他標志物聯合檢測[3]。堿性磷酸酶(ALP)是一種在膽汁淤積性疾病中大幅度升高的標志物，相關研究表明，ALP在原發性肝癌患者中的表達也明顯升高。血清高爾基蛋白73(Golgi protein 73，GP73)是一種新的腫瘤標志物，在健康人體中呈低表達，一旦肝臟受到損傷或發生炎癥時將有一定程度升高，故其在原發性肝癌中也有表達[3-4]。本研究回顧分析我院近兩年確診的50例原發性肝癌患者臨床資料，觀察其血清甲胎蛋白異質體(AFP-L3)、AFP、GP73、ALP表達情況，旨在分析四者聯合檢測對原發性肝癌的診斷價值。

資料與方法

一、病例資料

采用分層整群抽樣回顧性分析的方法，抽取解放軍聯勤部隊第九八一醫院2017年10月至2018年10月確診的原發性肝癌患者50例作為肝癌組，抽取同期在本院確診并接受治療的50例肝硬化患者作為肝硬化組，同期在本院確診并接受治療的50例慢性乙型肝炎患者作為乙肝組，同期在我院接受常規體檢的健康人群50例作為健康對照組。肝癌組男34例，女16例；年齡45～75歲，平均(61.02±7.21)歲。肝硬化組男32例，女18例；年齡44～75歲，平均(60.56±7.38)歲。乙肝組男29例，女21例；年齡45～76歲，平均(60.87±7.52)歲。健康對照組男33例，女17例；年齡45～75歲，平均(61.01±7.19)歲。四組受檢者性別、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。

二、入選標準

納入標準：(1)入組者臨床資料均完整；(2)原發性肝癌患者均符合《原發性肝癌診療規范(2011年版)》[5]中原發性肝癌相關診斷標準；(3)慢性乙型肝炎、肝硬化患者均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015更新版)》[6]相關診斷標準。排除標準：(1)臨床資料不完整；(2)合并其他重要器官功能不全者；(3)合并血液系統疾病、免疫系統疾病、神經系統疾病者；(4)治療期間死亡者。

三、方法

全部受檢者均接受外周靜脈采血4 mL，采集后將血液樣本放置在促凝管內，靜置2 h待其凝聚后經4 000 r/min離心15 min，將血清分離后放置在-80 ℃的冰箱內保存待檢。使用上?？道噬锟萍加邢薰咎峁┑脑噭┖?，采用酶聯免疫吸附法檢測受檢者GP73水平；使用美國貝克曼公司提供的DXC800型全自動生化分析儀，使用瑞士羅氏公司提供的Elecsys2010試劑盒，采用化學發光法檢測受檢者血清AFP表達；使用貝克曼DXC800全自動生化分析儀，應用微量離心柱法檢測受檢者血清AFP-L3水平，期間先將結合AFP部分洗凈，后離心，并分離AFP-L3，AFP-L3檢測相關材料由北京熱景生物技術有限公司提供；使用相同的全自動生化分析儀及其配備試劑盒檢測患者血清ALP表達。其中AFP>20 ng/mL為陽性，ALP>110 U/L為陽性，GP73≥150 μg/L為陽性。聯合檢測陽性診斷期間，各血清標志物只要有一項為陽性即可判定陽性。

四、統計學方法

結 果

一、血清AFP-L3、AFP、GP73、ALP表達

4組中，健康對照組血清AFP-L3、AFP、GP73、ALP表達最低，其次為乙肝組、肝硬化組，肝癌組各血清標志物表達最高，組間比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

二、陽性檢出情況

4組受檢者中，肝癌組血清AFP-L3、AFP、GP73、ALP陽性檢出率及聯合陽性檢出率最高，其次為肝硬化組、肝炎組，健康對照組最低，均未檢出陽性，組間比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

三、診斷價值

相較于各血清標志物單獨檢測，聯合檢測用于原發性肝癌診斷的特異性綜合價值更高。見表3。

討 論

普通人群血清AFP表達一般不超過20 ng/mL，但若是在干細胞受到刺激或發生癌變的情況下，部分未分化肝細胞將恢復合成AFP的功能，導致血清中AFP含量增加，且隨著患者病情的加重，其表達也呈遞增趨勢[7.8]。本研究結果顯示，相較于其他良性肝病及健康對照組受檢者而言，原發性肝癌患者血清AFP表達更高，在兩組良性肝病組患者中，血清AFP表達雖有不同程度升高，但表達仍偏低，故認為單獨為原發性肝癌患者檢測其血清AFP表達情況并不能直接作為早期診斷鑒別依據，還應聯合其他標志物診斷[9]。

血清GP73是一種新的血清腫瘤標志物，當肝臟受到炎性刺激時將升高，故在肝癌患者血清中可見較高的GP73表達[10]。除血清GP73外，AFP-L3、ALP也是近年來備受關注的惡性腫瘤疾病血清腫瘤標志物。前者是AFP的異質體，可經肝癌細胞特異性合成并分泌，該標志物的表達在臨床上多用于判斷患者早期血管浸潤與轉移風險，其在血清中的表達可隨疾病惡化程度發生變化，即腫瘤惡化程度越嚴重，患者血清內AFP-L3表達越高，故在實際應用中多將其用于早期原發性肝癌病情判斷及良惡性鑒別中[11]。ALP在機體多個組織內均可檢測到，且以肝臟及骨骼中含量最高。ALP在肝細胞內可緊密結合肝細胞膜且不易釋放，若肝細胞發生普通的損傷性疾病則ALP表達并不會明顯升高，只有當肝細胞發生惡性病變并誘發膽汁淤積性疾病時，患者血清中的ALP表達才會大幅度升高，故推斷ALP也可作為原發性肝硬化早期診斷腫瘤標志物之一[12]。本研究結果顯示，4組受檢者中，健康對照組血清AFP-L3、ALP表達最低，其次為乙肝組、肝硬化組，肝癌組二者表達最高，提示AFP-L3與ALP在不同人群中表達不同，可作為原發性肝癌診斷血清標志物。但值得注意的是，ALP表達的變化可能還會受到其他因素的影響，故單獨檢測其水平用于診斷原發性肝癌特異度較低，故還應聯合其他標志物進行。本研究聯合檢測了50例原發性肝癌患者的血清AFP-L3、AFP、GP73、ALP水平，對比其陽性檢出率及診斷價值發現，聯合檢測陽性檢出率最高，且在診斷原發性肝癌特異度、敏感度等方面更具優勢，表明較單獨檢測，聯合檢測的實施更能確保原發性肝癌診斷的準確性。

表1 4組血清AFP-L3、AFP、GP73、ALP表達比較(±s)

表2 4組血清AFP-L3、AFP、GP73、ALP單獨檢測及聯合檢測陽性率比較[n(%)]

表3 各血清標志物單獨及聯合檢測用于原發性肝癌診斷價值分析(%)