慢性心力衰竭患者血清Lp-PLA2、sSema4D的表達及臨床意義

徐娟娟，沈正軍，倪斌，徐成勝

慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)是心肌病、冠心病、心瓣膜病等心血管疾病的嚴重和終末階段，由于CHF患者心肌受損，造成心肌結構和功能的變化，最后導致心室泵血或充盈功能低下[1]。隨著社會的發展和人們生活方式的改變，近年來CHF的發病率呈現出升高和年輕化趨勢[2]。心室重構是CHF發生、發展主要的病理基礎，近年來研究證實，心肌內炎性反應對于心室重構和慢性心力衰竭進程有促進作用[3]。脂蛋白相關磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)可通過激活炎性細胞因子參與到機體炎性反應過程中，是心血管特異性炎性標志物，也可作為心血管事件的獨立預測因子[4]。重組蛋白質類信號4D(semaphorin 4D，Sema4D)在血小板和T細胞表面高表達，患者機體炎性細胞、血小板等大量活化，Sema4D從細胞表面脫落入血為可溶性Sema4D(sSema4D)[5]。sSema4D可參與到細胞遷移、血栓形成、新血管生成、組織膠原纖維化形成等過程中，其水平可在一定程度上反映CHF患者的病情[6]。現觀察CHF患者血清Lp-PLA2、sSema4D水平變化，并分析其與心室重構的關系，以期為臨床CHF的診斷和治療提供參考，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年4月—2019年4月黃岡市中心醫院治療的CHF患者112例作為研究組，男61例，女51例，年齡46～78(62.72±5.84)歲；病程0.7～9.0(4.89±1.64)年；原發病：冠心病45例，心房顫動34例，擴張型心肌病33例；誘因：心肌缺血24例，心律失常21例，勞累及情緒激動31例，呼吸道感染26例，電解質紊亂10例；NYHA分級：Ⅱ級31例，Ⅲ級52例，Ⅳ級29例。另選取同期在醫院進行健康檢查的健康者60例作為健康對照組，男33例，女27例，年齡45～75(62.43±5.72)歲。2組性別、年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準通過，全部研究對象及家屬均知情同意并簽署同意書。

1.2 病例選擇標準 (1)納入標準：①患者均符合“中國心力衰竭診斷和治療指南2014”中關于CHF的診斷標準[7]；②NYHA心功能分級Ⅱ～Ⅳ級[8]；③年齡≥45歲。(2)排除標準：①合并惡性腫瘤者；②合并急性感染或自身免疫性疾病者；③有心臟病家族史；④縮窄性心肌炎、心包炎；⑤肥厚或限制性心肌病；⑥重度瓣膜狹窄或關閉不全；⑦嚴重肝、腎功能不全或需要機械通氣者。

1.3 檢測指標與方法

1.3.1 血清Lp-PLA2、sSema4D水平檢測：研究組于確診后次日(治療前)、健康對照組于體檢當日，清晨空腹抽取2組人員肘靜脈血5 ml，離心取上清液置于EP管，放置于-80℃冰箱中保存待測。采用酶聯免疫吸附法檢測血清Lp-PLA2、sSema4D水平，操作嚴格按照試劑盒(上海鑫樂生物科技有限公司)說明書進行。設立8個標準孔，按要求加入標本稀釋液與標準品混勻，建立標準曲線。待測樣品用樣品稀釋液稀釋5倍，然后加樣于酶標板孔底部，晃動混勻，封板膜封板后37℃條件下溫育30 min。充分洗滌后加入酶標試劑后相同條件下再次溫育。再次洗滌后加顯色劑混勻后避光顯色15 min。加終止液后依序測定各孔吸光度(OD)值，根據標準曲線和OD值計算樣品中的血清Lp-PLA2、sSema4D水平。

1.3.2 超聲心動圖檢測：2組均于血液采集當日行超聲心動圖檢查。采用Philips IE33型彩色多普勒超聲診斷儀(購自北京東方邁潤醫療器械有限公司)，探頭頻率4～5 Hz，取橫位四腔心切面，M型彩色多普勒于左心室腱索水平為標準測量區，分別檢測左心房內徑(left atrial diameter，LAD)、右心室內徑(right ventricular diameter，RVD)、左心舒張末期內徑(left ventricular end-diastolic diameter，LVEDD)、左心室射血分數(left ventricular ejection fraction，LVEF)及左心室短軸縮短率(left ventricular fractional shortening，LVFS)。

2 結 果

2.1 2組血清Lp-PLA2、sSema4D水平比較 研究組血清Lp-PLA2、sSema4D水平高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.01)，見表1。

表1 2組血清Lp-PLA2、sSema4D水平比較

2.2 2組超聲心動圖指標比較 研究組LAD、RVD、LVEDD大于健康對照組，而LVEF、LVFS小于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.01)，見表2。

2.3 不同NYHA心功能分級患者血清Lp-PLA2、sSema4D水平比較 隨著NYHA分級的升高，研究組患者血清Lp-PLA2、sSema4D水平明顯上升，差異均有統計學意義(P<0.01)，見表3。

2.4 不同NYHA心功能分級CHF患者超聲心動圖指標比較 隨著NYHA分級的升高，研究組患者LAD、RVD、LVEDD明顯增大，而LVEF、LVFS明顯下降，差異均有統計學意義(P<0.01)，見表4。

2.5 血清Lp-PLA2、sSema4D與超聲心動圖指標的相關性 Pearson相關分析顯示，研究組患者血清Lp-PLA2、sSema4D水平與LAD、RVD、LVEDD均呈正相關(P<0.01)，而與LVEF、LVFS呈負相關(P<0.01)，見表5。

表3 不同NYHA心功能分級患者血清Lp-PLA2、sSema4D水平比較

3 討 論

心室重構是CHF發生的重要病理生理機制，其主要表現包括心肌纖維化和心肌細胞代償性肥大[9]。心室重構的主要表現為呼吸困難、水腫等，臨床對其診斷主要依靠超聲心動圖，但診斷結果缺乏特異性。研究表明[10]，炎性反應貫穿于心室重構的過程中，心肌內炎性反應可通過促凋亡基因蛋白Bax激活凋亡相關通路，進一步促進CHF患者的心室重構進程。Lp-PLA2是一種血小板活化因子乙酰水解酶，由成熟的巨噬細胞和淋巴細胞合成[11]。作為一種新發現的心血管特異性炎性反應標志物，近年來有較多關于Lp-PLA2的研究。Yang等[12]觀察531例冠心病患者發現，血漿Lp-PLA2濃度與冠心病的發生密切相關。李智慧等[13]發現LP-PLA2與心力衰竭發生密切相關，且其水平隨著患者病情加重逐漸升高。Sema4D是一種Ⅰ型跨膜蛋白分子，Xiang等[14]研究發現sSema4D與房顫患者LAD相關，并認為其可能參與左心房重構。

表2 2組超聲心動圖指標比較

表4 不同NYHA心功能分級患者超聲心動圖指標比較

表5 研究組患者血清Lp-PLA2、sSema4D與超聲心動圖指標的相關性

本研究中，與健康對照組比較，CHF患者血清Lp-PLA2、sSema4D水平明顯較高，提示Lp-PLA2、sSema4D在CHF發生、發展中起到重要作用。Lp-PLA2主要通過炎性反應參與到CHF的病情進展中，Lp-PLA2在人體中主要以與脂蛋白顆粒結合的形式存在，一方面，Lp-PLA2可使氧化型低密度脂蛋白分解為氧化脂肪酸和溶血卵磷蛋白，進一步刺激細胞因子和黏附因子釋放，促使單核細胞在血管內膜下集聚并向巨噬細胞轉變，而這些巨噬細胞吞噬氧化型低密度脂蛋白后可轉變為泡沫細胞，參與到動脈粥樣硬化斑塊形成的過程中[15]；另一方面，在動脈粥樣硬化斑塊部位的Lp-PLA2通過水解氧化型低密度脂蛋白產生的氧化脂肪酸和溶血卵磷蛋白還將損傷血管內皮細胞，并促使內皮細胞合成和分泌血小板源性生長因子、細胞黏附因子、表皮生長因子等，從而加劇患者機體的炎性反應，進一步推動CHF病情進展，造成患者心功能惡化[16]。CHF患者機體炎性反應加劇的同時，血小板、炎性因子等大量活化，促使Sema4D從細胞表面脫落入血，從而導致血清Sema4D水平升高。匡龍等[17]的研究認為，sSema4D與血栓形成及動脈粥樣硬化性疾病密切相關，是不良心血管事件發生的危險因素，提示sSema4D水平的升高可能與CHF的發生發展有關。

本研究還發現患者血清Lp-PLA2、sSema4D水平隨著NYHA分級的升高而上升，提示Lp-PLA2、sSema4D的表達水平可以反映CHF患者的心功能變化情況。而超聲心動圖檢查結果也發現，隨著NYHA分級的升高，CHF患者LAD、RVD、LVEDD明顯增大，而LVEF、LVFS明顯下降，說明隨著CHF病情進展，患者的心室重構越明顯。賈二娟[18]對116例冠心病患者進行研究發現，隨著心功能惡化，患者Lp-PLA2水平明顯升高。唐俊燕等[19]選取86例擴張型心肌病患者進行研究，發現sSema4D與基質金屬蛋白酶-14(MMP-14)的表達呈正相關，認為血清sSema4D可能通過MMP-14參與到心室重構的過程中，其結果與本研究相符。Pearson相關分析結果也進一步證實，CHF患者血清Lp-PLA2、sSema4D表達水平與心室重構存在相關性。臨床研究表明[20-21]，部分心血管疾病患者治療后心功能可以得到一定的恢復，同時患者血清Lp-PLA2、sSema4D表達水平也有一定的降低，提示Lp-PLA2、sSema4D或可成為CHF治療的新靶點，但關于sSema4D對心室重構的影響機制仍然有待進一步的研究。

綜上所述，隨著CHF患者心功能的惡化血清Lp-PLA2、sSema4D水平升高，并與LAD、RVD、LVEDD、LVEF、LVFS有較強的相關性，其可能通過影響心室重構參與到CHF的發生、發展中。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明

徐娟娟：提出研究思路，實施研究過程，論文撰寫；沈正軍：設計研究方案，分析試驗數據，論文審核；倪斌：實施研究過程，資料搜集整理，論文修改；徐成勝：進行統計學分析