POCT法與化學發光法檢測肌鈣蛋白I的比較研究*

范雪松 賀建勛 宋 揚 桂 媛 趙 松 崔 穎 袁 慧*

臨床診斷中對胸痛患者檢測心肌肌鈣蛋白I(cardiac Troponin-I，cTnI)的濃度是快速診斷急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)的重要指標，也是降低胸痛患者病死率和改善預后的關鍵[1-3]。相對于傳統的cTnI化學發光檢驗方法，即時檢驗(point of care testing，POCT)法可在短時間內完成檢測，患者標本采集后可直接由醫生或者護士在床旁進行檢測并獲得結果，而不必送至實驗室，因而適于臨床急診快速診斷，對于患者搶救、控制病情發展以及減少該病的致殘率和致死率具有十分重要的意義[4-5]。為此，本研究對POCT法與化學發光免疫分析儀檢測法檢測cTnI的結果進行對比分析，探討POCT法與化學發光免疫分析儀檢測血清cTnI的相關性和一致性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2017年8月至2017年9月北京安貞醫院重癥監護病房及急診就診的152例胸痛疑似AMI患者，其中男性89例，年齡37～69歲，平均年齡(52.57±8.80)歲；女性63例，年齡49～73歲，平均年齡(63.49±6.50)歲。在152例疑似AMI患者中，冠狀動脈造影確診為AMI患者102例，其余為不穩定型心絞痛30例，原發性高血壓20例。采集所有患者空腹血清樣本，采用POCT方法與Beckman DXI800、CL-2000i和Abbott Achitech I2000型3種化學發光免疫分析儀對患者血清樣本進行cTnI的檢測。

1.2 儀器與試劑

采用POCT方法與3種化學發光免疫分析儀進行血清cTnI的檢測。POCT方法為8600膠體金免疫層析cTnI檢測系統(南京基蛋生物科技股份有限公司)；3種化學發光免疫分析儀分別為：Abbott Achitech I2000型化學發光免疫分析儀(美國雅培公司)；DxI 800型化學發光免疫分析儀(美國Beckman公司)；CL-2000i型化學發光免疫檢測系統(深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司)，選用行業公認的Abbott Achitech I2000檢測系統為參比檢測系統。儀器所用檢測試劑盒均為各儀器配套使用。VACUETTE?真空采血管(北京格瑞納健峰生物技術有限公司)。

1.3 檢測方法

受試者均在前一日空腹＞12 h，于次日清晨真空采血管采集肘靜脈血5 ml，室溫靜置30 min后以3000 r/min，低溫4 ℃離心10 min，分離血清標本。所有樣本均在采集當日檢測cTnI，所選標本均無溶血、脂血及黃疸。選取3種化學發光免疫分析儀中的Abbott Achitech I2000型檢測系統為參比檢測系統，依據其cTnI檢測結果進行對比。根據其檢測的cTnI結果，將152例受試者檢測cTnI的結果分為陰性組(cTnI≤0.028 ng/ml，83例)、低濃度組(cTnI＞0.028 ng/ml、≤0.3 ng/ml，16例)、中濃度組(cTnI＞0.3 ng/ml、≤10.00 ng/ml，40例)和高濃度組(cTnI＞10.00 ng/ml，13例)。

1.4 評價指標

(1)比較4組POCT方法與3種化學發光免疫分析儀檢測結果的相關性，相關系數(r)：將參比檢測系統測定結果為理論預期值，以參比系統測試濃度值為橫坐標，以待評系統測試的濃度值為縱坐標，剔除離群值后進行線性擬合的回歸分析和回歸方程線性檢驗，計算得出待評試劑與參比試劑的相關系數(r)。︱r︱＞0.75時判為相關性好，︱r︱＞0.80時兩者具有很強的相關性。

(2)比較POCT方法與3種化學發光免疫分析儀檢測cTnI的相關性和一致性，待評系統與參比系統一致性比較采用Kappa一致性Chi-Square檢驗，Kappa≥0.75時兩者的一致性較好，Kappa≥0.4、＜0.75時一致性一般，Kappa＜0.4時兩者一致性較差。

1.5 統計學方法

采用SPSS17.0統計軟件進行數據分析。對年齡進行正態性檢驗，符合正態分布以(±s)表示。系統間cTnI檢測結果比較采用pearson相關分析。系統間cTnI檢測結果一致性比較采用Kappa一致性Chi-Square檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組不同檢測系統與參比檢測系統cTnI結果相關性比較

POCT檢測系統在陰性組和低濃度組與參比化學發光免疫分析檢測系統相關性較差(P＞0.05)，在中濃度組(r=0.753，P＜0.05)和高濃度組(r=0.861，P＜0.05)與參比化學發光免疫分析檢測系統相關性較好?；瘜W發光免疫分析儀Beckman DXI800和CL-2000i與參比檢測系統cTnI檢測結果在除外陰性組的各濃度組均具有較好相關性(P＜0.05)，各檢測系統與參比檢測系統相關性比較結果見表1。

2.2 各檢測系統與參比檢測系統cTnI結果相關性分析

POCT檢測系統與參比檢測系統cTnI檢測結果，具有較好的相關性，其線性回歸方程為Y=1.232X+1.122(r=0.862，P＜0.05)。Beckman DXI800和CL-2000i化學發光免疫分析儀與參比檢測系統的cTnI檢測結果均具有良好的相關性，其線性回歸方程分別為Y=0.688X+0.084(r=0.985，P＜0.05)和Y=0.736X-0.037(r=0.977，P＜0.05)。

表1 各組不同檢測系統與參比檢測系統cTnI檢測結果相關性比較

2.3 各檢測系統與參比檢測系統cTnI結果一致性評價

POCT檢測系統與參比檢測系統cTnI檢測結果一致性中陽性符合率較低，但具有較高的陰性符合率。化學發光免疫分析儀Beckman DXI800和CL-2000i與參比檢測系統檢測cTnI結果一致性較好，均具有較高的陽性符合率和陰性符合率，見表2。

表2 不同檢測系統與參比檢測系統cTnI結果一致性評價

3 討論

AMI是急診中常見的疾病，雖然即刻心電圖檢查可有明顯的改變，但疾病的確診需要心肌損傷標志物檢查。cTnI因其對心肌損傷診斷的敏感性和特導性強及持續時間長等優點，被認為是診斷AMI的“金標準”。但電化學發光法測定cTnI因標本需要送檢等原因使得結果獲得時間較久，成為制約快速診斷和治療的關鍵因素，POCT法具有快速簡便、效率高及檢驗周期短等優點得到了迅速的發展，但POCT的質量控制自其誕生以來，一直是限制其發展的重要因素[6-8]。本研究將臨床常用POCT系統和化學發光免疫分析儀法檢測cTnI的結果進行對比分析，以評價各個濃度范圍下POCT法和化學發光免疫分析儀法檢測cTnI的符合程度。

本研究以參比檢測系統測定結果為標準，其原因是：①參比檢測系統測定cTnI方法穩定，精密度高，有明確試劑溯源性；②參比檢測系統測定的結果參加衛生部的室間質評和北京市臨檢中心室間質評均取得了優異的成績；③參比檢測系統為全自動操作，減少了人為因素造成的誤差；④參比檢測系統比POCT法線性范圍更寬，靈敏度更高。

本研究分析結果顯示，POCT檢測系統與參比檢測系統檢測cTnI結果具有較好的相關性。進一步分析各cTnI濃度范圍下的相關性可見，在陰性組和低濃度組POCT系統與參比系統結果相關性較差；在中濃度組和高濃度組與參比化學發光免疫分析檢測系統相關性較好。檢測結果的一致性可見，POCT系統與參比檢測系統一致性一般。分析其原因：①POCT應用的試劑、模塊等體系使得POCT檢測系統與化學發光檢測系統相互之間存在誤差；②因POCT缺乏統一的外部質量控制和室間質評，使得其結果存在一定的檢驗誤差；③POCT受操作者影響較大，不同操作者之間操作不一致，也會導致誤差的發生。這些原因降低了POCT的準確性和檢驗結果的質量保證，也是美國成立各級POCT委員會，并通過制定相關法規規范POCT檢測系統的準入標準、設立POCT的標準對照和加強POCT實驗人員的培訓等完善POCT的質量控制的原因[9]。因此，POCT檢測cTnI結果質量與檢測儀器性能、操作人員規范化培訓程度以及質量管理體系完善程度密切相關，應加強全程質量管理，以提高檢測結果的一致性和準確性。

本研究結果表明，化學發光免疫分析儀Beckman DXI800和CL-2000i與參比檢測系統檢測cTnI結果具有很強的相關性，且在各cTnI濃度組均具有較好相關性；Beckman DXI800和CL-2000i與參比檢測系統檢測cTnI結果一致性較好，均具有較高的陽性符合率和陰性符合率。

4 結論

本研究中評價的POCT檢測系統雖能滿足臨床科室cTnI監測需求，但由于方法學限制，目前尚無法達到化學發光免疫分析儀水平，尤其是低濃度水平較易產生較大偏差。因此，低濃度水平cTnI的檢測結果應使用化學發光免疫分析儀復檢，并且有必要定期進行POCT與化學發光免疫分析儀比對檢測。