培養皿暴露時間對醫院空氣中細菌計數的影響

摘要：醫院是人流量大，且空氣細菌數量多，種類復雜的公共場合。其空氣細菌含量的檢測對預防疾病和細菌感染具有重要意義。本實驗用自然沉降法采集醫院空氣細菌，通過對培養皿暴露時間長短的不同進行細菌計數。結果表明，空氣中的細菌并沒有隨培養皿暴露的時間越長而增多，這為自然沉降法測定細菌數和醫院的清潔消毒工作提供了參考依據。

關鍵詞：自然沉降法;空氣細菌;培養皿暴露時間

醫院感染問題是世界范圍內矚目的難題，如果醫院性感染大暴發，不僅會導致大量醫療資源的浪費，以及加重患者的經濟負擔，而且嚴重的甚至會引起社會恐慌，因此，要加強對醫源性感染的認識和理解，特別是提高醫護工作人員的思想意識[1]。

目前針對醫院感染的控制，關鍵是在于控制感染源、自身預防和切斷傳播途徑。空氣傳播途徑包括飛沫、飛沫核和塵埃傳播方式，是細菌傳播的主要途徑之一。其傳播范圍廣，傳播速度快，途徑易實現且發病率高，對患者和兒童、老人等免疫力低下的人群感染性極高。因此檢測空氣中細菌含量是公共區域空氣質量和衛生的參數之一。此外，對于醫院病區的清潔消毒的質量，特別是微生物檢測的結果缺少深入調研，基礎數據匱乏。因此，本實驗通過對醫院大廳的空氣細菌進行采樣、檢測和初步分析，為醫院感染預防提供了基礎數據，并為醫院的清潔消毒工作提供了參考。

1 實驗條件與方法

1.1 實驗材料

牛肉膏蛋白胨營養瓊脂、蒸餾水。

1.2 實驗儀器和設備

培養皿、錐形瓶、燒杯、量筒、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫培養箱、電子秤、酒精燈、牛皮紙、濾紙、紗布。

1.3 實驗設計及過程

1.3.1 消毒滅菌

對實驗需要使用的所有器具用蒸餾水洗凈并進行滅菌，采用高壓蒸汽滅菌法，103.4KPa，121.3℃，30min。

1.3.2 配制培養基

準備培養皿，取40個大小相同，規格為直徑9cm的培養皿。利用營養瓊脂制作培養基，培養基應顏色不深、無絮狀物、無沉淀、無分層以及無氣泡為佳[2]，然后進行高壓蒸汽滅菌，30分鐘，分裝后進行無菌檢查，24-48小時后取出觀察，若無細菌生長則為合格。

1.3.3 放置取樣

（1）采菌地點：某醫院的大廳（室內面積>30m2）。

（2）采樣方法：采取自然沉降法，由于室內面積>30m2，因此可以選取房間五點采取法，設房間四角及中央5點，4角采樣點距墻1m處，都距離地面0.5m，采樣時間分別為5min，10min，15min，每次采取分為五組。采樣結束后扣上皿蓋，用記號筆做好標記。

1.3.4 培養

將采集好的培養皿倒置并用紗布包裹，迅速送至培養箱進行細菌培養，培養時間為2448小時。在整個過程中都要做好樣品質量及采樣過程質量的控制，提高結果準確性及可行性[3]。

1.3.5 數據處理

對每個培養基上的細菌總數進行計數，并統計數據。然后用SPSS19對數據進行t檢驗，以P<0.05有統計學意義。

2 實驗結果

根據采樣結果可將實驗所得結果進行不同時間段以及采菌布點進行分析。根據統計數據，通過t檢驗可得結果：平皿暴露5min和10min的數據處理后，P=0.11，P>0.05，表明平皿暴露5分鐘和10分鐘對細菌數量變化影響不大;平皿暴露5min和15min的數據t檢驗得出結果P=0.06，P>0.05，表明平皿暴露5分鐘和15分鐘對細菌數量變化影響不大。由此可見，自然沉降法中，平皿暴露時間并不是越長越好，5分鐘、10分鐘和15分鐘測得的數據并無顯著差異。

各采樣點不同時間段細菌菌落數的比較表

5min10min15min中112034東南615758東北184745西北102147西南495858

3 結果分析與討論

通過數據對五個地點進行培養皿暴露時間的比較，得出同一方位的細菌總數含量并不隨時間的增長而增加，因此，人們不用擔心在醫院的時間越長，越易發生醫源性感染。通過對不同方位進行比較，發現東南和西南的細菌總數明顯多于西北和東北的細菌總數，由于做實驗時，西南角為繳費處，人流量大，東南角，靠近樓梯，空間較小，空間流通速度慢，加之人流量大，在綜合因素影響下，數據結果顯示，此兩處空氣細菌的計數總數較多;東北角靠近走廊，空氣流通速度快，人流量較少，西北角，人數少，偶爾有人，在綜合因素影響下，數據結果顯示，此兩處空氣細菌的計數總數較少。由此可見，空氣細菌總數還受人流量、空氣濕度，空氣流通速度以及空間大小等不確定因素的影響。

通過本次研究，檢測醫院空氣細菌的總數反映了培養皿的暴露時間與細菌總數無多大的關系，但很好的反映了細菌計數還受其他因素影響因素。同時，為對減少醫源性感染和為醫院的清潔消毒工作提供了參考，以便醫院采取相應的措施，來改善空氣質量，避免醫源性感染。

參考文獻：

[1]魏世剛，汪亞麗，張姚.檢驗科醫源性感染的危險因素分析與預防控制[J].中華醫院感染學雜志，2015，25（2）：472474.

[2]解偉嘉.微生物檢驗中不同領域培養基質量控制及管理[J].中國醫藥指南，2019，17（14）：297298.

[3]謝紹霞.微生物檢驗質量控制方法分析[J].智慧健康，2018，15（8）：1516.

課題來源：山東協和學院大學生實驗室開放項目“醫院空氣細菌總數計數的影響因素研究”，課題編號：2019SYKF14

作者簡介：羅金鳳（2000），女，四川南充人，山東協和學院2018級醫學檢驗技術專業本科生。

*通訊作者：遲雙會（1982），女，黑龍江樺川人，碩士研究生，副教授，山東協和學院教師，研究方向為基礎醫學、教育學。