美國白蛾核型多角體病毒防治美國白蛾林間藥效試驗

張文穎 閔水發 黃芳

摘 要： 應用不同濃度的美國白蛾核型多角體病毒感染美國白蛾3～4齡幼蟲，試驗結果表明：施藥后3 d試蟲開始死亡，10 d死亡率達到50%，13～14 d后，試蟲死亡率達到高峰期，15 d后，除3×106 PIB·mL-1處理濃度外，其他各處理試蟲校正死亡率均高于90.28%，防治效果顯著。綜合防效和成本，生產中建議使用核型多角體病毒防治美國白蛾時選擇5×106 PIB·mL-1及以上濃度。

關鍵詞： 美國白蛾;核型多角體病毒;藥效試驗

中圖分類號：S763.305 ? 文獻標識碼： ? 文章編號：1004-3020（2020）06-0023-04

Abstract： The efficacy test of Hyphantria cunea Nuclear Polyhedrosis virus（HcNPV） against the larvae of Hyphantria cunea in the 3rd or 4th instars was made.The result showed that a small amount of death Hyphantria cunea was found after 3 days，the worm mortality attained 50% after 10 days，after 14 days appeared death peak，especially 3×106 PIB·mL-1，cumulative mortality rate of the other treatments over 90.28% after 15 days，control efficiency was remarkable.In production practice，comprehensive control effect and cost，it is suggested that the concentration of 5×106 PIB·mL-1 and above should be selected when using Hyphantria cunea Nuclear Polyhedrosis Virus to control Hyphantria cunea.

Key words： Hyphantria cunea;HcNPV;efficacy test

美國白蛾Hyphantria cunea屬于鱗翅目Lepidoptera燈蛾科Arctiidae白蛾屬Hyphantria，原產于北美洲，廣泛分布在北緯19～55°的廣大地區。中國1979年首次在遼寧丹東市發現美國白蛾，目前已在河北、山東、安徽、上海、天津、北京、內蒙古、遼寧、吉林、河南、江蘇等地嚴重發生，造成了重大的經濟損失和生態損失，是目前國內外最具有危險性的入侵物種之一。湖北省2016年發現美國白蛾入侵，出現7個疫區，2017年擴散蔓延至11個疫區，2018年為10個疫區。

近年來，國內美國白蛾發生區主要使用大量化學農藥防治，導致害蟲的抗藥性逐年增強，環境安全受到嚴重挑戰[1]。湖北省是美國白蛾新發生區，為了防止化學農藥帶來的環境污染等系列問題，利用生物防治害蟲就成為一個研究重點。核型多角體病毒HcNPV是一種調控美國白蛾種群密度的理想生物制劑[2]，對美國白蛾的防治具有高效、低毒、無污染、持續控害的效果。美國白蛾在幼蟲期具有群集取食和吐絲結網習性，利用此習性，用核型多角體病毒制劑噴灑幼蟲網幕，造成幼蟲染毒，隨著染毒蟲體的爬行使區域內幼蟲間病毒病流行，進而殺死幼蟲。為了探索核型多角病毒在湖北省美國白蛾發生區的林間防效，在該省大悟縣開展了林間防治試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗地概況

試驗設在湖北省孝感市大悟縣國有娘娘頂林場，位于大悟縣北部鄂豫兩省三縣交界之處，最高海拔812 m，針闊混交次生林，主要樹種有懸鈴木、楓楊、楊樹、桑樹、構樹、梨樹、馬尾松、杉木等，森林覆蓋率90%以上，郁閉度0.85。試驗前調查美國白蛾主要為害楓楊、桑樹、懸鈴木等闊葉樹，有蟲株率55%～70%，蟲口密度500～2 000頭·株-1，以3～4齡幼蟲為主，屬于中度危害。本試驗選擇美國白蛾發生嚴重地國有娘娘頂林場河灘地作為試驗點，試驗樹種為楓楊林，樹齡3～4 a，樹高3～5 m，冠幅1～1.5 m。

1.2 試驗材料

供試藥劑為美國白蛾核型多角體病毒，由中國林業科學研究院森林生態環境與保護研究所提供，原液濃度為8×109 PIB·mL-1。試蟲為林間采集的第二代美國白蛾3～4齡幼蟲。

1.3 試驗設計和方法

試驗設5個藥劑處理、1個清水對照。藥劑處理濃度分別為3×106 PIB·mL-1、5×106 PIB·mL-1、3×107 PIB·mL-1、5×107 PIB·mL-1、1×108 PIB·mL-1，每個處理3次重復，噴等量清水為對照（CK）。于2018年7月下旬，第二代美國白蛾發生期間，采用噴霧法，用上述5種病毒處理濃度懸液噴灑新鮮的楓楊Pterocarya stenoptera枝葉，以全部葉片均勻著藥并開始下滴為準，待葉片晾干后用細密紗網罩住，再將每網接入40頭美國白蛾幼蟲。藥后蟲口調查自施藥后1 d起每隔1 d進行1次，調查至藥后第9 d，以后每天進行1次，調查至第15 d，共調查11次。用常規數理統計方法結合SPSS 統計軟件進行數據處理，計算蟲口減退率、校正死亡率，求出病毒濃度與校正死亡率關系方程。

蟲口減退率（%）=

防治前蟲口密度-防治后蟲口密度防治前蟲口密度×100

校正死亡率（%）=

處理組蟲口減退率-對照組蟲口減退率1-對照組蟲口減退率×100

2 結果與分析

2.1 噴施病毒后不同時間幼蟲感病癥狀及死亡情況

噴施病毒后的第1，3，5，7，9，10，11，12，13，14，15 d分別對各處理紗網內的幼蟲感病及死亡情況進行調查。由表1看出，噴施病毒后3 d開始，出現試蟲死亡現象，10 d后，除3×106處理濃度外，其他各處理試蟲累積死亡率均達到50%以上，13～14 d后，試蟲死亡逐漸達到高峰期，各處理試蟲累積死亡率均高于89.89%，其中處理1×108 PIB·mL-1的累積死亡率達到100%，且各處理的試蟲累積死亡率均顯著高于對照（見表1），15 d后各處理試蟲累積死亡率均高于91.01%，且呈現隨處理天數延長而遞增的態勢。從試蟲的感病癥狀來看，噴施病毒后幼蟲食欲減退明顯，生理代謝紊亂，體毛顯長（見圖1），后期蟲體反應呆滯，行動遲緩，部分體節腫大伸長，體色逐漸變黑褐色，體壁變薄，一觸即破（見圖2），有淺褐色膿液流出（見圖3），幼蟲死亡時以腹足抓緊寄主樹枝葉等呈倒掛狀，下垂死亡，蟲體逐漸腐爛，即將斷開（見圖4）。

2.2 噴施病毒后不同濃度HcNPV的防治效果

從噴施HcNPV的防治效果看，噴灑濃度為106 PIB·mL-1的兩處理其試蟲校正死亡率自第9 d起顯著高于對照，噴灑濃度為107 PIB·mL-1的兩處理其試蟲校正死亡率自第5 d起顯著高于對照（見表2）。不同施藥處理間，106 PIB·mL-1的兩處理其試蟲校正死亡率在同一調查時間無顯著差異，施藥濃度為5×107 PIB·mL-1處理自第9 d起防治效果均顯著高于3×106 PIB·mL-1、5×106 PIB·mL-1、3×107 PIB·mL-1三個濃度的，而當施藥濃度增大為1×108 PIB·mL-1時，第9、11、12、13 d的防治效果顯著高于其他四個濃度的，說明隨著HcNPV濃度的增大，試蟲的感病時間縮短，防治效果增加。使用SPSS軟件計算感染濃度與試蟲校正死亡率獲得的回歸方程見表3，由表2和表3均可看出，試蟲校正死亡率與感染濃度呈正相關，從表3還可以看出，除1×108 PIB·mL-1外，隨著感染濃度的增加，試蟲校正死亡率與處理濃度之間的R2增大，因此，在生產實踐中，結合防效和成本，建議使用核型多角體病毒防治美國白蛾時選擇5×106 PIB·mL-1及以上濃度。

2.3 不同齡期幼蟲對HcNPV的敏感性及致死率調查 ?于2018年5月下旬，第一代美國白蛾發生期間，用1.8×107 PIB·mL-1的HcNPV分別感染美國白蛾3齡、4齡幼蟲，統計結果表明，在感染病毒后的前7 d，4齡幼蟲的死亡率高于3齡幼蟲的，這可能與4齡幼蟲已破除網幕且其爬行能力強、取食量較大，3齡幼蟲則是在網幕中取食，網幕具有一定的保護作用，在一定程度上影響了藥劑的滲入有關。自第9 d起，3齡幼蟲的死亡率則高于4齡幼蟲的，呈現出死亡率與蟲齡負相關態勢，幼蟲死亡率隨著蟲齡的增大而減小。15 d的校正死亡率各齡期均高于95.33%（見表4）。

3 結論與討論

美國白蛾核型多角體病毒是一種調控美國白蛾種群密度的理想生物制劑，具有較強的專一性，本次林間藥效試驗結果表明，在噴灑HcNPV的濃度為5×106 PIB·mL-1以上時，15 d后各處理的防治效果均達到90.28%以上，說明應用HcNPV防治美國白蛾防效顯著。同時要指出的是，雖然HcNPV對美國白蛾的最終防效高，但見效緩慢，前9 d藥效較低。相關研究表明，利用Bt和HcNPV復配可使美國白蛾提前2～3 d發病[4]，LT50縮短0.5～2.1 d[5]，因此，在實際應用過程中，建議將Bt和HcNPV復配，充分發揮Bt的速效性和HcNPV的持效性，達到對害蟲的高效、持久防治。

HcNPV對不同齡期的美國白蛾幼蟲均具有致病效果，致病敏感性的大體趨勢為隨蟲齡的增加而降低，幼蟲的發病時間隨蟲齡的增加而增加。同一齡期幼蟲，死亡時間隨HcNPV濃度的增大而縮短。這與很多研究者的結論相同[1，2]。

HcNPV不僅對當代供試美國白蛾幼蟲防治效果顯著，還可將病毒有效的傳遞到子代[6，7]使美國白蛾種群長期處于“亞健康”狀態，當環境條件成熟時，病毒就可在種群內流行致使美國白蛾種群數量急劇下降[8]，有利于節約美國白蛾除治成本。化學防治帶來的抗藥性、環境污染等問題已經受到各國的廣泛關注，包括HcNPV在內的生物防治技術對人畜無害，且不造成環境污染問題，已成為有害生物防控的新型技術和趨勢。

參 考 文 獻

[1]吳戈宇，劉玉書，李銀，等.美國白蛾核型多角體病毒毒力的生物測定[J]華中昆蟲研究（第五卷），中國會議，2018-11-03.

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[3]鄭桂玲，周洪旭，耿以龍，等.美國白蛾核型多角體病毒青島分離株的生物活性測定[J]青島農業大學學報，2011，28（2）：107-109.

[4]李紅靜，王西南，武海衛，等.應用美國白蛾核型多角體病毒防治美國白蛾效果評價[J]山東林業科技，2013（2）：80-83.

[5]段彥麗，陶萬強，曲良建，等.HcNPV和Bt復配對美國白蛾的致病性[J]中國生物防治，2008，24（3）：223-238.

[6]王金梅，范克勝，王俊洲，等.利用核型多角體病毒防治美國白蛾的試驗[J]中國園藝文摘，2018（6）：51-52.

[7]肖放，張文學，王昶遠，等.病毒和細菌類生物制劑防治美國白蛾試驗[J]中國森林病蟲害，2005（24）3：34-36.

[8]段彥麗，曲良建，王玉珠，等.美國白蛾核型多角體病毒傳播途徑及對寄主的持續作用[J]林業科學，2009（45）6：83-86.

（責任編輯：唐 嵐）