化學發光法檢測梅毒特異性抗體進行梅毒篩查的評價

杜麗偉，陳相

（深圳市羅湖醫院集團醫學檢驗中心，深圳市羅湖區婦幼保健院檢驗科，廣東 深圳 518000）

梅毒是一種慢性傳染性疾病，會對人體健康造成嚴重危害，因此需要選擇高敏感度和特異度方法篩查梅毒。化學發光法是應用于梅毒特異度抗體的重要檢測方法，由于多數檢測儀器設備剛剛起步，因此采用甲苯胺紅不加熱試驗篩查螺旋體，應用化學發光法比較少[1]。此次研究主要是比較分析甲苯胺紅不加熱試驗和化學發光法檢測梅毒特異性抗體進行梅毒篩查的結果，現將此次研究報告作如下匯報。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年11月-2018年11月臨床需要進行的197份梅毒篩查試驗標本，標本來源于婦科、產科和皮膚科。

1.2 方法 化學發光免疫儀及配套試劑，洗板機、數顯混勻器、質控血清。分別應用甲苯胺紅不加熱試驗和化學發光法檢測，之后應用蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）確認試驗，檢測方法嚴格按照試劑生產說明書操作，并且設置陽性對照與陰性對照，化學發光法測定質控血清[2]。

1.3 統計學方法 采用SPSS 20.0處理和分析所有患者數據資料，采用χ2檢驗分析計數資料，并且使用百分比表示，采用t檢驗分析計量資料，并且使用均數±標準差（Mean±SD）表示，P＜0.05為差異顯著，有統計學意義。

2 結果

2.1 檢測陽性率 對本次所采集的梅毒標本，使用甲苯胺紅不加熱試驗和化學發光法檢測進行檢測，化學發光法檢出率明顯高于甲苯胺紅不加熱試驗法，差異具有統計學意義（P＜0.05），詳情見表1。

表1 血清標本梅毒檢測結果

2.2 TPPA確認比較 選擇其中一種檢測方法的陽性標本，之后通過蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗確認，將TPPA作為對照方法，對甲苯胺紅不加熱試驗法和化學發光法的陽性預測值、陰性預測值、特異度和敏感性進行計算，結果顯示，化學發光法的特異度和敏感性明顯優于甲苯胺紅不加熱試驗法，差異具有統計學意義（P＜0.05），詳情見表2。

表2 不同篩查方法的結果比較

3 討論

當前，臨床上所檢測篩查的梅毒標本比較多，為了控制梅毒蔓延，必須盡早診斷和治療，選擇具備特異性和敏感性的試驗方法。當前，實驗室在篩查梅毒時多采用血漿反應素環狀卡片、甲苯胺紅不加熱試驗法，并且以蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗驗證試驗[3]。甲苯胺紅不加熱試驗法能夠有效檢測血清反應素，在梅毒感染的不同時期，反應素的檢出率差異性比較大，且在感染梅毒后3周后才會出現，在接受抗病毒治療后悔逐漸消失，是晚期梅毒患者檢測結果陽性較低的主要原因。正是由于方法學原因，在類風濕性關節炎、水痘和風疹等疾病中產生抗類脂抗原抗體，若與牛心磷脂抗原結合，就會發生凝集反應，此時就會出現假陽性結果。按照蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗確認比較結果能夠看出，敏感性和特異性比較低，因此需要尋找具有較高敏感性和特異性的方法，以此篩查蒼白密螺旋體。部分學者采用化學發光法檢測篩查，結果認為，此種檢查方法的特異性比較高，且靈敏度也比較高，結果判斷比較一致，可以應用到大量梅毒標本篩查中[4]。

蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗是應用蒼白密螺旋體，作為抗原檢測抗體，具備較高的明顯和特異性。但是由于需要手工進行操作稀釋，會干擾和影響試驗結果。所以此種方法不能應用到大批量篩查，也不能保留原始數據，也相應限制了應用范圍。此次研究所采用的檢測方法，主要是應用化學發光法聯合酶聯免疫，并且通過酶催化發光底物，對發光底物進行檢測所產生的光信號，替代免疫分析的顯色物。所以，特異性與酶聯免疫分析比較相似，且能夠明顯提升敏感性。需要注意的是，通過給予肝硬化、糖尿病和長期服用免疫抑制劑的患者蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗，試驗檢測結果可能會出現假陽性結果。若患者采用化學發光法檢測結果為陽性，蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗結果為陰性，聯合其他檢查診斷該患者并非梅毒螺旋體感染患者，提示應用化學發光法進行梅毒篩查時，檢測結果可能會出現假陽性。通過分析實驗室原始數據后發現，出現假陽性檢測結果的標本發光值比較低，且S/CO值位于臨界值附近，針對檢測處于灰色區域內的標本，則需要使用其他試驗方法進行復測。非梅毒螺旋體抗原血清試驗若出現結果，則需要進行滴度試驗，對患者梅毒活動情況和治療情況進行判斷，還能夠評估患者預后。對于隱形期、一期和三期梅毒患者來說，甲苯胺紅不加熱試驗滴度比較低，但是針對二期梅毒患者來說，甲苯胺紅不加熱試驗滴度較高，能夠達到1:64比例范圍內。在本次研究中，使用蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗確認試驗，且此種檢測方法的敏感性和敏感性明顯高于甲苯胺紅不加熱試驗法。在本次研究中，有1例患者的甲苯胺紅不加熱試驗法和化學發光法檢測結果同時為陰性，通過與臨床聯系，明確該患者不是梅毒患者，是因為敏感性比較高，或者是因為其他原因所致，因此在未來研究中還需要進行探討分析。通過此次研究結果能夠看出，對本次所采集的梅毒標本，使用甲苯胺紅不加熱試驗和化學發光法檢測進行檢測，化學發光法檢出率明顯高于甲苯胺紅不加熱試驗法（P＜0.05）；通過蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗確認，化學發光法的特異度和敏感性明顯優于甲苯胺紅不加熱試驗法（P＜0.05）。從上述分析結果能夠看出，采用化學發光法檢測梅毒特異性抗體的應用價值比較高。

綜上所述，通過化學發光法檢測梅毒特異性抗體實施梅毒篩查，給予陽性標本滴度檢測，兩者不滿足則應用蒼白密螺旋體明膠顆粒凝集試驗，能夠明顯降低假陰性，提升敏感率，明顯優于傳統梅毒篩查模式。