IL35、HMGB1及CD5L對兒童哮喘病情及預后評估

[摘要] 目的 探討白細胞介素35（IL35）、高遷移率蛋白1（HMGB1）和CD5抗原樣蛋白（CD5L）對兒童哮喘病情及預后的評估價值。方法 選取我院2016年5月—2018年4月收治的90例哮喘病兒作為觀察對象，依據病情嚴重程度分為輕度組（n=29）、中度組（n=30）和重度組（n=31），另取30例同期健康體檢者作為對照組，均行血清IL35、HMGB1和CD5L水平檢測。比較觀察組（輕度組、中度組、重度組）與對照組各血清指標水平，以及其與哮喘病情和預后相關性。結果 觀察組IL35、CD5L水平低于對照組，血清HMGB1水平高于對照組（t=3.524～23.700，P<0.05）。各組間血清IL35、HMGB1和CD5L水平比較，差異有顯著性（F=8.416～200.766，P<0.05）;且重度組、中度組及輕度組血清IL35、CD5L水平低于對照組，血清HMGB1水平高于對照組（P<0.05）;重度組及中度組血清IL35、CD5L水平低于輕度組，血清HMGB1水平高于輕度組（P<0.05）;重度組血清IL35、CD5L水平低于中度組，血清HMGB1水平高于中度組（P<0.05）。血清IL35、CD5L水平與哮喘病情呈負相關（r=-0.719、-0.706，P<0.05）;血清HMGB1水平與哮喘病情呈正相關（r=0.699，P<0.05）。經Logistic回歸分析，血清HMGB1、CD5L及IL35均為病兒預后影響因素（OR=0.546～1.867，95%CI=0.371～2.841，P<0.05）。結論 相比于健康小兒，哮喘病兒血清HMGB1水平較高、血清IL35與CD5L水平較低，經對癥治療后其水平有相應改變，可用來評估病兒病情及預后。

[關鍵詞] 哮喘;兒童;白細胞介素-35;HMGB1蛋白質;CD5抗原

[中圖分類號] R562.25 "[文獻標志碼] A "[文章編號] 2096-5532（2020）02-0233-04

doi：10.11712/jms.2096-5532.2020.56.039 [開放科學（資源服務）標識碼（OSID）]

[網絡出版] http：//kns.cnki.net/kcms/detail/37.1517.R.20200320.1506.002.html;2020-03-23 11：59：13

[ABSTRACT] Objective To investigate the value of interleukin-35 （IL-35）， high-mobility group box 1 （HMGB1）， and CD5 antigen-like protein （CD5L） in evaluating the condition and prognosis of children with asthma. "Methods A total of 90 children with asthma who were admitted to our hospital from May 2016 to April 2018 were enrolled as subjects， and according to di-sease severity， they were divided into mild group with 29 children， moderate group with 30 children， and severe group with 31 children. A total of 30 children who underwent physical examination were enrolled as control group. Serum levels of IL-35， HMGB1， and CD5L were measured for both groups. Serum indices were compared between the observation group （the mild group， the mo-derate group， and the severe group） and the control group， and their correlation with the condition and prognosis of asthma was analyzed. "Results Compared with the control group， the observation group had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher level of HMGB1 （t=3.524-23.700，Plt;0.05）. There were significant differences in the serum levels of IL-35， HMGB1， and CD5L between groups （F=8.416-200.766，Plt;0.05）， and compared with the control group， the severe， mode-rate， and mild groups had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher level of HMGB1 （Plt;0.05）; compared with the mild group， the severe and moderate groups had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher level of HMGB1 （Plt;0.05）; the severe group had significantly lower levels of IL-35 and CD5L and a significantly higher le-vel of HMGB1 than the moderate group （Plt;0.05）. The serum levels of IL-35 and CD5L were negatively correlated with the condition of asthma （r=-0.719，-0.706;Plt;0.05）， and the serum level of HMGB1 was positively correlated with the condition of asthma （r=0.699，Plt;0.05）. The logistic regression analysis showed that serum HMGB1， CD5L， and IL-35 were influencing factors for the prognosis of children with asthma （OR=0.546-1.867，95%CI：0.371-2.841，Plt;0.05）. "Conclusion Compared with healthy children， children with asthma have a higher serum level of HMGB1 and lower serum levels of IL35 and CD5L， which tend to change after symptomatic treatment and can thus be used to assess the condition and prognosis of children with asthma.

[KEY WORDS] asthma; child; interleukin-35; HMGB1 protein; CD5 antigen

哮喘為小兒常見多發慢性呼吸系統疾患，相關報道顯示全球范圍內哮喘病人高達3億人之多，預測至2025年將升至4億人，且每年約有25萬人因哮喘而死亡，約有1 500萬人因哮喘致傷殘[1-5]。生物學標志物CD5抗原樣蛋白（CD5L）是一種反映機體所處生物學進程的、可供客觀評價及測定的血清標志物，有學者指出其水平與哮喘等呼吸道疾病病人的病情嚴重程度呈負相關，為評估病情進展的有效指標[6-7]。此外，有學者指出哮喘發作時白細胞介素35（IL35）、高遷移率蛋白1（HMGB1）等細胞因子調節失衡，亦在一定程度上促進了病情進展[8-11]。基于此本研究選取我院90例哮喘病兒及30例健康小兒，首次探討了血清HMGB1、CD5L及IL35水平變化對兒童哮喘病情及預后的評估價值。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取我院2016年5月—2018年4月收治的90例哮喘病兒作為觀察對象（觀察組），依據朱碧君等[12]報道的病情嚴重程度分為3個亞組。輕度組29例，男17例，女12例;年齡2～12歲，平均年齡（6.50±2.10）歲;病程6～24個月，平均病程為（17.20±5.40）個月。中度組30例，男18例，女12例;年齡3～12歲，平均年齡為（6.90±2.05）歲;病程5～24個月，平均病程（18.02±5.60）個月。重度組31例，男19例，女12例;年齡2～12歲，平均年齡為（7.01±2.40）歲;病程6～25個月，平均病程為（17.12±5.10）個月。另取30例同期健康體檢者作為對照組，男17例，女13例;年齡3～12歲，平均年齡（6.49±2.17）歲。各組基線資料比較，差異無統計學意義（P>0.05）。本研究經醫院倫理委員會審查批準。

納入標準：①觀察組均符合《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》中哮喘診斷標準[13];②所有受檢者年齡范圍均為2～12歲;③病兒或家屬知曉本研究并自愿簽署知情同意書。排除標準：①近期出現呼吸道感染者;②合并其他呼吸系統疾患;③心、腎、肝等重要臟器衰竭者;④先天畸形病兒;⑤病例之間存在血緣關系者;⑥近期使用免疫調節劑或糖皮質激素治療者;⑦復發哮喘病兒;⑧伴有嚴重精神疾患或其他因素所致難以配合完成本研究者。

1.2 研究方法

1.2.1 檢測指標及方法 所有受檢者均采集4 mL空腹靜脈血，以3 000 r/min離心15 min（離心半徑為5.5 cm），分離血清置于-80 ℃冰箱中保存待檢。采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法分別測定各組血清IL35、HMGB1及CD5L水平，檢測試劑盒均購自日本東京Shino-Test公司，所有操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.2.2 治療方法 對病兒病情進行評估后，采用吸入性糖皮質激素、白三烯受體拮抗劑或二者聯合治療。治療3個月評估病兒病情控制情況，若未控制進行強化升級治療（高劑量吸入性糖皮質激素、白三烯受體拮抗劑），若部分控制則進行升級治療（中等劑量吸入性糖皮質激素、白三烯受體拮抗劑），若控制良好則降級治療直至最低維持劑量。治療3個月后對其進行預后評估。

1.3 統計學分析

采用SPSS 19.0統計軟件對數據進行分析。計量資料以±s表示，觀察組與對照組比較使用t檢驗;多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗;以Spearman相關分析法進行相關性分析;采用Logistic回歸分析預后的影響因素。以P<0.05為差異有顯著性。

2 結 "果

2.1 觀察組與對照組血清指標比較

觀察組IL35、CD5L水平均明顯低于對照組，血清HMGB1水平則明顯高于對照組，差異均有顯著性（t=3.524～23.700，P<0.05）。見表1。

2.2 不同病情組血清指標的比較

各組間血清IL35、HMGB1、CD5L水平比較，差異有顯著性（F=8.416～200.766，P<0.001）。其中重度組、中度組及輕度組血清IL35、CD5L水平均較對照組低，而血清HMGB1水平較對照組高（P<0.05）;重度組及中度組病兒血清IL35、CD5L水平均較輕度組低，血清HMGB1水平較輕度組高（t=10.876～41.529，P<0.05）;重度組血清IL35、CD5L水平均較中度組低，而血清HMGB1水平較中度組高（t=7.867～40.291，P<0.05）。見表2。

2.3 血清指標與病情嚴重程度相關性

經Spearman相關分析表明，血清IL35、CD5L水平與哮喘病情呈負相關（r=-0.719、-0.706，P<0.05）;血清HMGB1水平與哮喘病情呈正相關（r=0.699，P<0.05）。

2.4 不同預后病兒血清指標水平比較

參照《哮喘病藥物治療學》的療效標準[14]，本文90例哮喘病兒治療2周后，治療結果分為預后優良（n=80）及預后一般（n=10）。與預后一般病兒比較，預后優良病兒血清CD5L及IL35水平較高，血清HMGB1水平較低（t=2.004～3.752，P<0.05）。經Logistic回歸分析顯示，血清HMGB1、CD5L及IL35的水平均為哮喘病兒預后的影響因素（OR=0.546～1.867，95%CI=0.371～2.841，P<0.05）。見表3、4。

3 討 "論

哮喘反復發作不僅影響小兒正常的生長發育，且影響其日常生活及學習，加重病兒家庭及社會經濟負擔。有報道顯示，哮喘占全球疾病負擔的1%，需對其病情做出準確評估，并進行針對性治療[14-18]。

生物靶標是具有某種特征、能夠反映機體生物學狀態，可用于輔助疾病鑒別診斷、進行病情監測及療效評估的一類指標[2，19]。CD5L是適用于哮喘病變的生物靶標之一，可在脂肪細胞內吞作用下與胞漿脂肪酸合成酶結合，調控脂質合成，能夠維持組織穩態，抵御細胞外病原體入侵，參與哮喘的發生、發展過程[20-21]。本研究結果顯示，觀察組及其不同病情亞組（重度組、中度組、輕度組）病兒血清CD5L水平低于對照組，重度組及中度組水平低于輕度組;血清IL35、CD5L水平與病情呈負相關;血清HMGB1水平與病情呈正相關，且重度組低于中度組、預后優良病兒高于預后一般病兒。說明血清CD5L水平與哮喘病兒病情嚴重程度及預后效果關系緊密，可以作為臨床評估病兒病情及預后的有效指標。梁然等[22]研究顯示，哮喘病兒血清IL35水平明顯較健康小兒低，指出其參與了哮喘的發生發展。IL35是由調節性T細胞分泌、由EBI3及P35兩個亞基構成的新型抗炎細胞因子，對細胞免疫穩態具有調控作用，當機體發生炎癥反應時，其免疫功能受損，致使調節性T細胞數量減少，進而降低血清IL35水平[23-24]。本研究結果也顯示，重度組、中度組及輕度組血清IL35水平均低于對照組，重度組及中度組水平低于輕度組，且重度組低于中度組，可見哮喘病兒血清IL35水平隨病情加重不斷降低，與病情進展關系密切。而經治療后預后優良病兒血清IL35水平高于預后一般病兒，這可能與經藥物或機械通氣等相關治療后，病兒機體炎癥反應減輕，機體免疫功能增強，調節性T細胞增加有關。這與楊振朋等[25]研究結果相符。近年來也有臨床研究指出，HMGB1在肺癌、慢性阻塞性肺疾病、肺炎等多種呼吸道疾病中過表達，其可能參與了呼吸系統疾病的病理生理過程[26-28]。戴貞照等[29]研究指出，HMGB1在支氣管哮喘小兒淋巴細胞及外周血血漿中呈高表達狀態，且隨病情加重逐漸升高。本文結果表明，哮喘病兒血清中HMGB1水平較健康小兒高，且隨病情加重不斷升高。經Logistic回歸分析，血清HMGB1、CD5L及IL35均為病兒預后影響因素，推測其不僅具有誘導小兒哮喘發作的作用，且參與了哮喘的病情進展過程。

綜上所述，哮喘病兒血清IL35、CD5L水平較健康小兒低，隨病情加重不斷降低，與病情呈負相關，對癥治療后會有所升高;血清HMGB1水平較健康小兒高，且隨病情進展不斷升高，與病情呈正相關，經治療其水平會有所下調。上述指標可作為兒童哮喘病情監測及預后評估的有效指標，可以在臨床上推廣應用。

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（本文編輯 于國藝）