杜鵑紅山茶研究進展

林劍波 張俊麗 劉和平

摘要?杜鵑紅山茶為山茶科山茶屬中一種珍稀瀕危植物，具有四季開花的優良性狀，僅在廣東省陽春市境內零星分布。從杜鵑紅山茶分類、分布與瀕危機制、生物學特性、繁殖技術、花粉活力、生理生化特性、細胞學與分子遺傳特性等方面進行總結分析，以期為杜鵑紅山茶在栽培技術、新品種培育及基礎研究等方面提供參考。

關鍵詞??杜鵑紅山茶，?生物學特性，?繁殖技術，?雜交育種，生理生化

中圖分類號?S685.14文獻標識碼?A

文章編號?0517-6611（2020）06-0012-04

Abstract?Camellia azalea Wei is a rare and endangered plant which belongs to Camellia. It has a good character of four seasons flowering， and only distributes sporadically in Yangchun，Guangdong Province.We introduced the classification of C.azalea from its resources situation，distribution and endangered mechanism，biological characteristics，breeding technology，pollen viability，physiology and biochemistry cˇharacteristics，cytology and molecular genetics and so on，in order to provide reference for hybrid breeding of C.azalea，cultivation of new varieties ?and fundamental research.

Key words?Camellia azalea Wei，Biological characteristics，Breeding technology，Cross breeding，Physiology and biochemistry

杜鵑紅山茶（Camellia azalea Wei），別名張氏紅山茶、假大頭茶、四季茶、杜鵑茶等。野生狀態杜鵑紅山茶數量不足800株，原生地分布范圍狹小，僅在廣東省陽春市境內鵝凰嶂省級自然保護區內白木河河岸兩側狹長的地帶發現有零星分布[1-5]。杜鵑紅山茶除花期長、花大色艷、抗逆性強之外，其四季開花的特性尤為珍貴，是非常珍貴的茶花種質資源，具有良好的市場前景和潛在的開發空間。筆者對杜鵑紅山茶的分類、分布與瀕危機制、生物學特性、繁殖技術、花粉活力、生理生化、細胞學與分子遺傳特性等方面進行總結分析，同時根據杜鵑紅山茶繁育中存在的問題提出今后的研究方向，以期為杜鵑紅山茶在新品種培育及基礎研究等方面提供參考。

1?杜鵑紅山茶分類、分布與瀕危機制研究

杜鵑紅山茶屬于山茶科山茶屬。由于山茶科分類系統復雜，不同學者對杜鵑紅山茶在山茶科的分類標準不一致。杜鵑紅山茶分類也存在一定分歧，有的植物分類學家將其歸在山茶亞屬（Subgen.Camellia） 紅山茶組[ Sect.Camellia（L.）Dyer]光果紅山茶亞組（Subsect.Lucidissima Chang）[2]，但有的分類學家將其歸入了山茶亞屬（Subgen.Camellia） 山茶組（Sect.Camellia）[3]。

有關研究表明，氣候類型、海拔梯度是影響杜鵑紅山茶群落分布格局的主導生態因子。野生杜鵑紅山茶原生地分布范圍狹小，不足 100 km2，主要分布在鵝凰嶂省級自然保護區海拔50～175 m的溪流兩岸 8～10 m 的向陽處，此處森林茂密、人跡稀少、生態環境較好，年平均溫度22.1 ℃，

海拔217～237 m[1， 6-7]。杜鵑紅山茶植物群落極其豐富，但結構比較簡單，可分為喬灌草3層，其中喬木和灌木數量最多，其次是草本和藤本。植物區系以泛熱帶成分為優勢，具有明顯的熱帶北緣性質[6， 8]。羅曉瑩[7]調查記錄了群落隸屬74科135屬的182種（包括變種）維管植物，其中殼斗科、大戟科、山茶科、禾本科、茜草科、蝶形花科、樟科、桑科、紫金牛科有5種以上植株。國家級保護植物有5種，即紫荊木、繡球茜、土沉香、粘木和百日青，陽春市特有植物2種，即狹葉楊桐、鈍葉折柄茶。

從杜鵑紅山茶自身來看，子房敗育率高和自然結實率低是其出現瀕危的2個主要原因。羅曉瑩[7]研究表明，杜鵑紅山茶種群具有呈長度分化的兩型花柱，其中L型的長花柱型占20%，S型的短花柱型占76%。因此，其自交不親和，自然條件下其子房敗育率達64%。主要依靠蟲媒傳粉，但蝶類和蜂類等昆蟲的訪花頻率較低，從而導致自然結實率低[9]。此外，野生杜鵑紅山茶由于近年來生境愈加惡劣和人為干擾，呈衰退趨勢，現僅存不足1 000株。應進一步加強建設杜鵑紅山茶天然種群保護區，進行就地保護，嚴禁無序采挖，促進杜鵑紅山茶種群的自然更新。此外，實施遷地保護，建立種質資源圃，開展播種育苗、扦插嫁接或組培快繁等人工繁育工作[10]。

2?杜鵑紅山茶生物學特性

杜鵑紅山茶為常綠灌木或小喬木，高1.0～2.5 m，最高約 5.0 m，冠幅0.5～1.0 m，株型緊湊，枝葉密，1 年可抽 3～4 次梢，嫩枝無毛略呈紅色，老枝光滑呈灰褐色。單葉，倒卵形、長倒卵形、倒心狀披針形，葉革質，全緣，少見葉尖有 2～5 對鋸齒，先端圓，有時微凹，基部楔形，互生或近輪生，常聚生于小枝頂端，葉柄長 0.6～1.2 cm，無毛，葉片上表皮深綠色有光澤，下表皮綠色微被白粉。

杜鵑紅山茶具有1～8個花芽，簇生于枝條頂端或單生于枝頂葉腋。不同學者對杜鵑紅山茶花芽分化時期劃分標準不一致。朱高浦等[11]將其劃分為5個時期，依次為花芽發育初期—花芽發育前期—花芽發育中期—花芽發育后期—花芽發育末期，李辛雷等[12]將其劃分為6個時期，依次為生理分化期—花原基分化期—萼片原基分化期—花瓣原基分化期—雄蕊原基分化期—雌蕊原基分化期，李建光[13]將其劃分為7 個時期，依次為花芽初現期—花芽膨大期—花蕾初現期—花蕾膨大期—初始露紅期—露紅膨大期—開花期。杜鵑紅山茶具有全年開花的優異性狀，且一年內有 2 次明顯的盛花期，即4 月底—6月中，8 月上—10月底，偶見3次盛花期株系。花朵直徑6～14 cm，花色艷麗，呈鮮紅色或粉色。花瓣覆瓦狀排列，雄蕊多數，外輪中部以下聯合成管狀，花藥黃色，藥室縱裂，子房卵形，無毛，2～3室，每室3胚珠。四季均可結實，蒴果，果呈卵形、圓球形、卵球形或紡錘形，果期約32個月，頂端圓形或錐形，成熟時果皮由青色變成褐黑色或棕色，果皮粉碎性裂開，每室種子 1～3 粒，種皮黑褐色[1-2， 14-16]。

3?杜鵑紅山茶繁殖技術研究

杜鵑紅山茶春夏兩季均可扦插。不同樹齡、不同部位的插穗扦插生根率區別較大。選用 0.5 ～2年生葉紅色且未木質化的嫩枝作插穗，平均生根率較低為 3%，2年生以上枝條作插穗時，平均生根率顯著提高至 43%，其中以枝條基部作插穗的生根率明顯高于其他部位。植物生長調節劑對扦插效果有顯著影響。研究表明，吲哚丁酸（IBA） 濃度與處理時間對插穗生根率有極顯著影響，而萘乙酸（NAA）處理對于插穗生根率的影響不顯著，其中以400 mg/L IBA+100 mg/L NAA 處理 4 h效果最好，生根率可達 80.56 %。基質方面，用黃心土作基質，扦插生根率較高為 79.3%，用復合基質（V泥炭土∶V黃土=1∶1 ），生根率為 70%，用單一的泥炭土作基質次之，生根率約 60%[17-20]。

在氣候條件相似的情況下，水分運輸能力、分生組織活躍程度是影響四季紅山茶嫁接成活率的2個關鍵因子。杜鵑紅山茶可在春秋兩季進行嫁接，接穗應選擇生長良好的帶頂芽枝條，采用常規嫁接方法，以10—11 月嫁接為宜。研究表明，芽苗砧和根砧嫁接成活率最高，可達84.55%。砧木的選擇以油茶為宜，浙江紅山茶、大頭茶次之。以油茶為砧木的腹接成活率為81.9%，高于側枝切接、鋸口接[21-25]。

用杜鵑紅山茶花蕾作外植體，4 ℃ 低溫處理 5 d后，在含1.0 mg/L 2，4-D+0.5 mg/L KT 或 ?0.5 mg/L 2，4-D+0.4 mg/L NAA 的MS 培養基上培養 30 d，愈傷誘導率達 35% 左右[26]。以杜鵑紅山茶嫩莖、葉柄或葉片為外植體，愈傷組織誘導的最佳培養基是含2.0 mg/L 2，4 -D 和0.5 mg/L 6-BA 的MS 培養基、繼代培養的最佳培養基是含1.0 mg/L 2，4-D 和3.0 mg/L 6-BA 和 1.5 mg/L IAA的MS 培養基，其中葉柄的愈傷誘導率及生長狀況最好[27]。用杜鵑紅山茶莖段為外植體，在含（0.8～1.0） mg/L BA+0.01 mg/L IBA+10 mg/L GA3的MS誘導培養基中，萌發率達 50%～70% ，在含（0.2～0.4） mg /L BA+（0.01～0.10） mg/L IBA+10 mg/L GA3的MS增殖培養基中，其成苗率達 58%，在含（1/2～1/8） MS+（6～8） mg/L ?IBA+2%蔗糖的MS生根培養基中，生根率達 60%～80%[28-29]。

苗圃建設應選擇避風向陽、排水良好、平整肥沃、微酸性的土壤，果實采收陰干后，挑選無蟲無損的完好種子，種臍側放播種，播種后加覆蓋物保水保溫。杜鵑紅山茶的種子平均萌發率僅為38%，種子向幼苗的轉化率低[7-8， 30]。研究表明，V椰糠∶V泥炭蘚∶V珍珠巖∶V粗河砂=10∶8∶1∶1、V腐熟木屑∶V泥炭蘚∶V椰糠∶V珍珠巖∶V粗河砂=10∶4∶4∶1∶1、V椰糠∶V珍珠巖∶V蛭石∶V粗河砂=10∶4∶4∶2這3種混合基質是杜鵑紅山茶較為理想的栽培基質。對杜鵑紅山茶的施肥試驗表明，培養基質的 pH、EC 等是杜鵑紅山茶生長的影響因素[31-32]。

4?杜鵑紅山茶花粉活力與雜交育種研究

4.1?杜鵑紅山茶為兼性異交型?雌蕊異型，花柱2～4裂，花柱與雄蕊等長或稍長，雄蕊形成不同的花藥位置，雖花粉活力較強期與柱頭最佳可授粉期重疊，但與花期重疊較少，因此以每年1—2月、11—12月授粉效果最好[33]。在含2.5%瓊脂+10%蔗糖或含15%蔗糖+0.02%硼酸的萌發培養基上，杜鵑紅山茶萌發率較高，且隨培養時間推移呈拋物線型，花粉萌發的最佳觀測時間為30 ℃下培養8 h。杜鵑紅山茶花粉在4 ℃和-20 ℃下均能保存，長期保存需采用-20 ℃ 冷凍保存或液氮保存[34-36]。當花芽長度為18～25 mm時，用秋水仙素處理，可以誘導產生杜鵑紅山茶2 n 花粉，但以花芽縱軸為22～23 mm時效果最佳。常采用棉球浸潤和注射法，即0.5% 秋水仙素+2%二甲基亞砜（DMSO） 棉球浸 2 d或5 d，1.0% 秋水仙素+2% DMSO 注射 2次或3 次，4個處理中2 n 花粉獲得率分別為 16.57%、7.88%、6.37%和 6.05%。觀察發現，較正常花粉，2 n 花粉的花粉管伸長緩慢，萌發時間長 1～2 h，且萌發率與體積成反比[37]。

4.2?雜交是獲得新品種的常用方法?杜鵑紅山茶與山茶科不同組間雜交親和性存在明顯差異，親和性由強到弱依次是紅山茶組、原始山茶組、瘤果茶組、糙果茶組、金花茶組、山茶屬其他組別。需進一步利用ISSR、SSR等方法對雜交后代的親緣關系進行鑒定真實后代，從杜鵑紅山茶雜交種中決選出多個優良單株，為新品種育種取得突破[14，33，38-39]。

5?杜鵑紅山茶生理生化研究

汪越等[40]研究表明，全光照、80%自然光照的高光照或20%自然光照的過低光照均不利于積累花青素，而50%自然光照下花青素含量最高，因此，認為光照強度對杜鵑紅山茶花色素的積累及花芽分化具有顯著影響。吳劉萍等[41]研究表明，杜鵑紅山茶能適應一定的干旱環境，但重度干旱使PSⅡ受到損害，植物葉片細胞膜產生嚴重損傷，從而導致電導率大幅度提高。劉玉玲[14]研究認為，不同類型杜鵑紅山茶在秋冬兩季凈光合速率、氣孔導度、蒸騰速率的日變化趨勢均呈拋物線型，蒸騰速率和氣孔導度之間有著密切的正相關性，胞間 CO2濃度值的日變化不大。李琳琳[15]的研究結果表明也同樣如此。

研究杜鵑紅山茶的嫁接苗、扦插苗及砧木苗葉片光合作用發現，電子傳遞速率光曲線均隨著光合有效輻射的增強逐漸升高，至最大值后相對平穩或稍有下降。3 種苗木除了非熒光淬滅效率從高到低表現為扦插苗、嫁接苗、砧木外，相對電子傳遞速率、最大光化學效率、最大凈光合速率、實際光化學效率、瞬時光能利用效率、光化學熒光淬滅、蒸騰速率、瞬時水分利用效率等從高到低都表現為砧木、嫁接苗、扦插苗，因此，就光合生理方面而言，砧木適應能力最強，而嫁接苗適應能力居中，扦插苗最弱，故常采用嫁接方式繁殖進行商品化苗木的生產[42-43]。

對杜鵑紅山茶色素及營養的研究結果表明，杜鵑紅山茶含有豐富的蛋白質、微量元素、必需氨基酸，且有害元素含量低，可進一步合理開發利用。在花芽分化6個時期中，隨著花芽形態的建成，可溶性糖含量先升后降到花芽分化后期有所回升，可溶性蛋白含量增長至花瓣原基分化期后有所下降，可溶性糖/可溶性蛋白質則呈先降后升趨勢。RNA、總核酸含量及 RNA/DNA含量的變化趨勢基本一致，均逐漸升高至花瓣原基分化期達到最高后降低，而 DNA 含量在整個過程中一直處于較低水平且變化不大[44-45]。但朱高浦等[11]研究表明，可溶性糖含量在整個花芽發育階段始終最高，可溶性蛋白含量在中期最高，在花芽發育末期，可溶性糖含量∶核酸含量∶可溶性蛋白含量=10∶2∶1。

6?杜鵑紅山茶細胞學研究

杜鵑紅山茶的葉片上表皮由 1 層（少見2 層）構成，下表皮由 2 層細胞構成復表皮，是典型的異面葉。葉肉組織中，柵欄組織由 1 層（少見2 層）圓柱狀的細胞組成，其厚度約為海綿組織的 1/3。海綿組織細胞常數個細胞連接組成網狀，以利于水分的動態流動和降溫。葉片結構導致杜鵑紅山茶具有耐日灼的特點，推測其屬陽生植物。杜鵑紅山茶解剖結構表明，其根皮層細胞栓質化，導管分子橫切面形狀多為不規則的3～6 角形或近圓形，管孔 2～4 列排列，縱切面形狀多為紡錘形或圓柱形，梯紋、網紋導管分子居多[15]。杜鵑紅山茶染色體核型為2n=2x=30=22 m（1SAT）+6sm+2st，屬于 Stebbins 2B 型，第 3、4、9、10 條染色體的長臂上具有次縊痕，第 15 條染色體的短臂上具有隨體，間期核為球形前染色體型，有絲分裂前期染色體為中間型[13，46]。羅曉瑩等[47]應用石臘切片法研究了杜鵑紅山茶的大小孢子發生及雌雄配子體的發育過程。

7?杜鵑紅山茶遺傳多樣性研究

杜鵑紅山茶遺傳多樣性豐富，葉片遺傳變異較大，14個葉片表型性狀的變異系數為 5.30%～47.00% 。葉片表型性狀間（如葉長/葉形指數、葉面積/葉片干重、葉柄長和葉柄長/葉長等）具有較高程度的相關性，因此為提高育種效率，在對葉片性狀進行改良時應考慮性狀間的相關性并加以充分利用[48]。對杜鵑紅山茶雜交F1代觀察發現，葉色、葉形更傾向于杜鵑紅山茶，葉緣性狀為數量性狀，隨著葉齡變化而變化，花徑受父本花影響較大，花色受一對紅色基因和一對非紅色基因控制，花期是受多基因的加性作用控制[33]。

研究結果表明，水壩會在一定程度上限制種子流的傳播，故野生狀態杜鵑紅山茶存在顯著的空間結構。但由于花粉的傳播，水壩對基因流的阻隔作用并不明顯，故杜鵑紅山茶具有較高的遺傳多樣性和頻繁的基因流，但類群分布與空間分布不相對應[49]。運用 ISSR分子標記技術對杜鵑紅山茶 60 個單株的遺傳多樣性進行研究，結果表明種群間僅有9.22% 的基因變異，而90.78%的變異存在于種群內個體間。因此限制杜鵑紅山茶現存種群發展的主要因素為小種群及人為活動干擾。此外，為避免近交衰退現象，對杜鵑紅山茶進行保護數目不能低于176[50]。杜鵑紅山茶無性系遺傳多樣性較高，UPGMA聚類分析得出，當遺傳距離為0.360時，39個供試材料可以分為兩大類，當遺傳距離為0.304時，可將第Ⅱ類群再分為6組[51]。

8?杜鵑紅山茶分子生物學研究

杜鵑紅山茶常采用硅膠脫水干燥與低溫保存，基因組 DNA則采用改進的 CTAB 和 SDS 區室法[52]。根據山茶同源序列設計特異性引物，從杜鵑紅山茶嫩葉組織中克隆出半胱氨酸蛋白酶抑制劑（cysteine proteinase inhibitor，CPI）基因，命名為 CaCPI。熒光定量分析表明，CaCPI 基因在植物根、莖、葉中均有表達，在葉中的表達量較高，葉中的表達量分別約為莖的 1.53 倍，根的 1.61 倍。過量表達 CaCPI 基因后，轉基因煙草中目的基因表達量提高了 55.84～174.83 倍，且轉基因植株抗蚜蟲能力高于野生型5.14 倍，接蟲5 d后蚜蟲存活率小于10%[53]。采用同樣方法，從杜鵑紅山茶嫩葉組織中克隆出抗壞血酸過氧化物酶（ascorbate ?peroxidase，APX）基因，命名為 CaAPX1。實時熒光定量分析發現，CaAPX1 在 4 種不同的山茶中均得到表達，表達量高低與測試物種的耐熱性有關，依次是較耐熱的微花連蕊茶（C.minutiflora）、中等耐熱的杜鵑紅山茶和“耐冬”山茶（C.japonica“Naidong”）、耐熱性較差的“恨天高”云南山茶（C.reticulata“Hentiangao”）。在杜鵑紅山茶 4 種組織中，CaAPX1表達量從多到少為葉片、花蕾、種胚、花芽。轉基因分析表明，過量表達CaAPX1 后，APX 酶活性提高了 2.58 ～ 3.81 倍，抗壞血酸（ascorbate，AsA）含量也提高了 2.67 ～ 3.56倍，轉基因煙草植株及其種子的耐熱能力也提高[54]。

9?展望

杜鵑紅山茶四季開花，被稱為“植物界的大熊貓”，具有巨大的科研價值和潛在的社會價值，得到了茶花育種界和園林界的重視與應用。但繁殖效率低、病害、大枝嫁接衰退等原因限制了杜鵑紅山茶的推廣，要進一步加強杜鵑紅山茶病害防治、大樹嫁接等栽培繁育技術研究，為杜鵑紅山茶在園林應用上提供技術支持。在自然栽培條件下，從普通杜鵑紅山茶中選育出具有雙瓣、粉色、復色、長瓣、寬瓣等自然變異的新品種[55-56]。也有通過嫁接、利用砧木的影響或者感染病毒等方法獲得新品種[57]。汪梅蓉[58]通過對廣東引進的杜鵑紅山茶進行馴化試驗，篩選了觀賞價值高、花期長、具有一定抗寒性，適應當地及周邊地區生長，特別是適合商品盆花生產的優良品種。科研人員通過雜交技術取得了新品種育種的突破。但目前主要是利用杜鵑紅山茶四季開花的優勢，而在杜鵑紅山茶花色、花型、葉形、株型、香味、抗性等方面的育種還沒有突破性進展，通過新品種培育與快速繁育關鍵技術研究，培育出花大、重瓣、有香味和抗性強的杜鵑紅山茶新品種（系）并推廣，前景十分誘人。更重要的是，科研人員要加強杜鵑紅山茶的基礎研究，探索四季開花成花機理，挖掘四季開花成花基因，為植物開花機理研究提供基礎數據與理論支持。

參考文獻

[1] 衛兆芬.中國山茶屬一新種[J].植物研究，1986，6（4）：141-143.

[2] 張宏達，任善湘.中國植物志：第49卷 第3分冊[M].北京：科學出版社，1998.

[3] 汪松，解焱.中國物種紅色名錄[M].北京：高等教育出版社，2004：362.

[4] 葉創興，李琳林，石祥剛，等.關于開發張氏紅山茶若干問題的思考[J].廣東園林，2009（2）：62-66.

[5] 楊維雄，周慶宏，王有兵，等.杜鵑紅山茶研究進展[J].林業調查規劃，2013，38（4）：45-49.

[6] 張燕.杜鵑紅山茶在原產地生長特性的調查報告[J].重慶林業科技，2007（1）：21-22.

[7] 羅曉瑩.杜鵑紅山茶保護生物學研究[D].廣州：華南農業大學，2006.

[8] 陳淑君.廣東陽春鵝凰嶂自然保護區主要珍稀瀕危植物保育策略的研究[D].廣州：華南農業大學，2005.

[9] 羅曉瑩，唐光大，莫羅堅，等.杜鵑紅山茶的傳粉生物學[J].生態學雜志， 2011，30（3）：552-557.

[10] 李辛雷，孫振元，李紀元.瀕危植物杜鵑紅山茶種群結構和動態變化[J].植物資源與環境學報，2018，27（2）：17-23

[11] 朱高浦，李紀元，李辛雷，等.珍稀瀕危植物張氏紅山茶花的花發育形態及生理特性研究[J].廣西植物，2011，31（4）：507-512.

[12] 李辛雷，孫振元，李紀元，等.杜鵑紅山茶花芽分化及其代謝產物的變化[J].林業科學，2012，48（8）：81-86.

[13] 李建光.杜鵑紅山茶 F1代單株評價優選研究[D].廣州：仲愷農業工程學院，2014.

[14] 劉玉玲.杜鵑紅山茶主要性狀遺傳變異研究[D].廣州：華南農業大學，2009.

[15] 李琳琳.張氏紅山茶生理生態及育種初步研究[D].廣州：中山大學，2010.

[16] 嚴丹峰.杜鵑紅山茶種間雜交及其F1代性狀遺傳分析[D].廣州：仲愷農業工程學院，2013.

[17] 張燕，梁坤參.杜鵑紅山茶扦插繁育試驗[J].廣東林業科技，2003，19 （3）：64-65.

[18] 王有兵，徐斌，張方秋，等.不同基質對杜鵑紅山茶扦插生根的影響[J].廣東林業技，2011，27（2）：54-58.

[19] 薛克娜，殷愛華，張學平，等.生長激素對杜鵑紅山茶扦插效果的影響[J].林業技術開發，2011，25（1）：109-111.

[20] 李先民，李春牛，卜朝陽.基質、促根劑及插穗對杜鵑紅山茶扦插生根的影響[J].西南農業學報，2017，30（2）：426-431.

[21] 曾武.‘杜鵑紅山茶高砧嫁接[J].中國花卉盆景，2002（10）：21.

[22] 黎運樞，崔統華，鄭文經，等.杜鵑紅山茶嫁接繁殖試驗[J].廣東林業科技，2004，20（3）：37-38.

[23] 吳曉靜，鄧石婷，譚楊帆.杜鵑紅山茶嫁接砧木選擇比較試驗[J].安徽農學通報，2008，14（14）：120-121.

[24] 倪穗，李紀元，趙春釗.四季山茶的芽苗砧嫁接研究[J].科技通訊，2008，24（1）：43-46.

[25] 李冬妹，伍成厚.四季紅山茶嫁接技術研究[J].廣東農業科學，2012（9）：27-29.

[26] 劉郭菊，張霞，王晶，等.杜鵑紅山茶花藥愈傷組織的誘導[J].西南師范大學學報，2011，36（3）：128-131.

[27] 石蘭蓉.杜鵑紅山茶愈傷組織誘導的初步研究[J].江西農業學報，2012，24（3）：33-35.

[28] 蔡靜如，莊雪影，楊躍生，等.杜鵑紅山茶離體快速繁殖[J].熱帶作物學報，2010，31（9）：1469-1473.

[29] 蔡靜如.杜鵑紅山茶的組織培養及解剖學研究[D].廣州：華南農業大學，2009.

[30] 劉就，陳考科，林喜珀，等.杜鵑紅山茶的栽培技術[J].中國熱帶農業，2007（1）：61-62.

[31] 薛克娜，趙鴻杰，張學平，陳香.不同基質對杜鵑紅山茶容器苗生長的影響[J].中南林業科技大學學報，2011，31（1）：27-31.

[32] 婁利華，陳桂芳，蔡孔瑜.杜鵑紅山茶施肥試驗初報[J].重慶林業科技，2007（2）：21-22.

[33] 嚴丹峰，李建光，許宇山，等.杜鵑紅山茶花粉活力與柱頭可授性研究[J].北方園藝，2013（2）：71-73.

[34] 李天菲，林田，徐碧玉，等.杜鵑紅山茶花粉萌發力及貯藏耐性的研究[J].生物技術通報，2008（Z1）：239-243.

[35] 趙鴻杰，喬龍巴圖，殷愛華，等.3 種山茶屬植物花粉活力測定方法的比較[J].中南林業科技大學學報，2010，30（3）：105-107.

[36] 劉玉玲，潘文，張方秋，等.杜鵑紅山茶花粉保存及其生活力測定[J].廣東林業科技，2010，26（2）：1-6.

[37] 王有兵，徐斌，張方秋，等.杜鵑紅山茶的 2n 花粉自然發生及其誘導初步研究[J].廣東林業科技，2011，27（6）：9-15.

[38] 黃萬堅，劉信凱，高繼銀.杜鵑紅山茶雜交育種初步研究[C]//中國第二屆茶花育種學術研討會論文集.大理：中國茶花協會，2008：58-64.

[39] 高繼銀，劉信凱，趙強民.四季茶花雜交新品種彩色圖集[M].杭州：浙江科學技術出版社，2016.

[40] 汪越，易慧琳，劉楠，等.光強和施肥對杜鵑紅山茶成花品質的影響[J].生態科學，2016，35（6）：41-45.

[41] 吳劉萍，許衍才，廖飛雄，等.杜鵑紅山茶葉片葉綠素熒光對干旱脅迫及復水處理的響應[J].廣東農業科學， 2017，44（10）：25-31.

[42] 趙鴻杰，薛克娜，張學平，等.不同肥力基質條件下張氏紅山茶扦插苗的生長和光合生理特性[J].東北林業大學學報，2011，39（9）：40-42.

[43] 劉紅曉，袁蓮蓮，劉楠，等.杜鵑紅山茶（Camellia changii Ye）的扦插苗、嫁接苗和砧木的光合作用特征[J].生態環境學報，2013， 22（6）：996-1000.

[44] 李辛雷，李紀元，范正琪，等.4種山茶花營養成分及有害元素含量分析[J].林業科學研究，2010，23（2）：298-301.

[45] 李辛雷，李紀元，范正琪.杜鵑紅山茶花色色素提取及其性質[J].林業科學，2011，47（1）：79-84.

[46] 王仲郎，王霜，梁靜，等.珍稀植物杜鵑紅山茶的核型及其育種學意義[C]∥中國首屆茶花育種學術研討會論文集.[出版地不詳]：[出版者不詳]，2007.

[47] 羅曉瑩，莫羅堅，莊雪影.杜鵑紅山茶大小孢子發生及雌雄配子體發育研究[J].華南農業大學學報，2010，31（4）：68-75.

[48] 徐斌，彭莉霞，楊會肖，等.杜鵑紅山茶葉片主要性狀的遺傳多樣性分析[J].植物研究，2015，35（5）：730-734.

[49] 徐穎.山茶屬植物個體內rDNA多態性及杜鵑紅山茶的空間遺傳結構[D].上海：復旦大學，2012.

[50] 羅曉瑩，莊雪影，楊躍生.杜鵑紅山茶遺傳多樣性的ISSR分析[J].熱帶亞熱帶植物學報，2007，15（2）：93-100.

[51] 徐斌，廖煥琴，楊會肖，等.杜鵑紅山茶優良無性系遺傳多樣性的ISSR分析[J].北方園藝，2017（7）：127-131.

[52] 徐斌，張方秋，潘文，等.鮮葉保存方法對杜鵑紅山茶基因組 DNA 提取的影響[J].廣東林業科技，2008，24（2）：5-9.

[53] 王江英，范正琪，殷恒福，等.杜鵑紅山茶CaCPI 基因的克隆及過量表達提高煙草植株的抗蟲性[J].華北農學報，2015，30（5）：57-64.

[54] 王江英，范正琪，殷恒福，等.杜鵑紅山茶 CaAPX 基因的克隆、表達及功能分析[J].林業科學研究，2016，29（4）：471-479.

[55] 游慕賢.杜鵑紅山茶的變異品種[J].中國花卉園藝，2006，16（1）：48-49.

[56] 林喜珀，陳永聚，鄧石婷.杜鵑紅山茶種質資源表型變異和保存技術研究[J].中國林業產業，2016（7）：146-147.

[57] 朱高浦，李紀元.珍稀瀕危植物張氏紅山茶研究進展（綜述）[J].亞熱帶植物科學，2009，38（3）：83-89.

[58] 汪梅蓉.四季茶花新品種引種及生產關鍵技術[D].杭州：浙江農林大學，2011.