蘇州某醫院皮膚性病門診患者4種常見性傳播疾病病原體感染狀況及原因分析*

吳敏娟，胥 萍，李 晉，陳 慧，朱曉燕，范婷婷，吳敏智

1.蘇州大學附屬傳染病醫院檢驗中心，江蘇蘇州 215137；2.南京艾迪康醫學檢驗中心，江蘇南京 211100；3.蘇州大學附屬傳染病醫院皮膚性病科，江蘇蘇州 215137

生殖器皰疹是由單純皰疹病毒(HSV)感染引起的泌尿生殖器及肛門部位以皰疹為主要皮損表現的一種性傳播疾病，少部分出現感染癥狀，表現為生殖器及其周圍皮膚黏膜水皰、結痂及潰瘍、紅斑、毛囊炎等，但大多數患者臨床癥狀不典型，容易被忽視。HSV有Ⅰ型及Ⅱ型兩種，生殖器皰疹主要為HSV-Ⅱ感染所致[1]。解脲脲原體(UU)、沙眼衣原體(CT)、淋病奈瑟菌(NG)也是性傳播疾病的主要病原體，這3種病原體與HSV-Ⅱ所致的泌尿生殖系統感染已成為我國各地區主要的性傳播疾病，其感染情況較為復雜，雖然病死率較低，但嚴重影響患者身心健康[2]。本研究通過對HSV-Ⅱ、UU、CT、NG的DNA進行檢測，旨在了解本地區患者性傳播疾病的感染情況，為臨床防控和診療提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇蘇州大學附屬傳染病醫院皮膚性病科門診收治的424例就診者為研究對象。疑似HSV-Ⅱ感染者298例，其中男230例、女68例，平均年齡(38.10±12.30)歲；疑似UU、CT、NG感染者126例，其中男47例、女79例，平均年齡(34.19±11.08)歲。疑似HSV-Ⅱ感染者納入標準：(1)有典型生殖器皰疹或高度可疑生殖器皰疹皮損，如局部皰疹或密集成群的小水皰等。(2)無典型生殖器皰疹皮損，但男性患者有尿痛、尿癢等不適感或有尿道口發紅、分泌物等癥狀；女性患者有陰道分泌物增多、宮頸糜爛等癥狀。(3)有非婚性接觸史或配偶有生殖器皰疹病史者。(4)疑似生殖器皰疹復發的患者。疑似UU、CT、NG感染者納入標準：男性患者有尿痛、尿道口溢液等泌尿道炎癥；女性患者宮頸有黏液膿性分泌物。本研究通過蘇州大學附屬傳染病醫院倫理委員會的審批，并與患者簽訂知情同意書。

1.2儀器與試劑 試劑盒購于艾康生物技術有限公司，儀器為美國ABI StepOnePlus實時熒光定量PCR擴增儀。

1.3方法

1.3.1標本采集 有典型或可疑生殖器皰疹癥狀者用無菌一次性吸管吸取皰疹內液或用無菌棉拭子蘸取皰疹內液或滲出液裝于無菌試管內；非典型或無生殖器皰疹癥狀患者或疑似UU、CT、NG感染者，男性用無菌細小棉拭子伸入尿道口內2～4 cm處，略捻拭子取出分泌物，裝于無菌試管內；女性先用棉拭子清除宮頸口表面的分泌物，再用另一滅菌棉拭子伸入宮頸，通過上皮交界處，直到看不到拭子頭，輕輕旋轉10～20 s后取出，裝于無菌試管內。以上標本均及時送檢。

1.3.2檢測方法 采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(QRT-PCR)法對標本進行檢測。標本試管中加入1 mL無菌生理鹽水充分震蕩混勻，吸取液體轉至1.5 mL離心管中。12 000 r/min離心5 min，棄上清液，沉淀中加入50 μL核酸提取液后充分混勻，2 000 r/min離心10 s，100 ℃金屬浴裂解10 min，12 000 r/min離心10 min，取上清液4 μL加入PCR反應管中，同時做陰陽性對照各一管，置入全自動PCR儀中進行擴增，分析數據。整個過程嚴格按操作說明書進行。

1.4統計學處理 采用SPSS18.0軟件進行數據處理分析。計數資料采用百分數表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1HSV-Ⅱ DNA的陽性檢出率 298例疑似HSV-Ⅱ感染者中，HSV-Ⅱ DNA檢出陽性131例，其中男98例，陽性檢出率為42.61%(98/230)；女33例，陽性檢出率為48.53%(33/68)；不同性別間陽性檢出率比較，差異無統計學意義(χ2=0.75，P>0.05)。

2.2不同年齡組間HSV-Ⅱ感染情況分析 將298例疑似HSV-Ⅱ感染患者分為<20歲組，20～<40歲組，40～<60歲組，≥60歲組。4組陽性檢出率分別為28.57%(2/7)、43.02%(77/179)、47.37%(45/95)、41.18%(7/17)，組間比較，差異無統計學意義(χ2=1.239，P>0.05)。

2.3UU、CT、NG DNA的陽性檢出率 126例疑似UU、CT、NG感染者分別進行DNA檢測，檢出UU陽性65例(51.59%)，CT陽性9例(7.14%)和NG陽性10例(7.94%)。不同性別的UU陽性檢出率比較，差異有統計學意義(P<0.05)；而不同性別的NG和CT陽性檢出率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 不同性別UU、CT、NG檢出情況比較[n(%)]

2.4不同年齡組間UU、CT、NG感染情況分析 結果顯示，<20歲組UU+CT+NG共檢出5例，陽性檢出率為71.43%(5/7)；20～<40歲組UU+CT+NG共檢出66例，陽性檢出率為75.00%(66/88)；40～<60歲組UU+CT+NG共檢出8例，陽性檢出率為32.00%(8/25)；≥60歲組UU+CT+NG共檢出5例，陽性檢出率為83.33%(5/6)；4組間比較，差異有統計學意義(χ2=17.09，P<0.001)。進一步兩兩比較，20～<40歲組陽性檢出率高于40～<60歲組，差異有統計學意義(χ2=15.93，P<0.001)；20～<40歲組陽性檢出率低于≥60歲組，差異有統計學意義(χ2=5.235，P<0.05)。

3 討 論

HSV是一類雙鏈DNA病毒，其基因組長約152 kb，共261個堿基對。HSV-Ⅱ主要經直接密切接觸和性接觸傳播引起腰以下部位感染，在全球多個國家高度流行，且在我國的流行情況也較為嚴重，每年新發病例預計為2 000萬，患病率也在逐年增加[3]。更為重要的是，由于HSV感染者的免疫功能受到破壞以及病變區域的潰瘍，增加了人類免疫缺陷病毒(HIV)的感染概率和危險性[4]。由于只有10%～20%的生殖器皰疹患者具有典型臨床表現，絕大多數表現為紅斑、糜爛、淺表小潰瘍或無癥狀，給臨床診斷帶來較大困難，因此實驗室檢測對于生殖器皰疹的診斷就顯得尤為重要，這對病程監控、指導治療、方案療效確定及預測疾病進程等方面具有重要的意義。

UU可黏附于泌尿生殖道表皮細胞的表層，會造成一定的細胞損傷，進而引發多種疾病，如改變男性精子濃度、活力、形態和精液酸堿度[5]，最終導致男性不育，而在女性中，UU與多種婦科炎癥如宮頸炎、盆腔炎、輸卵管炎等相關，且嚴重程度和感染的菌量密切相關[6]。另有報道顯示，UU可能攜帶有中性粒細胞趨化因子釋放所需的蛋白酶，UU感染能使母體羊水中糖蛋白和基質金屬蛋白酶-9活性增加，從而使胎膜提前破裂，這可能是UU感染致胎膜早破和早產的相關致病因素[7]。CT是一種嚴格真核細胞內寄生、具有獨特發育周期的微生物。CT感染生殖道的上皮細胞后，可以誘導組織損傷，患者未能得到及時的診斷和治療會導致持續的傳播并引起相關并發癥，如盆腔炎、異位妊娠、輸卵管不育及附睪炎[8]。FRIKH等[9]報道，男性不育者中，CT感染的患者所占比例較高，且與精子活力的改變相關。NG屬于人體寄生菌，人類為NG唯一宿主，NG感染導致的淋病如果未得到及時、有效的治療，也會導致女性發生子宮炎、輸卵管炎癥和男性發生睪丸、附睪炎等，從而繼發不孕不育或異位妊娠[10-11]。

本研究通過對疑似HSV-Ⅱ感染者的HSV-Ⅱ DNA檢測，發現298例疑似感染者HSV-Ⅱ DNA檢出陽性131例，陽性檢出率為43.96%，與海口地區[12](47.33%)和臺州地區[13](45.30%)相近，均有較高的感染率。在就診患者中，男230例，女68例，男性就診者的數量遠多于女性，這可能是因為男女生殖道結構不同，女性位于陰道內和宮頸的皰疹不易察覺，不適感也沒有男性明顯[14]。因此，臨床上女性如果有反復的陰道或宮頸炎癥者應考慮有HSV-Ⅱ感染的可能性而及時進行檢查。

本研究126例疑似UU、CT、NG感染者中，UU、CT、NG的陽性檢出率分別為51.59%、7.14%、7.94%，與河南永城地區[15](UU為55.25%，CT為7.52%，NG為5.45%)比較接近；與北京地區[16](UU為53.68%，CT為7.20%，NG為2.18%)相比，UU和CT陽性檢出率稍低，而NG感染率高于北京地區；與廣東佛山地區[17](UU為38.59%，CT為16.94%，NG為26.35%)和新疆石河子地區[18](UU為31.75%，CT為21.31%，NG為36.35%)相比，UU陽性檢出率高于佛山和石河子地區，而CT和NG感染率較低。由此可見，UU、CT、NG感染率地區差異較大，可能與不同地區人群分布、經濟水平、教育情況、醫療條件不同有一定關系。已有報道，UU可在性成熟女性生殖道中處于正常攜帶狀態[19]，與NG和CT相比，UU感染率最高[20]。UU代謝產生的尿素酶、IgA蛋白酶、磷脂酶A和C及多帶抗原蛋白可引起細胞膜的損傷和組織的破壞，其中尿素酶可分解尿素產生氨，引起pH值改變，不僅有利于一些細菌的定植，對細胞也有毒害作用，IgA蛋白酶能破壞泌尿生殖道黏膜，損害免疫系統[21]。

本研究結果顯示，20～<40歲組就診人數最多，可能是由于這個年齡段的人群處于性活躍期并對自身健康防護意識較強，反之≥60歲年齡組患者就診人數較少但陽性檢出率卻較高。由此可見，老年人的防病治病意識較弱，且隨著年齡的增長，免疫功能下降，病原體感染的風險增加。因此，加強老年人的防病意識，宣傳性傳播疾病的科普知識也具有一定必要性。

由于QRT-PCR法檢測病原體在檢出時間上優于培養法且對活菌無嚴格要求，因此本研究亦采用的是QRT-PCR法。但大部分標本未能同步進行培養而不能進一步了解這些病原體藥敏情況等相關信息，無法指導抗菌藥物的使用，值得引起今后重視和改進。

綜上所述，蘇州大學附屬傳染病醫院皮膚性病門診患者HSV-Ⅱ、UU、CT、NG陽性檢出率總體較高，應引起重視。性傳播疾病病原體的檢測不僅對臨床癥狀明顯的患者具有重要意義，同時，對臨床癥狀不明顯的患者和復發患者亦可做到早診斷、早治療，并為性傳播疾病的流行病學研究提供可靠依據。