市售烏梢蛇的微性狀鑒別研究

金捷凱，方成武,2，楊青山,2,3，陳夢軒，姚 強，丁振飛，洪穩穩，王 進

(1.安徽中醫藥大學藥學院，安徽 合肥 230012；2.安徽省中醫藥科學院 中藥資源保護與開發研究所，安徽 合肥 230012；3.安徽道地中藥材品質提升協同創新中心，安徽 合肥 230012；4.安徽亞泰天然植物科技有限公司，安徽 金寨 237344)

烏梢蛇又名黑梢蛇、烏蛇、劍脊蛇，為游蛇科動物烏梢蛇Zaocysdhumnades(Cantor)除內臟的干燥體[1]。烏梢蛇是臨床上常用動物類中藥之一，多于夏、秋二季捕捉，剖開蛇腹，剝去蛇皮留頭尾，除去內臟，盤成圓盤狀，干燥。其性平，味甘，具祛風活絡鎮痛、除濕攻毒之功，臨床用于風濕頑痹、麻木拘攣、口眼歪斜、中風、抽搐、痙攣、破傷風、麻風、疥癬、瘰疬、惡瘡等[2]?，F代研究[3-4]表明，烏梢蛇治療類風濕關節炎具有顯著療效。

市場上烏梢蛇正品主要來源于四川、湖北、湖南、江西、江蘇、安徽等地。因烏梢蛇資源有限，價格較高，而烏梢蛇偽品種類多樣且價格低廉，導致偽品充斥市場，對臨床療效產生極大影響。目前已有學者對烏梢蛇與其偽品進行研究，已報道過的偽品有王錦蛇、灰鼠蛇、滑鼠蛇、紅點錦蛇、赤鏈華游蛇、黑眉錦蛇等[5-9]，但缺乏系統資料。前期抽樣調查發現，市場上烏梢蛇混偽品大致為滑鼠蛇Ptyasmucosus(Linnaeus)、灰鼠蛇Ptyaskorros(Schlegel)、舟山眼鏡蛇NajanajaatraCantor、赤鏈華游蛇Sinonatrixannularis(Hallowell)和白鏈蛇Dinodonseptentrionalis(Gunthe)。筆者通過中藥微性狀鑒定法[10]研究市場上烏梢蛇正偽品的微性狀鑒別特征，為烏梢蛇藥材的鑒別提供參考。

1 材料

1.1 樣品 經研究鑒別收集到的樣品為烏梢蛇(湖南和四川)、滑鼠蛇(湖南)、灰鼠蛇(國產和進口)、眼鏡蛇、白鏈蛇、赤鏈華游蛇。市售烏梢蛇藥材及常見偽品樣品收集情況見表1。

1.2 儀器 Optec奧特光學SZ780 連續變倍體視顯微鏡：重慶奧特光學儀器有限公司；佳能70D相機：日本佳能有限公司；燒杯、浸泡箱、鑷子、接種針、剪刀、吸水紙、平板、重物。

表1 實驗藥材樣品信息

1.3 試劑 自來水。

2 方法

2.1 預實驗 本實驗需要將蛇皮從蛇體剝離，在體視顯微鏡下觀察研究。為達到實驗要求，先設計預實驗以探索浸泡時間與蛇皮剝離難易度大致關系。選取長度、大小相近的烏梢蛇飲片，隨機均分為甲、乙、丙、丁4組。按照上述分組，將烏梢蛇飲片置于燒杯中。在燒杯內加入足量自來水完全淹沒飲片，再用塑封袋包裹燒杯?？刂平輹r間：甲組浸泡16 h、乙組20 h、丙組24 h、丁組28 h。

2.2 微性狀鑒別實驗 在浸泡箱中注入適量水，將藥材樣品置于水中完全浸沒并浸泡24 h。取出藥材樣品去除頭部及尾部，至上而下將蛇皮從蛇肉上慢慢剝離。將所得蛇皮置于吸水紙上展平，剝離時需注意蛇皮完整。再于蛇皮上方覆蓋吸水紙，并在上方置一平板，壓上重物置于干燥環境。次日更換吸水紙繼續壓置。重復2～3周至蛇皮干燥。參照2015年版《中華人民共和國藥典》[11]“中藥其他方法通則”項下中藥的顯微鑒別方法及中藥微性狀鑒定法[10]進行實驗。將藥材樣品蛇皮置于體視顯微鏡下，觀察其頭部、體背部、腹部鱗片及去除鱗片各部位的微性狀特征，并拍照記錄。

3 結果

3.1 預實驗結果 4組飲片經鑒定均為正品烏梢蛇飲片。甲組烏梢蛇飲片剝蛇皮時，蛇皮緊緊連接蛇肉，難以剝離；乙組一部分蛇皮與蛇肉較易剝離，另一部分較難剝離，易剝爛，蛇皮剝離不整齊；丙組蛇皮與蛇肉較易剝離，蛇皮相對整齊；丁組蛇皮與蛇肉均酥軟，難以剝離，氣味嚴重。根據預實驗結果，確定最佳浸泡時間為24 h。4組飲片蛇皮見圖1。

3.2 微性狀鑒別實驗結果

3.2.1 湖南產烏梢蛇微性狀特征 湖南產烏梢蛇體前段中央縱線處單鱗蛇皮(將去除鱗片后，該枚鱗片下的蛇皮稱為單鱗蛇皮)色澤為棕黃色，具整齊分布的黑色斑點群。蛇體后段單鱗蛇皮色澤為紫黑色，斑點群呈塊狀或片狀，密集。腹部呈淡藍色，具雜亂分布的斑點群。見圖2、圖3。

注：A．甲組飲片蛇皮；B.乙組飲片蛇皮；C.丙組飲片蛇皮；D.丁組飲片蛇皮

圖1 預實驗結果

3.2.2 四川產烏梢蛇微性狀特征 四川產烏梢蛇背部單鱗蛇皮呈紫黑色，色澤較湖南產烏梢蛇深。其腹部與湖南產烏梢蛇相似，呈淡藍色，具雜亂分布的斑點群。見圖2、圖3。

3.2.3 灰鼠蛇微性狀特征 灰鼠蛇單鱗蛇皮均呈黃色或淡黃色，單鱗蛇皮邊緣亦為黑色，角隅處尤其明顯。國產灰鼠蛇背部單鱗蛇皮中央具稀少黑色斑點。進口灰鼠蛇背部單鱗蛇皮中央斑點群分布密集，腹部單鱗蛇皮均呈黃色。見圖2、圖3。

3.2.4 滑鼠蛇微性狀特征 滑鼠蛇背部橫紋處單鱗蛇皮呈黑色；無橫紋處單鱗蛇皮呈淡黃色，具雜亂分布斑點群。其腹部單鱗蛇皮呈黃白色或黃色，具片狀的斑團塊。見圖2、圖3。

3.2.5 赤鏈華游蛇微性狀特征 赤鏈華游蛇背部單鱗蛇皮呈黑色；腹部單鱗蛇皮呈紅色或黑色；背部與腹部均無斑點群。見圖2、圖3。

3.2.6 白鏈蛇微性狀特征 白鏈蛇背部單鱗蛇皮呈白色或黑色，無斑點群。其腹部呈黃色，具斑團塊，稀少。見圖2、圖3。

3.2.7 舟山眼鏡蛇微性狀特征 舟山眼鏡蛇頸部白色斑紋處單鱗蛇皮具黑色斑點。背部單鱗蛇皮呈棕黃色，具整齊分布的黑色斑點群；背部白色橫紋處微性狀特征與眼鏡狀白色斑紋處一致；頸腹部白斑紋處單鱗蛇皮呈棕黃色；腹部單鱗蛇皮呈棕黃色。見圖2、圖3。

注：A.湖南產烏梢蛇；B.四川產烏梢蛇；C.國產灰鼠蛇；D.進口灰鼠蛇；E.滑鼠蛇；F.赤鏈華游蛇；G.白鏈蛇；H.舟山眼鏡蛇

注：A.湖南產烏梢蛇；B.四川產烏梢蛇；C.國產灰鼠蛇；D.進口灰鼠蛇；E.滑鼠蛇；F.赤鏈華游蛇；G.白鏈蛇；H.舟山眼鏡蛇

圖3 烏梢蛇及偽品腹部微性狀特征

4 討論

烏梢蛇腹部單鱗蛇皮均呈淡藍色，具雜亂分布的斑點群。其背部單鱗蛇皮分兩種情況，湖南產烏梢背部中央縱線處單鱗蛇皮呈黃色，其余均為紫黑色。四川產烏梢蛇背部單鱗蛇皮呈紫黑色，顏色較湖南產烏梢蛇深。而烏梢蛇偽品微性狀特征與烏梢蛇差別較大。見表2。

表2 市售烏梢蛇及其常見偽品微性狀特征分種檢索表

1.單鱗蛇皮無斑點群。

2.背部單鱗蛇皮呈白色或黑色，腹部呈黃色，具斑團塊，稀少

白鏈蛇Dinodon septentrionalis (Gunthe)

2.背部單鱗蛇皮呈黑色；腹部單鱗蛇皮呈紅色或黑色

首先，功能分區時充分考慮自然資源條件、環境狀況、地理區位、開發利用現狀和相關規劃，并結合社會經濟和可持續發展的需要，圍繞主導功能及國防安全需要，依據選劃原則進行劃分功能區[11]。其次，保護與開發活動合理安排目的在于確保對海洋公園的持續利用，實現對關鍵或代表性生境、生態系統及生態過程的保護，隔離互相沖突的人類開發活動。在實現部分資源合理利用的同時，保護海域的自然及文化景觀，將人類活動的不良影響降至最低。

赤鏈華游蛇Sinonatrix annularis (Hallowell)

1.單鱗蛇皮有斑點群。

3.腹部單鱗蛇皮呈淡藍色，具雜亂分布斑點群

烏梢蛇Zaocys dhumnades (Cantor)

3.腹部單鱗蛇皮呈黃色或棕黃色，無斑點群。

4.背部單鱗蛇皮呈棕黃色，具整齊分布的黑色斑點群

舟山眼鏡蛇Naja naja atra Cantor

4.背部單鱗蛇皮呈黃色或黑色，具雜亂分布的黑色斑點群。

5.背部單鱗蛇皮邊緣為黑色，角隅處尤其明顯

計算機網絡安全防護是一個動態的過程，計算機病毒層出不窮，防不勝防。在構筑計算機網絡信息安全防護體系上，數據備份是必不可少的環節。數據備份分為三個層次：硬件級、軟件級和人工級

灰鼠蛇Ptyas korros (Schlegel)

5.背部單鱗蛇皮橫紋處呈黑色；無橫紋處呈淡黃色

白鏈蛇Dinodon septentrionalis (Gunthe)

烏梢蛇作為臨床常用動物類中藥，因其市場需求量大，價格昂貴，使得市場上混偽品種類繁多。經筆者調查收集，研究鑒定出有灰鼠蛇、滑鼠蛇、赤鏈華游蛇、白鏈蛇、舟山眼鏡蛇等混偽種類。通過微性狀鑒別研究發現：四川產和湖南產烏梢蛇體背的單鱗蛇皮均呈紫黑色，腹部均呈淡藍色，具雜亂分布的斑點群，且湖南產烏梢蛇中央縱線處為黃棕色，具整齊分布的黑色斑點群。而偽品的微性狀特征與之相比差異較大。微性狀鑒別方法可有效且精準地鑒別烏梢蛇的真偽，彌補傳統經驗鑒別的不足，且簡單便捷，值得推廣。