2015—2018年達州市羊布魯氏菌病監測及分析

劉俐君，歐云文，趙小波，王 勤，張 蕾，李清竹，黎丁箕，何麗霞，李 印

布魯氏菌病(Brucellosis，簡稱布病)，又稱地中海弛張熱、馬耳他熱、波狀熱，是由布魯氏菌(brucella)引起的一種人獸共患傳染病。世界動物衛生組織(OIE)將其列為B類動物疫病，我國也將其列為二類動物疫病，是國家《中長期動物疫病防治規劃(2012—2020年)》優先防治的動物疫病之一[1]。我國主要流行的是羊、牛和豬3種布魯氏菌，其中以羊布魯氏菌病最為多見，其次是牛種布魯氏菌，母畜胎膜發炎、流產、公畜不育、睪丸炎、腱鞘炎和關節炎為主要臨床特征[1]。該病主要呈地方性流行，發病無季節性，但春夏季發病率較高[1-2]。人的感染與其職業、飲食和生活習慣密切相關，感染后則表現出發熱伴寒戰、多汗、乏力、不孕不育、頭痛、神經痛、骨關節和肌肉疼痛等癥狀[3-4]。目前，全球多個國家(地區)均有布病報告，我國部分地區也曾廣泛流行，給畜牧業持續健康發展和人類健康造成嚴重威脅[5-10]。

達州市地勢以山區和丘陵為主，十分適合發展草食牲畜養殖業，但該地區地域面積廣，人口基數大，牲畜跨省流通頻繁，布病防控形勢復雜嚴峻。因此，為了掌握達州地區羊布病流行現狀和趨勢，現對2015—2018年布病監測結果進行綜合分析，以期為該地區羊布病的防控提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1血清樣本 以達州市7個縣(市、區)的奶山羊、引入羊、種公羊、種母羊和4月齡以上的商品羊為采樣對象，按照血清制備方法離心制備血清，—20 ℃冷凍保存。

1.1.2診斷試劑 布病虎紅平板凝集試驗(RBT)、試管凝集試驗(SAT)抗原、布病標準陽性血清、陰性血清由中國獸醫藥品監察所提供，均在有效期內。

1.2 方 法

1.2.1抽樣方案 每年6～8月在達州市7個縣(市、區)進行多階段抽樣，采用發現疫病或證明無疫的樣本量公式計算抽樣量。第一階段：以預估流行率計算樣本量，置信區間(CI)設為95%，可接受誤差設為5%，預期流行率設為50%，計算出各縣(市、區)需抽選鄉(鎮)數量，并用簡單隨機法抽選鄉(鎮)；第二階段：鄉(鎮)級抽選轄區內的所有羊場(戶)，進入羊場(戶)后，按發現疫病或證明無疫計算樣本量，置信區間(CI)設為95%。根據文獻[11]報道虎紅平板凝集試驗的樣品率標準差(Sp)為92%，因此，2015-2018年羊布病的預期個體陽性率分別設定為15%、6%、3%和1%，RBT初篩為布病陽性的羊場(戶)，需全群采樣。

1.2.2問卷調查 按照流行病學調查方法，對養殖場(戶)的基本信息、飼養方式、引種管理、生物安全措施以及業主對布病的認知度等內容進行問卷調查，并歸類存檔。

1.2.3實驗室檢測 采用虎紅平板凝集試驗對血清樣品進行初篩，對疑似陽性樣品進行試管凝集試驗復核，具體操作方法參照《動物布魯氏菌病診斷技術》(GB/T 18646-2002)。結果判定：采用虎紅平板凝集試驗檢測，結果為陽性者判為疑似陽性樣品；疑似陽性樣品經試管凝集試驗檢測，結果為陽性者判為確診陽性樣品；群體內至少檢出1個確診陽性樣品的群體為陽性群體。

1.2.4統計分析 采用Excel 2007進行資料整理，運用Epi info 7進行風險因素分析；用ArcGIS 10.6 繪制區域分布圖；用SPSS 20.0軟件對監測數據進行卡方檢驗和Fisher確切概率檢驗。檢驗水準為α=0.05。

2 結 果

2.1抽樣結果 2015—2018年，在達州市7個縣(市、區)抽取1 900個規模場(存欄量≥50只)和1 299個散養戶(存欄量<50只)，共采集羊血清樣品69 630份。

2.2問卷調查結果 對全市59個布病陽性養殖場(戶)及相鄰的布病陰性養殖場(戶)進行問卷調查，結果發現：近1年內引羊(OR=9.11，95%CI：1.08～77.29)、新購入羊只不隔離(OR=6.78，95%CI：1.33～34.45)、臨產母羊不與其他羊隔離飼養(OR=5.63，95%CI：1.61～19.72)是布病感染養殖場和在場內擴散的主要風險因素。通過對KAPs測試結果分析發現：一是該地區養殖場(戶)主動防疫和個人防護意識薄弱，對布病認識不到位；二是該地區多為山地和丘陵，羊養殖模式以放牧居多，且規模小、設施設備簡陋、防疫條件差、養殖模式落后、家畜流動性大。

2.3檢測結果概況 2015—2018年，對達州市3 199個場點抽檢的69 630份羊血清樣品進行了實驗室檢測，全市共監測到59個陽性場(戶)，檢出陽性樣品835份，場(戶)平均陽性率為1.84%，樣品平均陽性率為1.20%。2015—2018年場(戶)陽性率分別為6.30%、2.30%、0.80%和0.18%，陽性率下降趨勢差異具有統計學意義(n=3 199, χ2=66.415，P<0.05)；2015—2018年陽性樣品率分別為4.55%、1.90%、0.61%和0.01%，陽性率逐年下降差異具有統計學意義(n=69 630, χ2=1 121.088，P<0.01)(表1)。

表1 2015—2018年達州市羊布病監測結果
Tab.1 Surveillance results of goat brucellosis in Dazhou, 2015-2018

年度場戶數/個陽性數/個場戶陽性率(%)樣品數/份陽性數/份樣品陽性率(%)2015444286.318 2683764.552016769182.3413 8102631.9020171 417120.8532 0011950.61201856910.1815 55110.01合計3 199591.8469 6308351.20

2.4區域分布情況 2015-2018年，從區域分布分析，全市除渠縣外，其余6個縣(市、區)均檢測出布病陽性場點，場(戶)平均陽性率為0%～4.77%，其中達川區場(戶)平均陽性率最高，為4.77%，與其他縣(市、區)比較，差異具有統計學意義(n=3 199, χ2=34.612,P<0.05)；其次為萬源市，其場(戶)平均陽性率為3.61%。2015年，達川區場(戶)陽性率、最高，為14.55%，與其他縣(市、區)比較，差異具有統計學意義(n=444, Fisher 確切概率檢驗，P=0.012)；2016年，萬源市場(戶)陽性率最高，為11.11%，與其他縣(市、區)比較，差異具有統計學意義(n=769, Fisher 確切概率檢驗，P=0.01)；2017年，萬源市場(戶)陽性率最高，為3.08%，與其他縣(市、區)比較，差異具有統計學意義(n=1 417, Fisher 確切概率檢驗，P=0.02)；2018年，全市除宣漢縣檢測出1份陽性樣品外，其余6個縣(市、區)均未檢測出布病陽性樣品(圖1)。

圖1 2015—2018年達州市不同縣(市、區)羊場布病陽性率情況Fig.1 Brucellosis positive rate of goat farm in different counties, 2015—2018

2.5不同規模養殖場(戶)監測情況 2015-2018年，該地區不同規模的養殖場(戶)均監測出布病陽性樣品，其中存欄量<50只的場(戶)出現陽性場(戶)數最多，場(戶)陽性率為2.00%，場(戶)陽性率與存欄規模呈負相關，但不同規模養殖場(戶)之間比較，差異無統計學意義(n=3 199, χ2=0.497,P>0.05)。2015年，存欄量<50只的場(戶)的場(戶)陽性率最高，為9.21%，其中存欄量<100只與存欄量≥100只的場(戶)陽性率比較，差異具有統計學意義(n=444, χ2=3.958,P<0.05)；2016年，存欄量<50只的場(戶)的場(戶)陽性率亦最高，為4.71%；2017年，存欄量在50～100只的養殖場的場(戶)陽性率最高，為1.62%；2018年，僅在存欄量≥100只的養殖場中監測出陽性樣品(表2)。

表2 2015—2018年達州市不同規模羊場(點)布病監測結果
Tab.2 Brucellosis surveillance results of different large-scale goat farm in Dazhou, 2015-2018

年份養殖規模(只)存欄量≥10050≤存欄量<100存欄量<50合計2015年場戶數191112141444陽性數781328陽性率(%)3.667.149.216.302016年場戶數289289191769陽性數45918陽性率(%)3.401.734.712.342017年場戶數2683707791417陽性數26412陽性率(%)0.741.620.510.842018年場戶數133248188569陽性數1001陽性率(%)0.750.000.000.18合計陽性率(%)1.73(14/881)1.86(19/1 019)2.00(26/1 299)1.84(59/3 199)

2.6陽性場點監測情況 2015-2018年，監測為布病陽性場(戶)的樣品平均陽性率為30.56%，2017年陽性場(戶)的樣品陽性率最高，2018年陽性場(戶)的樣品陽性率最低，差異具有統計學意義(n=4 025, χ2=40.787,P<0.01)。陽性場(戶)的布病以隱性感染為主，無明顯臨床癥狀或放養過程流產不易被發現，因此，陽性場(戶)的樣品陽性率均普遍較高(表3)。

表3 2015—2018年達州市羊布病陽性場(點)監測結果
Tab.3 Surveillance results of goat brucellosis positive farm in Dazhou, 2015—2018

年度場戶數/個存欄量/只樣品數/份陽性樣品數/份樣品陽性率(%)2015282 3162 09458828.082016181 4971 26444735.3620171280151219437.892018117515510.65合計594 7894 0251 23030.56

3 討 論

布病作為重要的人獸共患病，在我國多個地區流行，按照布魯氏菌病診斷方法和疫區判定標準，四川省共有48個布病疫區縣，主要分布在阿壩、甘孜、涼山、成都、雅安、內江和綿陽市(州)[12]。達州地處川渝陜3省(市)結合部, 是四川東出北上門戶，屬布病凈化區域。1985年，達州市從市外引入的山羊中首次監測到布病。近年來，四川省大力發展草食牲畜，隨著活羊價格波動，羊的交易調運頻繁，布病的防控形勢變得復雜嚴峻。2014年，達州市疾病預防控制中心首次報告了達州地區人間布病病例，隨后達州市、縣兩級動物疫病預防控制中心在轄區內開展了羊場布病監測凈化工作。為提高抽樣的精準度，在計算第一階段抽樣量時，預估流行率設為50%，采取最大采樣量。達州地區羊場規模化程度較低，生物安全等級差，不同批次、日齡的羊混養，養殖場(戶)一旦引入布病陽性羊，極易在群體中傳播，隨著布病凈化工作的推進，個體陽性率逐漸降低。因此，2015—2018年羊布病的預期個體陽性率分別設為15%、6%、3%和1%。

2015—2018年，達州市3 199個場(戶)、69 630份羊血清的布病監測結果表明，該地區共監測出59個陽性場(戶)，835份陽性樣品，場(戶)平均陽性率為1.84%，樣品平均陽性率為1.20%，場(戶)陽性率下降趨勢差異具有統計學意義(n=3 199, χ2=66.415,P<0.05)，樣品陽性率逐年下降差異具有統計學意義(n=69 630, χ2=1121.088,P<0.01)。從區域分布分析，發現該地區除渠縣外，其余6個縣(市、區)均檢測出布病陽性場(戶)，其中達川區場(戶)陽性率最高，為4.77%，與其他縣(市、區)比較，差異具有統計學意義(n=3 199, χ2=34.612,P<0.05)，全市各縣(市、區)場(戶)陽性率均呈總體下降趨勢，主要呈點狀散發性流行。這一系列數據的變化主要歸因于該市采取檢疫、監測、檢測、陽性場點全群撲殺、無害化處理等綜合防控措施，全面開展了畜間布病專項監測、凈化工作，全市陽性場(戶)數逐年減少，樣品陽性率從4.55%下降至0.01%，顯著低于四川省樣品布病陽性率的平均水平(0.65%)[13]。從養殖場規模分析，發現該地區不同規模的養殖場(戶)均監測出布病陽性樣品，其中存欄量<50只的場(戶)出現陽性場點數最多，場(戶)陽性率為2.00%，場(戶)陽性率與存欄規模呈負相關，但不同規模養殖場(戶)之間比較，差異無統計學意義(n=3 199, χ2=0.497,P>0.05)。經流行病學調查分析發現，養殖戶防疫意識薄弱，養殖模式落后，防疫條件差，未經檢疫隨意引種、種羊交換和買賣現象頻繁是散養戶高機率發生和流行布病的主要因素。

總體而言，布病的監測、凈化工作已取得初步成效，但要想鞏固防控成果還需進一步做好以下工作。一是對養殖戶加強宣傳與培訓工作，提高其主動防疫和個人防護意識；二是制定行之有效的檢疫監管政策和措施，切斷疫病傳入和擴散的渠道，從源頭上預防疫病發生；三是爭取各級政府和主管部門的重視，保障監測和撲殺經費，對經濟價值不高的牲畜全群撲殺；四是加強與衛生等相關部門的信息共享，形成合力，聯防聯控，才能保障畜牧業持續、健康發展和人類健康。

利益沖突：無