便攜式血脂儀與全自動生化儀檢測卒中患者低密度脂蛋白膽固醇的比對分析

方 玲， 黃惠萍， 楊珍珍， 郭祈福， 吳 華

血脂異常是中老年人動脈粥樣硬化最常見的危險因素[1]，血脂水平的檢測和控制在動脈粥樣硬化相關疾病的預防中具有十分重要的地位，其中低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C)是動脈粥樣硬化性心腦血管疾病治療的關鍵目標[2-3]。隨著全社會對腦卒中認識的提高，在社區流行病學調查、小型醫療機構或家庭中應用便攜式血脂儀進行LDL-C的快速檢測逐漸增加[4-5]。CardioChek PA血脂儀是全球應用最廣的即時血脂檢測設備，攜帶方便，操作簡單，用血量少，能快速檢測總膽固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglycerides，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)含量，并提供LDL-C的計算值。但因便攜式血脂儀提供的LDL-C的數值受樣本、檢測系統準確性及計算公式的影響，其臨床應用相關研究較少且存在爭議[6]。筆者擬探討CardioChek PA便攜式血脂儀與全自動生化儀檢測卒中患者的LDL-C的偏差。

1 對象與方法

1.1對象 收集2015年4—6月于筆者醫院神經內科住院的缺血性腦卒中患者82例，年齡(62.5±12.3)歲(48～74歲)，男性42例(51.2%)，女性40例(48.8%)，高血壓病40例(48.8%)，糖尿病20例(24.4%)，吸煙22例(26.8%)。納入標準：住院期間可同時采集空腹末梢全血及靜脈全血的患者，檢測血脂水平在CardioChek PA血脂儀可測量范圍內(TC>2.59 mmol/L，HDL<2.59 mmol/L，4.52 mmol/L>TG>0.57 mmol/L)。排除標準：末梢血采集困難；TC，HDL，TG三個指標任何一個指標超出血脂儀測量范圍。本研究經筆者醫院倫理委員會批準，受試者均簽署知情同意書。

1.2儀器及試劑 CardioChek PA血脂儀和配套試紙條(美國 PTS 診斷公司)，采用同一批號試紙進行檢測，標本嚴格按照儀器說明書進行操作。每天檢測受試者血標本前均以廠家提供的標準液按標準操作流程校準血脂儀檢測系統，質控合格后開始檢測受試者樣本。臨床生化檢測血脂法應用德國西門子ADVIA2400全自動生化分析儀及其配套試劑測定，檢驗科于2012年通過ISO 15189評審，室內質控穩定，檢測項目達國家實驗室質量評價標準。

1.3測試方法 受試者清晨空腹臥位，以75%乙醇局部消毒指尖，待干后針刺采血，拭去第一滴血，以配套無菌微量吸管取第二滴血樣40 μL，在10 s內將血樣均勻滴加到試紙條上，讀取并打印CardioChek PA血脂儀的TC，TG，HDL-C及LDL-C數值(B組)，并在5 min內抽取受試者肘靜脈血，止血帶使用時間<1 min，穿刺成功后立即松開止血帶，抽靜脈血兩管，每管2 mL，一管為帶分離膠的血清管，一管為枸櫞酸抗凝管。將血清管送至檢驗科4 ℃保存，3 h內以ADVIA2400全自動生化儀檢測血脂4項作為參照組(A組)。抗凝管內血樣即刻應用CardioChek PA血脂儀檢測3次，記錄并計算上述血脂的平均值(C組)。

1.4血脂異常的定義、偏倚計算方法及標準化西格瑪性能驗證圖的繪制 根據《中國成人血脂異常防治指南(2016年修訂版)》將血脂異常定義為TC≥5.2 mmol/L、TG≥1.7 mmol/L、HDL-C<1.0 mmol/L、LDL-C≥3.4 mmol/L[7]。將血脂4項數值在異常邊界值5%以內的數值同時分類在兩組。每個樣本配對結果之間的偏倚計算方法為[(B組-A組)/A組]×100%或[(C組-A組)/A組]×100%。根據美國臨床實驗室改進規范(clinical laboratory improvement amendments，CLIA’88)[8]技術檢查標準推薦的可允許誤差TC±10%、HDL-C±30%、TG±25%及美國國家膽固醇教育計劃對LDL-C的總允許誤差LDL-C±12%的要求[9]，應用檢驗醫學信息網六西格瑪軟件(http://www.clinet.com.cn/sigmapv/),將允許總誤差、偏倚和不精密度數據導入軟件，繪制標準化西格瑪性能驗證圖，結果判斷：σ<2(不可接受)、2≤σ<3(欠佳)、3≤σ<4(臨界)、4≤σ<5(良好)、5≤σ<6(優秀)和σ≥6 (世界一流)。

2 結 果

2.1CardioChek PA 血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀檢測血脂數值的比較 經正態性檢驗，CardioChek PA 血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀檢測的TC，TG，HDL-C及LDL-C數值符合正態分布。B組及C組的TC，HDL-C及LDL-C數值低于A組數值(P<0.05)。B組與C組的4項血脂數值無差別(P>0.05)，具體見表1。

表1 CardioChek PA 血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀檢測血脂結果比較

TC：總膽固醇；TG：甘油三酯；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇. A組：采用ADVIA2400檢測血清；B組：采用CardioChek PA檢測末梢全血；C組：采用CardioChek PA 檢測靜脈全血. 與A組比較，☆：P<0.05.

2.2CardioChek PA血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀提供的血脂結果相關性及回歸方程 末梢全血用CardioChek PA 血脂儀檢測的TC，TG，HDL-C，LDL-C數值與ADVIA2400全自動生化儀檢測的數值對應的相關系數r分別為0.830，0.781，0.741，0.861(P<0.001，表2)。靜脈全血用CardioChek PA 血脂儀檢測的TC，TG，HDL-C，LDL-C數值與ADVIA2400全自動生化儀檢測數值對應的相關系數r分別為0.914，0.776，0.640，0.831(P<0.001，表3)。

表2 血脂儀(末梢全血)與生化儀血脂數值直線回歸方程及顯著性檢驗

Tab 2 Linear regression equation and significance test of TC，TG，HDL-C and LDL-C from finger blood by CardioChek PA and serum by ADVIA2400 automatic analyzer

項 目rr2aby=bx+aF值P值TC0.8300.6890.6060.756y=0.756x+0.606159.780.000TG0.7810.6100.3690.801y=0.801x+0.369112.580.000HDL-C0.7410.5490.7200.269y=0.720x+0.26987.510.000LDL-C0.8610.741-0.1380.830y=0.830x-0.138206.090.000

TC：總膽固醇；TG：甘油三酯；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇.

表3 血脂儀(靜脈全血)與生化儀血脂數值直線回歸方程及顯著性檢驗

Tab 3 Linear regression equation and significance test of TC,TG,HDL-C and LDL-C from venous by CardioChek PA and serum by ADVIA2400 automatic analyzer

項 目rr2aby=bx+aF值P值TC0.9140.835-0.0420.869y=0.869x-0.042363.970.000TG0.7760.6020.4250.737y=0.737x+0.425108.830.000HDL-C0.6400.4100.3830.583y=0.583x+0.38350.010.000LDL-C0.8310.691-0.1740.815y=0.815x-0.174160.670.000

TC：總膽固醇；TG：甘油三酯；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇.

2.3CardioChek PA 血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀血脂異常檢出率及標準化西格瑪性能驗證 CardioChek PA 血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀的血脂異常檢出率比較，高TC、高TG及低HDL-C的檢出率無差別，但CardioChek PA 血脂儀組高LDL-C的檢出率低于ADVIA2400全自動生化儀組，差別有統計學意義(P<0.05，表4)。將脂類4項允許總誤差、偏倚(表5)和不精密度數據導入六化西格瑪軟件，繪制標準化西格瑪性能驗證圖，結果顯示，CardioChek PA 血脂儀檢測TG的性能4≤σ<5(良好)，靜脈全血組檢測HDL-C的性能σ≥6 (世界一流)，其余檢測項目均為σ<2(不可接受)。

表4 CardioChek PA 血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀的血脂異常檢出率比較

Tab 4 Detection of hyperlipidemia in three test methods by CardioChek PA analyzer or ADVIA2400 automatic analyzer

項 目n血脂異常(%)A組B組C組TC≥5.2 mmol/L26(31.7)14(17.9)16(19.5)TG≥1.7 mmol/L22(26.8)25(30.5)24(29.3)HDL-C<1.0 mmol/L34(41.5)37(45.1)38(46.3)LDL-C≥3.4 mmol/L26(31.7)13(15.9)☆14(17.9)☆

TC：總膽固醇；TG：甘油三酯；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇. A組：采用ADVIA2400檢測血清；B組：采用CardioChek PA檢測末梢全血；C組：采用CardioChek PA 檢測靜脈全血. 與A組比較，☆:P<0.05.

表5 CardioChek PA 血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀之間的血脂數值偏倚

Tab 5 Bias analysis of TC，TG，HDL-C and LDL-C between CardioChek PA analyzer and ADVIA2400 automatic analyzer %

偏倚平均值TCTGHDL-CLDL-CB組-10.6512.86-36.30-22.11C組-13.9610.59-6.98-24.44

TC：總膽固醇；TG：甘油三酯；HDL-C：高密度脂蛋白膽固醇；LDL-C：低密度脂蛋白膽固醇. B組：采用CardioChek PA檢測末梢全血；C組：采用CardioChek PA 檢測靜脈全血.

3 討 論

血脂代謝紊亂作為動脈粥樣硬化最重要的獨立危險因素[10]，是臨床研究和隨訪觀察的重點關注指標。大量流行病學及臨床研究充分證實了LDL-C降幅與動脈粥樣硬化性心血管病(atherosclerotic cardiovascular disease，ASCVD)密切相關，缺血性腦卒中也是ASCVD的重要一員，在ASCVD一級或二級預防中，LDL-C的絕對值與ASCVD事件絕對發生率呈線性相關，LDL-C是調脂治療首要靶向目標。2013年 ACC/AHA膽固醇管理指南提出四類他汀獲益人群需要監控LDL-C[11]。2018年，美國AHA血膽固醇管理指南繼續對LDL-C的管理提出明確且嚴格的目標值[12]。國內外卒中指南也一致推薦對于LDL-C≥2.6 mmol/L的非心源性缺血性腦卒中或TIA患者強化他汀類藥物治療以降低腦卒中和心血管事件的風險，LDL治療目標值為LDL-C下降≥50%或LDL-C≤1.8 mmol/L[3，13]。因此，動態監控LDL-C水平對缺血性卒中患者的調脂管理具有重要意義。

目前血脂的參考指標檢測以大型儀器檢測為主，檢測所需時間較長，在一定程度上降低患者的依從性。CardioChek PA血脂儀是全球應用最廣的即時血脂檢測設備[14]。CardioChek PA血脂儀與大型的儀器檢測比較，具有可以隨時進行測試、操作簡便、快速的優點，適合于非化驗專業的人員使用。目前國內外對其檢測結果的準確性報道不一致[5，14-16]。侯立安等比較了CardioChek PA血脂儀測定末梢全血的TC，TG和HDL-C與四種全自動生化儀(Beckman AU5400，Roche P，Hitach 7180及BeckmanDxC 800)結果的差別，發現CardioChek PA血脂儀的TC值與這四種生化儀的結果偏差最小，雖然在醫學水平偏差滿足NCEP總允許誤差標準(15%)，TG值與BeckmanDxC 800結果偏差可達25.85%[16]。楊萍等則比較了CardioChek PA血脂儀與另一種主流全自動生化分析儀ADVIA2400之間TC，TG，HDL-C及LDL-C數值的差別，結果認為CardioChek PA血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀測定結果相近，可用于社區流行病學調查[5]。上述研究檢測的對象為門診志愿者或社區成員居多，對本身為血脂代謝異常相關的疾病如卒中這類特殊人群尚無明確比對結果。筆者發現，CardioChek PA 血脂儀的采血方式(指尖末梢血或靜脈全血)不影響檢測結果，因而在僅需采集血脂信息時可用指尖采血方式，若需同時采集血樣其他信息時可采用靜脈采血方式。CardioChek PA血脂儀與全自動生化儀血脂數值的相關系數均大于0.7,說明CardioChek PA血脂儀與ADVIA2400全自動生化儀檢測的血脂數值具有高度相關性。缺血性腦卒中患者末梢全血或靜脈全血應用CardioChek PA 血脂儀檢測的TC，HDL-C及LDL-C的低于全自動生化儀檢測值，TG檢測結果與生化儀檢測值無差別。應用CardioChek PA 血脂儀的高TC、高TG及低HDL-C異常檢出率與全自動生化儀比較無差異，但高LDL-C的檢出率低于全自動生化儀，末梢全血CardioChek PA血脂儀的LDL-C數值較生化儀低22.11%，靜脈全血CardioChek PA血脂儀的LDL-C數值較生化儀低24.44%，標準化西格瑪性能驗證圖結果顯示，CardioChek PA 血脂儀檢測LDL-C的性能為σ<2(不可接受)。因而缺血性卒中患者若僅以CardioChek PA 血脂儀檢測LDL-C，將高估降脂治療效果或延誤治療時機。

血脂的檢測結果受多個因素影響，包括檢測時溫度、患者體位、抗凝劑、檢測方法等[17]。既往實驗發現，由CardioChek PA血脂儀本身帶來的不確定度非常小，但是不同批號試紙則引入了較大的變異，這可能與試紙的生產、保存、運輸以及使用等多種因素有關，并且試紙條筒蓋打開時間過長可能帶來結果的不穩定[16]。CardioChek PA血脂儀較自動生化分析儀更容易受到采樣者及操作者的影響[18]。本研究中各組的采血在時間和空間上具有一致性，采用同一批號試紙以減少檢測方法的不確定性。檢測時間上，采血后即刻行CardioChek PA血脂儀檢測，運用ADVIA2400全自動化分析儀檢測在采血后3 h內完成，盡量避免檢測時間差引起的偏倚。采血時體位為清晨臥位，統一使用3 mL枸櫞酸抗凝管，避免使用EDTA抗凝劑而影響檢測結果。CardioChek PA 血脂儀所提供的LDL-C值是用Friedewald公式計算所得，其與全自動生化儀提供的LDL-C直接測定值的差別可能來自CardioChek PA 血脂儀檢測TC，TG及HDL-C的準確性、樣本特殊性及Friedewald公式法的可靠性。既往研究表明，應用Friedwald 公式計算LDL-C要求TG<4.52 mmol/L[19-20]。本研究中，數據均符合Friedewald公式法要求，因而CardioChek PA血脂儀提供LDL-C與自動生化儀直接檢測的LDL-C數值的差別主要源自系統偏倚及樣本的特殊性。本研究中，缺血性腦卒中患者末梢全血及靜脈血的CardioChek PA血脂儀的LDL-C數值較生化儀直接檢測值低，與文獻報道相似[6，21]。Miller等發現，LDL-C的測定誤差受到血樣來自健康者或患者(高脂血癥和心血管疾病)的影響，健康者的檢測誤差符合NCEP規定總誤差范圍，而患者均無法達到NCEP規定的總誤差范圍[9]。文中數據源自腦卒中患者，也可能與數據偏離較多相關。

腦卒中患者無論應用末梢全血或靜脈全血以CardioChek PA便攜式血脂儀檢測的LDL-C數值與全自動生化儀的LDL-C直接檢測值相比都存在偏倚。雖然在大規模流行病學調查中CardioChek PA 血脂儀具有一定的實用性，可用于社區TC，TG及HDL-C異常患者的篩查，但在缺血性腦卒中患者進行高脂血癥臨床診斷及降脂冶療方案確認時仍需參照全自動生化分析儀檢測的LDL-C數值。