侯 惺 賈方真 李 娟 張 莉 趙 露 杜桂秋
(棗莊市立醫(yī)院,山東 棗莊 277100)
隨著經濟發(fā)展,社會生活水平的提高,人們對健康的認識越來越深,同時亞健康威脅了我們的生活質量。世界衛(wèi)生組織的調查顯示,其余75%以上的人都處在亞健康狀態(tài)。我們有必要對抗疲勞作用的中藥飲片進行文獻研究,抗疲勞作用研究多是單味藥研究,如現(xiàn)代藥理研究杜仲[1-2]有耐缺氧、抗氧化、提高免疫力、降血脂及增加體質量的作用,《本經》描述杜仲“主腰脊痛,補中益精氣,堅筋骨”,續(xù)斷[3]為川續(xù)斷科植物川續(xù)斷Dipsacus asper Wall.ex Henry的干燥根。此外還有對枸杞[4-5]、紅景天[6-7]、黃精[8]、人參[9]等抗疲勞作用研究。復方藥研究很少,杜仲和續(xù)斷二者配伍,在骨傷科常做藥對使用,也獨立成方,等量配伍組成杜仲丸,始載于《校注婦人良方》卷十二。亦有抗疲勞、抗衰老、增強免疫作用,中醫(yī)用其補肝腎、強筋骨、續(xù)折傷。鹽炙后可引藥入腎,增強補肝腎、強筋骨作用。故以抗疲勞作用做為藥理指標,選擇有促成骨細胞增強作用的60%乙醇提取物,通過測定老齡小鼠給藥前后體質量的變化和血清中的乳酸、尿素氮及肝糖原的含量,觀察杜仲丸的抗疲勞作用的影響。
1.1 試劑:乳酸、尿素氮、肝糖原試劑盒購自南京建成生物制成生物制品有限公司,乳酸批號20070423、20070520,尿素氮批號20070423,肝糖元批號20070423、20090520,其他試劑為分析純。
1.2 動物:昆明種小鼠,雌雄各半,體質量23~27 g,由山東中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供,批號SCXK(魯)20050015。
1.3 儀器:數(shù)顯恒溫水浴鍋,常州國華電器有限公司;FA10004電子天平,上海恒平科學儀器有限公司生產;LD24-0.8型離心機,北京醫(yī)用離心機廠生產;754紫外分光光度計,上海市精密儀器公司生產。
1.4 杜仲丸醇提取物:取杜仲飲片剪成3 mm以下碎片,續(xù)斷粉碎,過2號篩,精密稱取,各22.73 g,粉末等量混合,分置1000 mL燒瓶中,加20倍60%的乙醇浸泡1 h,回流提取2 h,提取液減壓濃縮,60 ℃干燥,得干粉。1 g干粉相當于3.94 g生藥。
1.5 實驗方法:取70只小鼠,隨機分為7組:分別為對照組,生杜仲丸低、中、高劑量組。分別按0.023,0.045,0.091 mg/kg劑量,每天灌胃,稱重,連續(xù)14 d,對照組以等體積蒸餾水灌胃。末次灌胃30 min后,各組小鼠分別在溫度(30±1)℃深40 cm池中游泳120 min后[10-11],取出小鼠,休息60 min,摘眼球取血,依照乳酸試劑盒及尿素氮試劑盒測定血清乳酸[12-13]及血清尿素氮含量[14-16]。摘眼球后立即處死老鼠,解剖取其肝臟,依照肝糖原試劑盒測定肝糖原含量。
2.1 供試品對小鼠14日內體質量增加的影響:灌胃小鼠14 d內,生杜仲丸低、中、高劑量組和空白組小鼠體質量都增加,且生杜仲丸低、中、高劑量組均比空白組小鼠增長速度快,提示杜仲、續(xù)斷配對,可增加對小鼠體質量增加的影響,雄性小鼠普遍比雌性小鼠體質量增長快。見表1。
表1 杜仲丸醇提物對小鼠每日體質量增量的影響()

表1 杜仲丸醇提物對小鼠每日體質量增量的影響()
2.2 供試品對小鼠運動后血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影響:低、中、高劑量組小鼠運動后血清尿素氮、血清乳酸均低于空白組,經統(tǒng)計學處理,低劑量組與空白對照組及中劑量與高劑量組,組間比較均有顯著性差異(P<0.05)。低、中、高劑量組小鼠運動后肝糖原均高于空白組,經統(tǒng)計學處理,空白組與低劑量組、低劑量組與中劑量組及中劑量與高劑量組比較均有顯著性差異(P<0.01)。見表2。
表2 杜仲丸醇提物對小鼠體內血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影響()

表2 杜仲丸醇提物對小鼠體內血清尿素氮、血清乳酸、肝糖原的影響()
現(xiàn)在由于工作,學習壓力日益加重,生活環(huán)境日益惡化,近年來,由于疲勞誘發(fā)突發(fā)性疾病,導致疾病病情加重,甚至導致死亡。根據《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》(2003 年版)“緩解體力疲勞功能檢驗方法”項下結果判定的標準:負重結果陽性,且血乳酸、血清尿素、肝糖原三項指標中任兩項指標陽性,即可判定該受試樣品具有緩解體力疲勞功能的作用。糖元是機體運動時能量的重要來源,有研究表明[17-18]中等強度和長時間的運動會使骨骼肌糖原和血糖水平減少,使大腦皮層和骨骼肌工作能力下降,是造成運動疲勞的直接原因。它的多少直接影響運動能力,提高糖元儲備或減少運動時糖元的消耗對提高速度增強耐力有重要意義[19-20]。糖元在體內有肝糖原和肌糖原兩種儲備形式,是糖代謝的重要能源物質??砷L時間維持運動時的血糖水平,延緩疲勞在運動著的肌肉中,當能量平衡遭到破壞時,蛋白質和含氮化合物的分解代謝加強并伴隨著尿素的形成增加。機體運動負荷的適應性越低,這種分解代謝作用越強,形成的尿素也就越多[21]。本實驗結果可知杜仲丸能有效降低血清尿素氮、血清乳酸的含量,增加肝糖原的含量,而且鹽炙后有利于降低血清尿素氮、血清乳酸的含量,增加肝糖原的含量,增強機體對運動負荷的適應能力。證明杜仲丸有抗疲勞作用,鹽炙后有增強作用的趨勢。
《本草綱目》上記載杜仲“肝主筋,腎主骨,腎充則骨強,肝充則筋健,屆伸利用,皆屬于筋”。《別錄》上記載續(xù)斷“主崩中漏血,金瘡血內漏,止痛,生肌肉,踠傷,惡血,腰痛,關節(jié)緩急”。在現(xiàn)代藥理研究,杜仲與續(xù)斷有增強免疫作用,通過對杜仲丸鹽炙前后杜仲丸的抗疲勞的研究,為“咸入腎,腎入骨理論相關性研究”提供了部分科學依據。此外,隨著人們對日常保健越來越重視。具有抗疲勞作用的中藥飲片有助于提高人體免疫作用,將隨著制劑科學技術的發(fā)展,對藥食同源產品的開發(fā)會越來越多[22-23],此研究也為杜仲、續(xù)斷后續(xù)的抗疲勞作用產品的開發(fā)提供理論依據。