芪苓水煎劑對(duì)四氯化碳致小鼠急性肝損傷的顯微結(jié)構(gòu)影響

黃麗娜 龍海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 福建漳州 363100

肝臟在代謝、物質(zhì)轉(zhuǎn)化與合成、排泄等方面均起著重要的作用，是動(dòng)物體內(nèi)最大的代謝器官[1]。本課題前期研究結(jié)果表明，“芪苓散”超微粉可一定程度上提高河田雞的抗氧化性能、免疫功能，降低血脂水平。馬紹偉等[2]、孫銘君等[3]將中藥芪苓制劑應(yīng)用于仔豬、河田雞養(yǎng)殖生產(chǎn)，通過(guò)養(yǎng)殖場(chǎng)觀察以及實(shí)驗(yàn)室研究，表明芪苓制劑在增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的抗氧化性能、免疫功能、生產(chǎn)性能等方面呈現(xiàn)良好效果。劉英等[4]研究總結(jié)發(fā)現(xiàn)保護(hù)肝臟在預(yù)防和治療動(dòng)物疾病方面是十分必要的。本論文主要研究在肝毒物質(zhì)四氯化碳的影響下，中藥芪苓水煎劑是否對(duì)試驗(yàn)小鼠肝臟細(xì)胞形態(tài)學(xué)方面產(chǎn)生保護(hù)作用及保護(hù)的程度，旨在探討中藥芪苓制劑對(duì)動(dòng)物的保肝作用機(jī)制，為芪苓制劑在畜禽生產(chǎn)及獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 主要藥劑及儀器 中藥芪苓水煎劑的主要組成：黃芪、白術(shù)、防風(fēng)、黨參、茯苓等。主要試劑與儀器：四氯化碳（CCl4）、10%福爾馬林、蘇木精染液、1%伊紅染液、1%鹽酸酒精等；Leica雙目顯微鏡、DM2000顯微照相系統(tǒng)（Leica公司）、LeicaRM2135顯微切片機(jī)、載玻片及其他玻璃器皿等。

1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及分組 試驗(yàn)小鼠昆明系若干只，體重18～22 g，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)分為3組，每組10只。A組為空白對(duì)照組；B組為陽(yáng)性對(duì)照組；C組為芪苓水煎劑組。各組隔離飼養(yǎng)，每日定時(shí)供給日糧和干凈飲水。

1.2 方法

1.2.1 配制0.3%CCl4石蠟油 將300μLCCl4加入100mL石蠟油中，混合均勻。

1.2.2 制備芪苓水煎劑 稱(chēng)取中藥芪苓方劑300 g，先加水1 800mL，煎煮40min，紗布過(guò)濾，再在濾渣中加水1 200 mL，重復(fù)上述煎煮過(guò)濾步驟，最后合并兩次濾液并濃縮至120 mL。

1.2.3 參試動(dòng)物的用藥 A組和B組生理鹽水灌胃，C組小鼠芪苓水煎劑灌胃（0.2 mL/20 g），每日1次，共7次。7 d后，B組和C組按0.2mL/20 g灌胃0.3%CCl4石蠟油，1次/3 d，連用3次。在CCl4灌服期間，仍然按芪苓水煎劑原劑量對(duì)C組給藥。

1.2.4 病理采樣、光鏡制樣及觀察 在最后一次造模16 h后處死參試小鼠和按病理學(xué)要求采樣。剖檢取每組小鼠肝臟的同一部位置10%福爾馬林固定，再進(jìn)行石蠟包埋切片，HE染色，光鏡下(200×)觀察和拍照。

2 結(jié) 果

空白對(duì)照組小鼠的肝細(xì)胞排列致密、均一，形狀規(guī)則，細(xì)胞核較大、圓形（見(jiàn)圖1）。陽(yáng)性對(duì)照組小鼠肝細(xì)胞明顯腫脹、脂肪變性，細(xì)胞核消失，有的固縮而深染，形狀不規(guī)則（見(jiàn)圖2）。芪苓水煎劑組小鼠大多數(shù)肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)保留完整狀態(tài)，小靜脈附近的肝細(xì)胞有一定程度的變性和壞死（見(jiàn)圖3）。

3 討 論

四氯化碳模型組小鼠肝組織顯微結(jié)構(gòu)變化特點(diǎn)是壞死灶區(qū)域明顯大于芪苓水煎劑組，而芪苓水煎劑試驗(yàn)組小鼠肝臟組織雖然有變質(zhì)性變化，但限制在肝小葉周邊較為狹小的區(qū)域，大多數(shù)肝組織結(jié)構(gòu)病變明顯輕于四氯化碳陽(yáng)性對(duì)照組。由此可說(shuō)明芪苓水煎劑可緩解四氯化碳所致急性肝損傷的病理組織學(xué)變化，顯示出了一定的抗肝損傷作用，這可能是由于芪苓水煎劑通過(guò)中藥含有的多種成分協(xié)同作用而表現(xiàn)為多種功效的集合。因此，芪苓水煎劑可能通過(guò)影響自由基的形成及抗氧化反應(yīng)，穩(wěn)定肝細(xì)胞膜，從而降低膜的通透性，減少肝細(xì)胞壞死，使肝細(xì)胞變性和壞死等病理變化減輕等可能機(jī)理而保護(hù)肝臟。

圖2 陽(yáng)性對(duì)照組小鼠肝組織

圖3 芪苓水煎劑組小鼠肝組織