青海八眉豬及其雜交豬肉揮發(fā)性成分分析

王克晨　黃文穎　周繼平　王磊　羅增海　吳國(guó)芳　劉海珍

摘 要：通過(guò)固相微萃取和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對(duì)青海八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八及杜長(zhǎng)大（對(duì)照）豬肉的揮發(fā)性風(fēng)味成分進(jìn)行檢測(cè)分析。結(jié)果表明：八眉原種豬肉中揮發(fā)性風(fēng)味化合物種類(lèi)繁多、成分復(fù)雜，相對(duì)含量最高，且各風(fēng)味成分以醛類(lèi)物質(zhì)為主;八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八豬肉中壬醛（清香氣味）、癸醛（甜香和柑橘香）、2，4-癸二烯醛（油脂香）、十二醛（皂香、柑橘香）、十四醛（脂肪香）、十六醛（花和蠟的弱香氣）等醛類(lèi)物質(zhì)較杜長(zhǎng)大豬肉豐富;1-辛醇（油脂香味、橘柑和玫瑰香味）、1-辛烯-3-醇（蘑菇香、青香、蔬菜香）、2-庚醇（淡芳香、脂肪香）等醇類(lèi)物質(zhì)分別在八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八豬肉中有不同程度檢出，3 組豬肉的醇類(lèi)物質(zhì)種類(lèi)及相對(duì)含量也高于杜長(zhǎng)大豬肉;同時(shí)，十二烷酸（月桂油香）、十四碳酸（微弱的蠟香和乳香）、苯酚類(lèi)（甜香）等化合物的相互作用疊加使八眉原種豬及其雜交豬肉形成獨(dú)特風(fēng)味，與杜長(zhǎng)大豬相比肉質(zhì)細(xì)膩、味道鮮美、風(fēng)味醇香濃郁、肉品質(zhì)量上乘。

關(guān)鍵詞：青海八眉原種豬;雜交豬;揮發(fā)性風(fēng)味成分;含量差異

Abstract： Solid-phase microextraction （SPME） coupled with gas chromatography-mass spectroscopy （GC-MS） was used for detecting the volatile flavor compounds in meat from pure Qinhai Bamei pigs， Landrace × Bamei crossbred pigs， Yorkshire ×?Landrace × Bamei crossbred pigs and Duroc × Landrace × Yorkshire crossbred pigs （control）. The results showed meat from pure Qinhai Bamei pigs contained a wide variety and complex composition of volatile flavor compounds at the highest amount among the four breeds， with aldehydes being the dominant one. The control was less rich in nonanal （refreshing aroma）， decanal （sweet and orange-like aroma）， 2，4-decadienal （fatty aroma）， dodecanal （soap-like and orange-like aroma）， tetradecanal （fatty aroma）， and hexadecanal （weak flowery and waxy aroma） than three other breeds. 1-octanol （fatty， orange-like and rosy aroma）， 1-octen-3-ol （mushroom-like， green and vegetable-like aroma） and 2-heptanol （light， fatty aroma） were detected in all breeds except the control at different amounts， and the three breeds were higher in the number and amount of alcohol compounds than the control. Furthermore， the interaction among dodecanoic acid （laurel oil-like aroma）， myristic acid （weak waxy and milky aroma）， phenols （sweet aroma） and other compounds imparted distinctive flavors to meat from pure and crossbred Bamei pigs， which had more delicate texture， better taste， stronger flavor and better quality compared with the control.

Keywords： Qinghai Bamei pigs; hybrid pig; volatile flavor components; quantitative differences

DOI：10.7506/rlyj1001-8123-20200307-062

中圖分類(lèi)號(hào)：TS251.1? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1001-8123（2020）05-0064-06

青海八眉豬是在青藏高原獨(dú)特的自然生態(tài)條件下，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期選育形成的中國(guó)八大名豬之一，因其額部有縱行倒“八”字紋而得名，具有耐饑寒、耐粗飼、抗病力強(qiáng)、抗逆性好、遺傳性狀穩(wěn)定、母豬性早熟、繁殖能力強(qiáng)、受胎率高、保姆性強(qiáng)、產(chǎn)仔多且仔豬成活率高等特點(diǎn)，與引進(jìn)品種豬雜交優(yōu)勢(shì)明顯，為優(yōu)良雜交母本品種。青海八眉豬胴體瘦肉率較高、背膘較薄，肉品具有色澤鮮紅、大理石紋清晰、肥肉肥而不膩、瘦肉瘦而不柴、脂肪堅(jiān)實(shí)、風(fēng)味獨(dú)特、有嚼勁等特性，具有地方豬種獨(dú)特特性，深受廣大消費(fèi)者青睞。長(zhǎng)期以來(lái)，對(duì)八眉豬肉營(yíng)養(yǎng)組成、氨基酸含量等研究較多，但對(duì)肉中風(fēng)味物質(zhì)成分的研究較少，在宣傳推介八眉豬地方品種時(shí)多呈現(xiàn)其“蛋白質(zhì)含量高、脂肪含量適中、氨基酸種類(lèi)齊全、含量豐富”等優(yōu)點(diǎn)，但其風(fēng)味成分的優(yōu)勢(shì)未能凸顯。肉類(lèi)風(fēng)味是目前比較難研究的食品風(fēng)味之一，但其發(fā)展前景非常廣闊，本研究在以往八眉豬肉營(yíng)養(yǎng)組成研究基礎(chǔ)上，以八眉豬原種、二元長(zhǎng)八及三元約長(zhǎng)八豬為研究對(duì)象，對(duì)豬肉揮發(fā)性成分進(jìn)行檢測(cè)分析，并與杜長(zhǎng)大豬進(jìn)行比較，客觀揭示八眉豬肉質(zhì)風(fēng)味的獨(dú)特性，為進(jìn)一步豐富八眉豬肉品質(zhì)量數(shù)據(jù)庫(kù)、扶強(qiáng)壯大八眉豬產(chǎn)業(yè)、開(kāi)發(fā)利用這一優(yōu)良地方豬種資源提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

于2017—2018年在青海八眉豬中心產(chǎn)區(qū)互助八眉豬保種場(chǎng)、互助良種仔豬繁育場(chǎng)分別選取八眉豬原種、二元長(zhǎng)八豬、三元約長(zhǎng)八豬作為實(shí)驗(yàn)組（每組6 頭，共計(jì)36 頭），同時(shí)將樂(lè)都容生生態(tài)養(yǎng)殖公司的杜長(zhǎng)大豬（6 頭）作為對(duì)照組。豬只的飼養(yǎng)條件及管理方式相似、身體健康無(wú)疾病、營(yíng)養(yǎng)體況基本一致、出欄體質(zhì)量約90.0 kg。宰后從左側(cè)胴體采集背最長(zhǎng)肌及后腿肉混合樣，每份樣品約采集2.0 kg，標(biāo)號(hào)后裝入保鮮袋，保存在0～5 ℃采樣箱中，記錄采樣現(xiàn)場(chǎng)溫度、濕度及衛(wèi)生狀況，送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。

無(wú)水乙醚、二氯甲烷、無(wú)水硫酸鈉（均為分析純） 天津紅巖試劑公司;C6～C30正構(gòu)烷烴、十九烷（均為色譜純） 美國(guó)Sigma公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Visiprep24TM DL固相萃取裝置 美國(guó)Supelco公司;

Laborota 4010旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 德國(guó)Heidolph公司;BS224S電子天平 賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司;Milli-Q Advantage A10超純水組合系統(tǒng) 美國(guó)密理博公司;7890B-5977A氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（gas chromatography-mass spectrometry，GC-MS）儀 美國(guó)Aligent公司。

1.3 方法

1.3.1 固相微萃取

依照GB/T 9695.19—2008《肉與肉制品 取樣方法》[1]取樣。在常溫下將樣品攪碎至肉糜狀，取2 g肉糜置于固相微萃取裝置中，50 ℃保持30 min，萃取吸附30 min進(jìn)樣，進(jìn)樣解吸5 min，處理后加入20 mL頂空瓶中，上機(jī)分析。

1.3.2 GC-MS測(cè)定條件

DB-WAX毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）;升溫程序：60 ℃保持3 min，以4 ℃/min升至200 ℃，再以10 ℃/min升至240 ℃，保持6 min，運(yùn)行時(shí)間45 min，柱溫箱：40 ℃;進(jìn)樣溫度250 ℃;載氣He;載氣流速1 mL/min;離子源溫度230 ℃;四極桿溫度150 ℃。

定性及定量分析：根據(jù)總離子流圖由計(jì)算機(jī)NIST 14和Wiley譜庫(kù)檢索，選擇較大峰進(jìn)行定性;采用峰面積歸一法進(jìn)行定量分析，由軟件自動(dòng)計(jì)算出各組分峰面積與總峰面積比值。

1.4 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)均用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 青海八眉豬及其雜交豬肉揮發(fā)性成分測(cè)定結(jié)果

由表1～2可知，八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八及杜長(zhǎng)大豬肉中分別檢出揮發(fā)性風(fēng)味成分11 類(lèi)、60 種，9 類(lèi)、44 種，9 類(lèi)、38 種，7 類(lèi)、35 種。八眉原種豬肉較其他3 種豬肉多檢出呋喃類(lèi)化合物1 種，較二元長(zhǎng)八和杜長(zhǎng)大豬肉多檢出醚類(lèi)物質(zhì)1 種，較三元約長(zhǎng)八和杜長(zhǎng)大豬肉多檢出胺類(lèi)物質(zhì)3 種，較杜長(zhǎng)大豬肉多檢出酚類(lèi)物質(zhì)2 種。從揮發(fā)性風(fēng)味成分總量上看，八眉原種豬肉最高，占比為77.947%，其次為二元長(zhǎng)大豬肉（69.749%），再次為三元約長(zhǎng)八豬肉（67.774%）和杜長(zhǎng)大豬肉（60.840%）。據(jù)報(bào)道，脂肪氧化產(chǎn)物中的小分子醛、酮、羧酸等含羰基化合物及其與氨基酸、肽、蛋白質(zhì)等含氨基化合物進(jìn)行Mallard反應(yīng)的產(chǎn)物具有較強(qiáng)揮發(fā)性，可產(chǎn)生不同種類(lèi)肉的特征風(fēng)味[2-4]。當(dāng)揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)含量較為豐富且種類(lèi)較多時(shí)，羊肉風(fēng)味更加飽滿[5]。八眉原種豬肉中風(fēng)味物質(zhì)較二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八和杜長(zhǎng)大豬豐富;從檢出各組分來(lái)看，醛類(lèi)、烴類(lèi)、酸類(lèi)含量較高，其次為醇類(lèi)、酮類(lèi)和其他類(lèi)化合物，酯類(lèi)、胺類(lèi)、酚類(lèi)、醚類(lèi)、呋喃類(lèi)化合物含量較少。

2.2 不同種類(lèi)風(fēng)味化合物的比較分析

2.2.1 醛類(lèi)化合物

八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八及杜長(zhǎng)大豬肉中檢出醛類(lèi)化合物種類(lèi)和相對(duì)含量分別為8 種、17.161%，9 種、16.877%，6 種、12.778%和7 種、15.205%。研究表明，不同品種豬肉的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)成分和種類(lèi)不盡相同。肉中揮發(fā)性風(fēng)味產(chǎn)物或風(fēng)味前體物質(zhì)，如醛、酮、呋喃等與脂類(lèi)降解產(chǎn)物[6-7]、含硫氨基酸降解產(chǎn)物共同作用產(chǎn)生復(fù)雜的風(fēng)味組合[8]。本研究中雖然醛類(lèi)物質(zhì)相對(duì)含量?jī)H次于烴類(lèi)，但脂肪族直鏈烴類(lèi)對(duì)肉類(lèi)風(fēng)味的貢獻(xiàn)通常不大，4 組豬肉的揮發(fā)性風(fēng)味化合物差異主要體現(xiàn)在醛類(lèi)物質(zhì)上[9]，醛類(lèi)物質(zhì)作為脂類(lèi)氧化的主要揮發(fā)性成分[10-12]，

由于其可能含有某種特征香味物質(zhì)[13-14]，具有脂肪香味且閾值較低，為肉香味的主要成分，與許多物質(zhì)疊加的風(fēng)味效應(yīng)較強(qiáng)，因此對(duì)產(chǎn)品風(fēng)味貢獻(xiàn)較大[15]。壬醛來(lái)源于油酸氧化，呈清香氣味，被認(rèn)為是重要的肉味化合物之一[16-17]，相對(duì)含量高于其他醛類(lèi)化合物，對(duì)肉香味貢獻(xiàn)較大;癸醛具有甜香和柑橘香[18]，八眉原種、二元長(zhǎng)八和三元約長(zhǎng)八豬肉中相對(duì)含量分別為杜長(zhǎng)大豬肉的5.02、4.90、3.50 倍;壬醛、癸醛對(duì)豬肉的整體風(fēng)味具有重要貢獻(xiàn)，這和潘見(jiàn)等[19]的研究結(jié)果基本一致。具有芳香味的十六醛在八眉原種、二元長(zhǎng)八和三元約長(zhǎng)八豬肉中的相對(duì)含量分別為1.452%、1.691%、1.212%，而具有油脂香的2，4-癸二烯醛在八眉原種、二元長(zhǎng)八和三元約長(zhǎng)八豬肉中的相對(duì)含量分別為0.438%、0.506%、0.158%，但二者均未在杜長(zhǎng)大豬肉中檢出;二元長(zhǎng)八豬肉中的長(zhǎng)鏈飽和醛十二醛（皂香、柑橘香）、十四醛（脂肪香）、十六醛（花和蠟的弱香氣）均具有特殊的芳香氣味[20]，對(duì)肉的特征香味具有重要作用，由此推測(cè)，壬醛、癸醛、十六醛和2，4-癸二烯醛、十二醛、十四醛、十六醛等物質(zhì)相互協(xié)同作用是造成八眉豬及其雜交豬肉較杜長(zhǎng)大肉質(zhì)風(fēng)味濃郁的主要原因之一。

2.2.2 醇類(lèi)化合物

八眉原種豬肉檢出醇類(lèi)化合物7 種，其他3 組均為3 種，相對(duì)含量分別為八眉原種6.415%、二元長(zhǎng)八4.976%、三元約長(zhǎng)八3.195%、杜長(zhǎng)大1.044%，分別為杜長(zhǎng)大豬肉的6.14、4.75、3.06 倍。醇類(lèi)化合物對(duì)肉品風(fēng)味形成的影響雖不如醛類(lèi)顯著，但與醛類(lèi)物質(zhì)疊加，對(duì)肉品風(fēng)味有突出貢獻(xiàn)[19-20]。一般來(lái)說(shuō)，飽和醇類(lèi)的感覺(jué)閾值很高，除非含量較高，否則對(duì)樣品風(fēng)味形成貢獻(xiàn)不大[21]。八眉原種及其雜交豬肉檢出的醇類(lèi)化合物中，具有濃郁油脂香味、橘柑和玫瑰香味的1-辛醇相對(duì)含量依次增加，但杜長(zhǎng)大豬肉中未檢出。具有清淡油脂香味的2-庚醇和2-戊醇僅在八眉原種豬肉中檢出，具有蘑菇香、青香、蔬菜香及油膩氣息的1-辛烯-3-醇僅在二元長(zhǎng)八豬肉中檢出，由于1-辛烯-3-醇是亞油酸自動(dòng)氧化的產(chǎn)物[22]，對(duì)二元長(zhǎng)八豬肉風(fēng)味形成有重要貢獻(xiàn)。

2.2.3 烴類(lèi)化合物

烴類(lèi)化合物是美拉德反應(yīng)和脂質(zhì)降解的產(chǎn)物[23]，主要來(lái)源于肉中脂肪酸烷氧自由基的均裂。通常烷烴的閾值較高，因此其對(duì)食品整體風(fēng)味的貢獻(xiàn)很小[24-26]。八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八及杜長(zhǎng)大豬肉中烴類(lèi)化合物分別檢出13（21.136%）、17（22.889%）、12（17.257%）、15 種（14.189%），各組烴類(lèi)化合物種類(lèi)最多、相對(duì)含量最高，并以烷烴和芳香烴為主，雖然對(duì)肉風(fēng)味貢獻(xiàn)較小，但有些可能是形成雜環(huán)化合物的重要中間體，其中有香味的烴為脂質(zhì)熱降解產(chǎn)生，也可在烷基自由基的脂質(zhì)氧化或類(lèi)胡蘿卜素的分解中生成[27]，對(duì)肉的香味起到加和作用[28]，因此有助于提高肉的整體風(fēng)味質(zhì)量[29]。

2.2.4 酮類(lèi)化合物

八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八及杜長(zhǎng)大豬肉中分別檢出酮類(lèi)化合物6、3、3、1 種，二元長(zhǎng)八豬肉中相對(duì)含量最高，為7.039%，其次為八眉原種（6.428%）、三元約長(zhǎng)八（3.039%）及杜長(zhǎng)大豬肉（0.124%）;酮類(lèi)物質(zhì)一般由美拉德反應(yīng)生成，此外，也可由醇類(lèi)氧化、酯類(lèi)分解得

到[30]，由多不飽和脂肪酸氧化或降解、氨基酸降解或微生物氧化產(chǎn)生。其閾值遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其同分異構(gòu)體的醛類(lèi)[31-32]，對(duì)豬肉氣味貢獻(xiàn)相對(duì)較小。但不同風(fēng)味的差異主要來(lái)自羰基化合物的定性及定量差異，在肉品整體香氣形成中起著協(xié)調(diào)作用，因此酮類(lèi)化合物對(duì)肉風(fēng)味的形成仍有一定影響[33]。八眉原種豬肉中檢出3，5-二（1，1-甲基乙基）-3，5-環(huán)己二烯-1，2-二酮，二元長(zhǎng)八豬肉中檢出2，6-二（1，1-甲基乙基）-2，5-環(huán)己二烯-1，4-二酮，均呈乳香、微甜氣味、黃油香味[34]，對(duì)風(fēng)味物質(zhì)具有增強(qiáng)作用。

2.2.5 酸類(lèi)化合物

酸類(lèi)化合物來(lái)自于油脂中不飽和脂肪酸及飽和脂肪酸的降解和氧化作用，由對(duì)應(yīng)的醛類(lèi)物質(zhì)經(jīng)氧化、還原形成[35]，可產(chǎn)生大量羰基化合物，有助于形成肉的特征風(fēng)味，特別是具有月桂油香氣的十二烷酸、具有微弱蠟豬香和乳香的十四碳酸以及具有脂肪氧化風(fēng)味的辛酸和癸酸等對(duì)肉香味均有一定貢獻(xiàn)。八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八及杜長(zhǎng)大豬肉中酸類(lèi)化合物種類(lèi)和相對(duì)含量分別為12 種、10.793%，6 種、9.962%，5 種、15.088%，4 種、25.870%。雖然杜長(zhǎng)大豬肉中酸類(lèi)物質(zhì)種類(lèi)較少，僅為4 種，但相對(duì)含量為八眉原種豬及其雜交豬肉的1.71～2.60 倍，但對(duì)風(fēng)味物質(zhì)有貢獻(xiàn)的十二烷酸、十四碳酸、辛酸和癸酸等均未檢出，其他3 組均有不同程度地檢出，說(shuō)明八眉原種豬及其雜交豬較杜長(zhǎng)大相比有利于肉特征風(fēng)味的形成。

2.2.6 酯類(lèi)、酚類(lèi)、醚類(lèi)等其他化合物

酯類(lèi)化合物由脂肪氧化產(chǎn)生的醇類(lèi)和游離脂肪酸發(fā)生酯合成得到，大多賦予肉品類(lèi)似水果的甜味，除內(nèi)脂、硫酯外，大多數(shù)酯類(lèi)閾值較高、揮發(fā)性較小，對(duì)肉品風(fēng)味貢獻(xiàn)很小[36]。酯類(lèi)化合物中主要是丙位十二內(nèi)酯和丁位十四內(nèi)酯等內(nèi)酯化合物對(duì)風(fēng)味起一定作用，但本研究中2 種物質(zhì)均未檢出，因此各酯類(lèi)物質(zhì)對(duì)豬肉風(fēng)味影響不大。八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八豬肉中分別檢出酚類(lèi)物質(zhì)2、2、1 種，且以苯酚為主，杜長(zhǎng)大豬肉中未檢出。苯酚類(lèi)化合物呈甜香氣味，可作為八眉原種豬及其雜交豬風(fēng)味物質(zhì)形成因素之一。呋喃類(lèi)化合物也具有較高閾值，對(duì)肉制品風(fēng)味貢獻(xiàn)不大。

3 結(jié) 論

采用頂空固相微萃取-GC-MS對(duì)八眉原種豬、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八及杜長(zhǎng)大豬肉的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，結(jié)果表明，八眉原種豬肉中風(fēng)味物質(zhì)種類(lèi)和含量較二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八和杜長(zhǎng)大豬肉豐富，雖然對(duì)肉類(lèi)風(fēng)味貢獻(xiàn)較小的烴類(lèi)化合物種類(lèi)和含量居各組首位，但揮發(fā)性風(fēng)味化合物差異主要體現(xiàn)在醛類(lèi)物質(zhì)。八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八豬肉中壬醛（清香氣味）、癸醛（甜香和柑橘香）、2，4-癸二烯醛（油脂香）、十二醛（皂香、柑橘香）、十四醛（脂肪香）、十六醛（花和蠟的弱香氣）等醛類(lèi)物質(zhì)較杜長(zhǎng)大豬肉豐富。1-辛醇（油脂香味、橘柑和玫瑰香味）、1-辛烯-3-醇（蘑菇香、青香、蔬菜香）、2-庚醇（淡芳香、脂肪香）等醇類(lèi)物質(zhì)分別在八眉原種、二元長(zhǎng)八、三元約長(zhǎng)八豬肉中有不同程度檢出，3 組豬肉的醇類(lèi)物質(zhì)種類(lèi)及含量也高于杜長(zhǎng)大豬肉。醇類(lèi)與醛類(lèi)物質(zhì)疊加，對(duì)肉整體風(fēng)味的形成具有突出貢獻(xiàn)。雖然酮類(lèi)、酸類(lèi)、酚類(lèi)化合物對(duì)肉氣味貢獻(xiàn)相對(duì)較小，但八眉原種和二元長(zhǎng)八豬肉中檢出二酮化合物，呈現(xiàn)乳香、微甜氣味、黃油香味，十二烷酸（月桂油香）、十四碳酸（微弱的蠟香和乳香）及苯酚類(lèi)（甜香）化合物對(duì)豬肉風(fēng)味均有不同程度的修飾作用，使八眉原種豬及其雜交豬肉形成獨(dú)特風(fēng)味，與杜長(zhǎng)大豬相比肉質(zhì)細(xì)膩、味道鮮美、風(fēng)味醇香濃郁、肉品質(zhì)量上乘。

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