蔬菜水果中多菌靈等4 種苯并咪唑類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定

多菌靈等4 種苯并咪唑類農(nóng)藥因?yàn)榭梢杂行Х乐斡烧婢鸬亩喾N作物病害，所以在我國(guó)使用比較廣泛，但是其殘留能夠引起肝病和染色體的畸變，對(duì)人體有一定的毒害。為了保證人民的身體健康，有效控制多菌靈等4 種苯并咪唑類農(nóng)藥的使用及對(duì)其殘留量進(jìn)行有效監(jiān)控，促進(jìn)農(nóng)業(yè)投入品的科學(xué)性和產(chǎn)品的安全性，筆者用高效液相色譜儀對(duì)其進(jìn)行了測(cè)定，該方法前處理操作簡(jiǎn)單，響應(yīng)值高，特別適用于分析背景干擾嚴(yán)重、定性困難、被檢測(cè)化合物含量很低的樣品，縮短了樣品分析和進(jìn)樣的時(shí)間，大大提高了檢測(cè)效率。

一、材料與設(shè)備

（一）主要試劑與儀器設(shè)備

乙腈、二氯甲烷、甲醇、超純水，以上試劑均為色譜級(jí)；氯化鈉（140 ℃烘烤4 h）；液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有電噴霧離子源（ESI）；離心機(jī)、氮吹儀、混勻器、1%天平、勻漿機(jī)、粉碎機(jī)等。

（二）農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品

多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2—氨基苯并咪唑，純度≥98%（以上標(biāo)液均購(gòu)買于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研所）。

二、測(cè)定步驟

（一）樣品制備

按照NY/T 789—2001 要求抽取水果樣品，取可食部分，用濾紙擦去表面泥土，切碎后，用對(duì)角線法充分混勻，用四分法縮份，縮份后將樣品放入粉碎機(jī)中粉碎，制成待測(cè)樣品備用，密封并標(biāo)識(shí)。

（二）樣品前處理

準(zhǔn)確稱取帶測(cè)樣20.0 g 放入離心管中，準(zhǔn)確加入40.0 mL 乙腈，15 000 r/min 高速勻漿1 min，加入5.0 g氯化鈉，在高速勻漿提取1 min，放入離心機(jī)里2500 r/min 離心5 min，靜置25 min，使乙腈相和水相分層。

（三）凈化

從離心管中準(zhǔn)確吸取10.00 mL 上層液，放入15 mL 的刻度離心管中，然后放入水浴加氮吹儀上70 ℃蒸發(fā)近干，加入2 mL 的甲醇+二氯甲烷（5+95）溶解殘?jiān)w上鋁箔紙，待用。將氨基柱用5.0 mL 的甲醇+二氯甲烷（5+95）預(yù)洗，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附表面時(shí)，立即倒入上述凈化溶液，用15 mL 刻度離心管收集洗脫液，用5.0 mL 甲醇+二氯甲烷（5+95）沖洗燒杯后淋洗氨基柱，并重復(fù)1 次。將淋洗液放置水浴加氮吹儀上35 ℃蒸發(fā)近干，用甲醇+水（1+1）準(zhǔn)確定容至5.0 mL，在混勻器上混勻，用0.2 um 濾膜過(guò)濾，放入2 mL 自動(dòng)進(jìn)樣瓶中，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定分析。

（四）色譜條件

色譜柱C18，75 mm×2.0 mm，柱溫40 ℃；掃描方式為MRM；氣簾氣CUR 為30 psi，碰撞氣CAD 為Medium，IS 電壓為5500V，離子源溫度為5500 ℃，霧化氣GAS1 為55 psi，輔助氣GAS2 為60 psi，進(jìn)樣量為1 ul。溶劑梯度與流速見(jiàn)表1。監(jiān)測(cè)離子對(duì)、碰撞器電壓、去簇電壓見(jiàn)表2。

表1 溶劑梯度流速時(shí)間

表2 監(jiān)測(cè)離子對(duì)、保留時(shí)間、碰撞器電壓、去簇電壓

三、數(shù)據(jù)結(jié)果分析

（一）工作標(biāo)準(zhǔn)曲線

將多菌靈、噻菌靈、甲基硫菌靈、2-氨基苯并咪唑的標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇+水（50+50）蘋(píng)果空白基質(zhì)分別配成0.01～0.2 mg/L 的濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照液相串聯(lián)質(zhì)譜儀器條件進(jìn)行測(cè)定，多菌靈等4 種苯并咪唑類農(nóng)藥在一定的質(zhì)量濃度范圍非均與峰面積成良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r=0.999 3～0.999 7，有很強(qiáng)的相關(guān)性。多菌靈等4 種苯并咪唑類農(nóng)藥定量離子（見(jiàn)下頁(yè)圖1 至圖4）。

（二）加標(biāo)回收率及計(jì)算公式

在蔬菜水果樣品中進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，多菌靈等4種苯并咪唑類的添加量分別為0.01 mg/kg、0.1 mg/kg、0.2 mg/kg，每個(gè)添加濃度5 個(gè)重復(fù)，均可以取得較好的結(jié)果，回收率在87.0%～106%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.62%～8.7%，滿足檢測(cè)要求。

式中，V1—分取試液體積，單位為毫升（mL）；V2—上機(jī)液定容體積，單位為毫升（mL）；V0—標(biāo)液上機(jī)體積，單位為毫升（mL）；V3—試樣上機(jī)體積，單位為毫升（mL）；V—定容體積，單位為毫升（mL）；m—樣品質(zhì)量，單位為克（g）；Ar—樣品中被測(cè)農(nóng)藥的峰面積；A0—農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測(cè)農(nóng)藥的峰面積。

四、結(jié)論

由于液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀器靈敏度高，樣品前處理簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性好，靈敏度高，可以通過(guò)稀釋的方法解決復(fù)雜基質(zhì)的基質(zhì)效應(yīng)問(wèn)題，因此，可以作為檢測(cè)蔬菜水果中多菌靈等4 種苯并咪唑類殘留量的方法。