氣相色譜法測定蘋果中的有機磷

陳懇

摘 要：通過實驗，建立了測定蘋果中敵敵畏、三唑磷、樂果等8種有機磷的氣相色譜法。蘋果樣品用乙腈提取，水浴旋蒸至近干，用丙酮溶解，氣相色譜火焰光度檢測器（GC-FPD）檢測，外標法定量。在0.01～0.15 mg/kg的添加水平，8種農藥的回收率在81.8%～118.3%，相對標準偏差在1.4%～9.8%，依據標準NY/T 761-2008，該方法的檢出限為0.01～0.05 mg/kg。該方法的靈敏度、準確度和精密度均符合農藥殘留測定的要求，可以對蘋果中這8種有機磷農藥的殘留量進行有效監控。

關鍵詞：氣相色譜法;蘋果;有機磷

1 食品安全現狀

民以食為天，食品質量是決定人生存質量最重要的因素之一。歷史上曾發生多次令人震驚的食品污染事件，如日本鎘米引起的“痛痛病”事件，多氯聯苯污染造成的“米糠油”事件，甲基汞污染魚導致的“水俁病”事件等，都曾對受害人群的生命和健康造成了嚴重的后果。比利時肉雞中二噁英污染事件的發生再次引起人們對食品污染問題的關注。我國人口眾多，人均可耕地面積0.08 hm2，為世界人均的1/3。改革開放以來，中國人經過自己的努力，用全球7%的耕地養活了世界22%的人口，取得了舉世矚目的巨大成就。在基本解決了溫飽問題之后，人們已經注意食品的質量問題，不但食品的營養成分受到關注，其可能存在的污染更被越來越多的人們所重視[1]。

隨著科技的進步，人們對于食品安全日益看重。在崇明島定位為“世界級生態島”之后，怎樣才能吃得安心，吃得放心，成為了該地區家家戶戶關注的熱點。由于崇明區地理氣候條件適宜，蔬菜水果生產中的病蟲草害較多，再加上部分農民缺乏科學使用農藥的意識，導致生態環境污染問題較為突出[2]，存在為了追求產量而濫用農藥的情況。就如同任何事物都有兩面性一樣，農藥的發明和使用無疑大大提高了農作物的產量，但隨著農藥的大量和不合理使用，食品中的農藥殘留對人類健康造成的負面影響也日益顯露[3-4]。因此，農藥殘留檢測就成了監管方識別水果蔬菜安全與否的有利依據。其中，氣相色譜法是農藥殘留檢測不可或缺的重要方法之一。

2 實驗部分

2.1 儀器和試劑

安捷倫7890B氣相色譜儀，自動進樣器7693，附FPD檢測器（美國Agilent公司）;HP-5色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm，美國Agilent公司）;分析天平（MTTTLER TOLEDO MS205DU）;英國Parker Domnick Hunter高純氫氣發生器（UHP-35ZA-S）;美國JUN-AIR靜音空壓機（OF302-4M）;真空泵（瑞士步琦有限公司，R-100）;旋轉蒸發器（瑞士步琦有限公司，R-100）;水浴鍋（瑞士步琦有限公司，R-100）;移液槍（1～10 μL，100～1000 μL，芬蘭Thermo公司），各種玻璃儀器若干。

有機磷農藥標準品詳細信息如表1。

2.2 色譜條件

HP-5石英毛細管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）;載氣（N2，純度≥99.999%），氫氣流速75 mL/min;空氣流速100 mL/min;柱氣流+尾吹氣為60 mL/min;不分流進樣，進樣量1 μL;進樣口溫度：220 ℃;檢測器溫度280 ℃。程序升溫：60℃150℃（保持2min）270℃（保持12min）。

2.3 分析步驟

標準溶液的配制：分別吸取

100 ?g/mL的敵敵畏、三唑磷標準儲備液1 μL，樂果、毒死蜱（先吸取0.1 mL的毒死蜱標準品（1 000 μg/mL）于棕色小瓶中，加入0.9 mL丙酮，混勻，即可得到100 μg/mL的標準使用液）標準儲備液2 μL，水胺硫磷標準儲備液3 μL，丙溴磷、磷胺標準儲備液4 μL，伏殺硫磷5 μL于10 mL容量瓶中，加丙酮定容，混勻，得到0.01 ?g/mL敵敵畏、三唑磷;0.02 ?g/mL樂果、毒死蜱;0.03 ?g/mL水胺硫磷;0.04 ?g/mL丙溴磷、磷胺;0.05 ?g/mL伏殺硫磷的混合標準溶液。將混標一式三份，將其分別注入氣相色譜儀中測定。得到3條標準曲線，以峰面積的平均值建立校正曲線。

樣品處理：準確稱取25.00 g，加入50.0 mL乙腈，在勻漿機中高速勻漿2 min后，用濾紙過濾，濾液收集到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL比色管中，收集濾液40～50 mL，劇烈震蕩1 min，靜置30 min。從比色管中吸取10.00 mL乙腈，放入梨形瓶中，以80 ℃水浴旋蒸至近干，加入2.0 mL丙酮，將其完全轉移至15 mL刻度離心管，再用約3 mL丙酮分3次沖洗梨形瓶，轉移至離心管，最后定容至5 mL，用0.2 μm濾膜過濾后移入自動進樣器樣品瓶，供色譜測定。

2.4 色譜測定

依據上述色譜條件，分別測定各標準溶液（平行測定3次）、混合標準溶液（平行測定3次）及樣品溶液（2個樣品空白，檢出限加標平行測定6次，3倍檢出限平行測定6次），自動進樣器進樣1 μL，以保留時間定性，外標法定量。

3 結果與討論

3.1 混標溶液色譜圖

依據NY/T 761-2008的標準，進行色譜條件優化，這8種有機磷都得到了很好的分離。混標圖譜見圖1。其中，5.384 min出的峰是敵敵畏，5.923 min出的峰是丙溴磷，11.162 min出的峰是樂果，13.049 min及14.430 min出的峰是磷胺，14.594 min出的峰是毒死蜱，16.519 min出的峰是水胺硫磷，17.979 min出的峰是三唑磷，20.300 min出的峰是伏殺硫磷。

3.2 標準曲線繪制的優化

直接用丙酮配制標準曲線溶液，校正樣品時，發現蘋果中的檢出限加標回收率都在200%左右，整整高出了1倍，查找相關文獻[5-6]后發現，存在“生物富集現象”，即：通過生態系統中食物鏈或食物網的各營養級，使某些污染物，如放射性化學物質和合成農藥等，在生物體內逐步濃集增大。蘋果中也發生了這一現象。

優化措施為：將標準曲線改為隨行標曲，即：將8種有機磷農藥混標加入蘋果基質中同時處理，校正時以3條標準曲線的峰面積的平均值建立校正曲線。3倍檢出限的加標回收率實驗與上述方法一致。

3.3 線性測定結果

按照標準NY/T 761-2008，敵敵畏、三唑磷的檢出限為0.01 mg/kg，樂果、毒死蜱的檢出限為0.02 mg/kg，水胺硫磷的檢出限為0.03 mg/kg，丙溴磷、磷胺的檢出限為0.04 mg/kg，伏殺硫磷的檢出限為0.05 mg/kg。上述8種有機磷農藥的檢出限校正曲線及其相關系數見表2，3倍檢出限的校正曲線及相關系數見表3。

3.4 加標回收率和精密度

檢出限的回收率和3倍檢出限的回收率見表4和表5。

優化方法，富集現象消除，1倍檢出限、3倍檢出限的加標回收均符合回收率要求（60%～120%）。

4 結論

有機磷殺蟲劑的優點可概括為：品種多，藥效高;防治對象多，應用范圍廣;作用方式多，藥害輕;在環境中降解快、殘毒低。由于這些特點，有機磷農藥在殺蟲劑中占據了相當重要的地位，至今仍是世界上生產和使用最多的農藥品種。我國使用有機磷農藥的歷史已有30余年，生產的品種將近40個[7]。

隨著分析技術的發展，有機磷農藥殘留分析方法的靈敏度和簡便性不斷提高，本實驗建立的分析方法簡便快捷，以乙腈為提取液，氣相色譜火焰光度檢測器測定，21 min內8種有機磷農藥完全分開，方法回收率81.8%～118.3%，最低檢出限0.01～0.05 mg/kg，精密度1.4%～9.8%。滿足農藥殘留分析檢測的要求。

參考文獻

[1]仲維科，郝戩，孫梅心，等.我國食品的農藥污染問題[J].農藥，2000（7）：1-4.

[2]張曉笑.上海崇明區蔬菜農藥殘留安全調查研究[J].上海農業科技，2019（3）：31-32，83.

[3]科納徹，梅斯.人體暴露于食品中化學污染物的評估[J].食品添加劑和污染物，1993，10（1）：5-15.

[4]王緒卿，林媛真，陳惠京.稻米中殺蟲雙殘留量測定方法——Ⅱ.氣相色譜法[J].衛生研究，1986（04）：31-34.

[5]郜紅建，蔣新.有機氯農藥在南京市郊蔬菜中的生物富集與質量安全[J].環境科學學報，2005，25（1）：90-93.

[6]南淑清，多克辛，李紅亮，等.兩種有機氯農藥在污水灌溉區蔬菜中的殘留及生物富集[J].中國環境監測，2007（5）：59-62.

[7]華小梅，單正軍.我國農藥的生產，使用狀況及其污染環境因子分析[J].環境科學進展，1996（2）：33-45.