伊媛媛 范翠翠

摘 要:目的:本研究以植物乳桿菌為發酵菌,以不同植物配方發酵得到的6種酵素原液為研究對象。通過抑菌試驗觀察這6種酵素對常見致病菌金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、白色念珠菌的抑菌作用。研究酵素的抑菌作用,對酵素的功效研究有一定的啟發和借鑒價值。
關鍵詞:植物乳桿菌;酵素;抑菌性
植物酵素是以新鮮的蔬菜、水果、糙米、藥食同源中藥等植物為原料,加入酵母菌或乳酸菌等發酵菌株進行發酵而產生的富含糖、有機酸、礦物質、維生素等多種營養成分的混合發酵液,又稱為植物發酵液(plant fermented extract,PFE),具有調節腸道菌群、潤腸通便等作用。植物乳桿菌是乳酸菌的一種,厭氧或者兼性厭氧,桿狀。許多乳酸菌在生長代謝過程中,會產生乳酸、乙酸等有機酸和過氧化氫,此外還能產生多種具有抑菌或殺菌生物活性的細菌素,在抑制多種病原微生物和食物腐敗菌等方面具有重要作用。本文主要研究經過植物乳桿菌發酵得到的酵素是否有抑菌作用[1-2]。
1 材料與設備
1.1 材料
6種植物酵素:桑葚酵素、果蔬膳食纖維酵素、愛醒植物酵素、玫瑰酵素、老姜酵素和五白植物酵素。來自御氏生物技術有限公司。
1.2 供試菌種
大腸桿菌[ATCC25922]、金黃色葡萄球菌[ATCC6538],白色念珠菌[ATCC10231]取自漢臣氏(沈陽)兒童制品有限公司。
1.3 試劑和設備
酵母粉、胰蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、1 mol/L NaOH、1 mol/L HCl、蒸餾水、電子天平、超凈工作臺、移液槍、高壓蒸汽滅菌鍋與恒溫培養箱等。
2 實驗方法
2.1 菌液制備
將分別裝有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌的凍存管在水浴鍋中迅速融化,用移液器吸取適量濃菌液加入液體培養基中,放入培養箱中培養適當時間,備用。
2.2 牛津杯法抑菌實驗
2.2.1 含菌平板制備
稱取酵母粉、胰蛋白胨、氯化鈉與瓊脂粉適量,制成液體培養基,調節pH值至7.1±0.2,高壓滅菌后備用。用生理鹽水梯度稀釋濃菌液,得到106 CFU/mL的菌懸液,備用。將15~20 mL冷卻至46 ℃左右的液體培養基倒入平皿中,待凝固后,加入菌懸液10 μL,均勻涂布。
2.2.2 測定抑菌效果
用鑷子將無菌牛津杯立在涂布有菌液的平皿中,每個平皿中分散放置3個,其中2個牛津杯中加入200 μL樣品,并將第三個牛津杯中加入同體積的無菌培養基作為空白對照。在培養皿上做好標記,置于37 ℃培養箱中培養。培養結束后用游標卡尺測量抑菌圈的直徑,并做好記錄。
3 結果與分析
6種植物酵素對供試菌的抑制效果如表1所示。
由表1可知,6種酵素對白色念珠菌均沒有抑制作用。
其中玫瑰酵素和老姜酵素對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌沒有抑制作用。
6種酵素中有4種酵素對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌有一定的抑菌作用,對大腸桿菌的抑菌作用的強弱為:果蔬膳食纖維酵素>愛醒植物酵素>五百植物酵素>桑葚酵素,對金黃色葡萄球菌抑菌作用的強弱關系為:愛醒植物酵素>果蔬膳食纖維酵素>桑葚酵素>五白植物酵素[3]。
4 結論
酵素在發酵過程中產生的生物活性成分包括有機酸、多肽、寡糖、維生素、氨基酸、礦物元素與抗氧化物等,酵素抑菌作用與其抑菌成分和抑菌機理密切相關[4]。由于原材料、生產工藝和處理方法的不同,試驗結果存在差異。本文通過對酵素抑菌作用進行初步研究,為今后酵素功效相關研究提供了一份參考。
參考文獻
[1]全永亮.泡菜中植物乳桿菌的鑒定及其發酵液抑菌活性研究[J].中國調味品,2017,42(3):64-68.
[2]賀娜,徐田,耿樹香,等.幾種自制植物酵素功能性成分測定及感官評價[J].安徽農業科學,2020,48(1):208-210..
[3]姚沛琳,張凱迪,張新劍,等.一株植物乳桿菌的抑菌物質性質研究及抑菌條件優化[J].赤峰學院學報(自然科學版),2020,36(1):70-73.
[4]呂詩文,葉芳,吳國輝,等.苦瓜抑菌作用的研究進展[J].農產品加工,2020(1):84-86.
作者簡介:伊媛媛(1986—),女,遼寧鐵嶺人,大專。研究方向:微生物檢測。