萬福寶



摘 要:該試驗方法測定茶多酚軟膠囊中茶多酚的含量,運用了準確度、精密度以及回收率等評價性指標,對測定數據的可靠性進行了驗證。吸光值線性關系良好(相關系數R2= 0.9995 ),方法精密度試驗結果相對標準偏差為1.00 %,回收率為95.85%-99.70 %,結果表明福林酚比色法可以用于茶多酚軟膠囊中茶多酚含量的檢測。
關鍵詞:福林酚比色法;茶多酚軟膠囊;茶多酚
1 引言
茶多酚(Tea Phlyphenols)又名茶單寧,是茶葉中含生物活性成分的一類重要化合物。茶多酚是茶葉中特有的天然抗氧化物質,具有清除自由基、抗癌癥突變、輔助治療等多種功效,在食品與藥品領域有著良好的應用與發展前景。[1]茶多酚的主要成分為兒茶素類、花青素類、黃酮以及黃酮醇類和酚酸類等。[2] 以茶多酚作為主要功效成分的產品都需要測定茶多酚含量作為其功效依據。因此,茶多酚的含量測定十分重要。對于茶多酚的測定方法有酒石酸亞鐵顯色法、高錳酸鉀滴定法、重鉻酸鉀法、液相色譜法。對于茶多酚溶于油脂中做成的軟膠囊,相關的研究測定較少。本文選用福林酚比色法對茶多酚軟膠囊進行茶多酚含量測定的分析研究。
2 材料與方法
2.1 實驗儀器與試劑
2.1.1 實驗儀器
紫外分光光度計(PE,Lambda 265);水浴鍋(上海博迅);電子分析天平(梅特勒,XSE-204);
2.1.2 實驗試劑
無水碳酸鈉(分析純、國藥集團化學試劑有限公司);甲醇(色譜純、默克股份有限公司);1 mol/L福林酚試劑(國藥集團化學試劑有限公司);沒食子酸(CATO)。
2.2 實驗方法
2.2.1 供試品溶液的制備
稱取試樣0.2 g左右于10 mL離心試管中,加入70 %甲醇溶液5 ml,立即移入70 ℃水浴中,浸提10 min,浸提后冷卻至室溫,然后進行離心,再將上清液轉至10ml容量瓶,繼續用甲醇水溶液清洗殘渣,將上清液合并定容。吸取溶液1.0mL于100mL容量瓶中,定容。
2.2.2標準溶液的配制
稱取0.04990 g沒食子酸(GA,相對分子質量 )于50 ml容量瓶中溶解并定容,搖勻,配制成沒食子酸標準儲備溶液(991.0μg·mL-1)。
2.2.3 10%的福林酚試劑
準確移取10.0 mL福林酚試劑轉移至100mL容量瓶中,用水定容。
2.2.4 標準曲線配制
準確移取1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL沒食子酸標準溶液(991.0 μg·mL-1)于100 mL容量瓶中,定容搖勻。
準確移取上述標準曲線溶液各1 mL,分別移入10 mL容量瓶中,分別在每個容量瓶中加入5.0 mL10 %福林酚試劑,搖勻,反應5min,再加入4.0 mL 7.5 %的碳酸鈉溶液,定容搖勻。放置1 h,用水做空白,用紫外可見光分光光度計,找到最大吸光值,在765 nm處附近。用Excel進行曲線擬合,得到茶多酚濃度C與吸光度A的線性回歸方程:
y = 0.0091 x + 0.0305? ? ? ? ? ? ? R2 = 0.9995
2.2.5 供試品測定
分別移取制備的7個供試品溶液1.00 mL,分別移入10mL容量瓶中,分別在每個容量瓶中加入5.0 mL10 %福林酚試劑,搖勻,反應5 min,再加入4.0 mL 7.5 %的碳酸鈉溶液,加水定容,搖勻。放置1 h,用10 mm比色管,在765 nm處,測定其吸光度A。測得其相對標準偏差為1.00 %。
2.2.6 加標回收率實驗
分別取陰性樣品9份,每一份取約0.2000 g,每三份分別加入沒食子酸標準品20 mg、30 mg、40 mg,然后按照供試品溶液制備的方法進行處理陰性樣品,制備成相應的溶液。再按照供試品的測定方法,進行陰性樣品的測定。計算其回收率,結果見表3。
3 討論與結論
3.1 采用福林酚比色法,對在油脂基質中測定茶多酚含量,在實驗過程中,分別進行了精密度RSD為1.00 %,同時,在實驗過程中通過測定供品試樣和計算其加標回收率,其范圍在95.85-99.70 %,RSD在0.24-2.21 %。由此表明該方法對于在油脂基質中的茶多酚的測定,在重復性、精密度以及準確度上都體現出較好的結果,表明福林酚比色法能夠滿足油脂基質的茶多酚測定的要求。
參考文獻
[1]張單皓,張曉寒,馮敘橋.茶多酚測定研究進展[J].食品安全質量檢測學報,2018,9(17):4655-4663.
[2]江瀅,沈思婷,夏如楓,樊雪怡,韓偉.茶多酚的化學組成及其含量測定與結構鑒定[J].機電信息,2018(20):1-9.