一例豬流行性腹瀉病毒與豬傳染性胃腸炎病毒混合感染的診斷與思考

張賀敏

[摘 要] 2019年8月初，河南省遂平縣某規模化豬場產房仔豬出現嚴重的腹瀉、嘔吐現象，最終因脫水而死亡。為探究豬群發病原因，對發病嚴重豬群進行臨床解剖，結合分子生物學診斷技術，最終確診為豬流行性腹瀉病毒和豬傳染性胃腸炎病毒混合感染所致。經過緊急疫苗接種、實施其他防控措施，2周后疫情得到有效控制，仔豬腹瀉情況不再發生。

[關鍵詞] 仔豬腹瀉;豬流行性腹瀉病毒;豬傳染性胃腸炎病毒;混合感染

[中圖分類號] S858.28 [文獻標識碼] B [文章編號]1674-7909（2020）06--2

在生豬養殖過程中，仔豬腹瀉是比較常見的臨床疾病，嚴重時導致患畜因脫水或心力衰竭而死亡，給豬場造成巨大的經濟損失。引發仔豬腹瀉的病原較多，包括細菌、寄生蟲和病毒，其中導致仔豬腹瀉的腸道病毒有豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬輪狀病毒（PoRV）和豬德塔冠狀病毒（PDCoV）等，這些病毒感染仔豬所引發的臨床癥狀及病理變化類似，依靠傳統的臨床診斷鑒別較為困難[1]。此外，在某些疫情復雜的豬場，不同腹瀉病毒混合感染的現象較為常見，這使得準確診斷疫病的難度更大[2，3]。筆者曾經對一例仔豬PEDV和TGEV混合感染案例進行診斷，下面將其診斷過程進行詳細闡述。

1 發病情況

河南省遂平縣某規模化豬場飼養繁殖母豬200余頭，采取自繁自養模式，主要對外銷售育肥豬和保育豬。2019年8月初，該豬場10日齡內少量新生仔豬出現腹瀉，同時母豬有輕微腹瀉。豬場飼養員在飼料中添加適量氟苯尼考與阿莫西林對母豬進行拌喂，同時對仔豬灌喂抗生素，但情況未見好轉。截至8月中旬，已經有800多頭仔豬發病，300余頭仔豬因腹瀉死亡，死亡率接近40%。

2 臨床癥狀

觀察發病豬群臨床癥狀，發現發病仔豬腹瀉嚴重，其糞便顏色為黃綠色，性狀為水樣狀，甚至部分發病嚴重仔豬呈噴射狀腹瀉。發病豬群整體消瘦、精神反應遲鈍，其中仔豬腹瀉情況隨日齡越低而發病越嚴重;部分母豬精神沉郁，采食量下降，但未發現母豬死亡現象。

3 病理變化

對發病嚴重仔豬進行解剖，主要病理癥狀集中表現在腸道部位，其腸系膜淋巴結腫大，腸道表面出血，且腸壁變薄，腸道內有未消化的凝乳塊物質，且其含有較重的腥臭味。

根據病豬的臨床表現、病理變化及豬場用藥情況，我們初步判定該病的發生可能由豬腸道腹瀉病毒感染所致。但由哪一種病毒感染引起尚不清楚，需實驗室診斷確定。

4 實驗室診斷

4.1 細菌檢測

無菌采集病豬淋巴結、肺臟、肝臟和腸道內容物，將其勻漿后，取適量上清接種于鮮血瓊脂培養基，將培養基置于37 ℃無菌培養箱內培養36 h，其后觀察培養基表面是否存在菌落，并對菌株種類進行鑒定。結果顯示，培養36 h培養基表面均未觀察到菌落生長情況，同時染色鏡檢未檢測到細菌存在。

4.2 病毒檢測

無菌取3頭發病仔豬的適量病變明顯的小腸組織樣品，將組織樣品勻漿后，低溫（4 ℃）高速（1.3萬r/min）離心15 min，取上清采用Trizol法提取組織RNA，按照說明書將RNA反轉錄為cDNA，以cDNA樣品為模板，采用RT-PCR法檢測PEDV、TGEV、PoRV和PDCoV病原是否存在，然后對PCR產物進行凝膠電泳觀察條帶。檢測結果顯示，3份樣品均被檢測出PEDV和TGEV陽性，PoRV和PDCoV均為陰性，提示豬群腹瀉是PEDV和TGEV混合感染所致。

5 防控措施

5.1 提高飼養管理水平

通過對發病豬群進行臨床癥狀及實驗室技術檢測，最終確診為PEDV和TGEV混合感染所致，降低仔豬發病率和死亡率主要依靠提高豬群飼養管理水平。一是將腹瀉豬和健康豬隔離飼養，使腹瀉豬群獲得含有PED和TGE母源抗體的初乳，提高豬群抵抗病毒腹瀉的能力;二是在仔豬飲水中添加多維和適量食鹽，防止發病豬群因過度腹瀉脫水死亡;三是將豬舍內溫度提高，防止仔豬因寒冷扎堆，同時降低豬舍內濕度[4]。

5.2 開展消毒工作

對發病豬群進行隔離，對其所在欄舍進行消毒，可使用高壓水槍對欄舍進行沖洗，同時進行熏蒸消毒，同時在走道兩邊鋪適量濃度的石灰乳;對發病豬群排出的糞污進行及時清除與無害化處理，以切斷病原的傳播途徑;做好飼養人員的培訓工作，專人負責腹瀉豬群的飼養管理工作，不能讓飼養員在不同欄舍之間穿梭。

5.3 緊急疫苗接種與用藥

對全群母豬免疫接種豬流行性腹瀉和豬傳染性胃腸炎二聯疫苗（ZJ08和HB08豬）免疫接種（2頭份/頭），仔豬肌肉注射1頭份/頭;為了防止發病仔豬繼發感染其他疫病，在仔豬飼料中添加適量阿莫西林和電解多維等，連續用藥5 d后停藥。

嚴格執行以上防治措施后，2周后回訪，該豬場疫情得到有效控制，豬場仔豬發病率明顯下降，無大規模仔豬死亡情況發生。

6 討論

PEDV感染豬只后，主要在小腸黏膜上皮細胞中進行復制，受到侵染的小腸上皮細胞正常的結構被破壞，腸壁細胞發生死亡，腸絨毛脫落，從而腸壁變薄，腸道的表面積減少，使小腸消化吸收功能降低;另外，腸黏膜上皮細胞內的雙糖酶、氨基肽酶等活性降低或者缺乏，因而導致腸腔小分子物質得不到進一步分解、吸收，使腸腔內的膠體滲透壓升高，又因ATP酶活性降低或者缺乏，腸上皮細胞內鈉泵失活，晶體滲透壓也升高，從而引發仔豬滲透性腹瀉，嚴重時脫水甚至死亡。

在仔豬生長過程中發生腹瀉十分常見，導致仔豬腹瀉的病因較多，其中病毒感染是常見的原因，很多腸道病毒均可以導致仔豬腹瀉，而且其臨床及病理變化相似，導致傳統的臨床與病理診斷已經無法滿足對病原精確診斷的要求。本次接診的案例中仔豬腹瀉是由PEDV和TGEV混合感染所致，PEDV和TGEV均可導致仔豬腹瀉，而且其發病癥狀一致，如果沒有豐富的臨床經驗很容易誤診或漏診，延誤疫病的治療。本次研究通過分子診斷技術最終確定為PEDV和TGEV混合感染，對豬群進行緊急免疫接種疫苗及提高飼養管理水平后疫情得到有效控制。故而，當豬場發生疫情后，應及時將病料樣品送往專業檢測機構進行病原檢測，根據檢測結果實施相應的防控措施，以減少經濟損失。

參考文獻

[1]張利衛，曹貝貝，李炳曉，等.新發豬Delta冠狀病毒和豬流行性腹瀉病毒SYBR Green I雙重熒光RT—PCR檢測方法的建立及應用[J].中國獸醫學報，2018（4）：618-624.

[2]滑翔，胡中凱，黃小波，等.檢測豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬輪狀病毒的cDNA芯片的構建[J].畜牧獸醫學報，2015（12）：2235-2242.

[3]陳志雄，王洪海，張峰.規模豬場哺乳仔豬混合感染PEDV和PDCoV暴發腹瀉的綜合防控[J].中國豬業，2019（5）：85-88.

[4]馬壽福.仔豬流行性腹瀉病的診斷與防治措施[J].國外畜牧學（豬與禽），2019（8）：19-20.