土壤埋藏對(duì)常見(jiàn)彩繪文物蛋白膠料形貌和結(jié)構(gòu)的影響

馬珍珍 王麗琴 張亞旭 由蕊 郭芷彤 楊璐

摘要利用掃描電子顯微鏡（SEM）、X射線衍射法（XRD）和紅外光譜法（FTIR）對(duì)豬皮膠、全蛋、蛋清、蛋黃、牛奶5種常見(jiàn)彩繪文物蛋白膠料老化前后的形貌、結(jié)晶度、紅外光譜吸收特征和蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)含量進(jìn)行了對(duì)比研究。結(jié)果表明，5種膠料老化后，表面規(guī)則的結(jié)構(gòu)和紋理遭到破壞，整體變得松散;結(jié)晶度降低，尤以牛奶最顯著;老化后，5種蛋白膠酰胺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ帶紅外吸收的階梯狀特征仍然明顯，但螺旋結(jié)構(gòu)已經(jīng)解離，且均呈現(xiàn)α螺旋含量降低、β折疊和無(wú)規(guī)則卷曲含量增高的趨勢(shì)，說(shuō)明分子結(jié)構(gòu)從有序趨于無(wú)序狀態(tài)。

關(guān)鍵詞形貌; 結(jié)構(gòu); 蛋白膠料; 土壤埋藏老化; 彩繪文物

1引 言

蛋白類物質(zhì)來(lái)源廣， 易獲得，是古代彩繪文物最常見(jiàn)的膠料[1，2]，作為顏料的分散和固定劑，也是彩繪文物色彩穩(wěn)定存在的關(guān)鍵物質(zhì)[3]。我國(guó)擁有大量珍貴的考古出土彩繪文物，土壤埋藏降解是其出土前的主要老化形式，會(huì)改變蛋白膠料的形貌和結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致彩繪顏料層出現(xiàn)粉化、脫落等病害[4]，降低文物的藝術(shù)價(jià)值，早期秦兵馬俑彩繪脫落就是一個(gè)典型的例子。由于蛋白膠料形貌和結(jié)構(gòu)的改變，極大影響了蛋白膠料鑒定的準(zhǔn)確性和保護(hù)材料的選擇，成為制約彩繪文物有效保護(hù)的瓶頸問(wèn)題之一。按照“不改變文物原貌”的文物保護(hù)基本原則，要求盡可能使用原有材料進(jìn)行保護(hù)。因此，蛋白膠料的準(zhǔn)確鑒定是正確選擇保護(hù)材料和實(shí)施保護(hù)的前提和基礎(chǔ)，對(duì)彩繪文物保護(hù)具有重要指導(dǎo)意義。

掃描電子顯微鏡（SEM）、紅外光譜法（FTIR）和X射線衍射法（XRD）等技術(shù)是常用的材料表征手段[5，6]，近年來(lái)已用于有機(jī)質(zhì)文物形貌觀察、結(jié)構(gòu)分析及文物保護(hù)中。例如，利用SEM觀察絲織品圖案金屬化過(guò)程中Ag的沉積[7]，并用于評(píng)估不同方法對(duì)紙張中老化動(dòng)物膠的清理效果[8]。Sotiropoulou等[9]利用FTIR研究希臘史前時(shí)期、羅馬時(shí)期墓葬壁畫(huà)材質(zhì)成分，獲取了彩繪層蛋白膠料的紅外吸收光譜特征信息; 絲綢室內(nèi)自然老化和人工紫外老化的研究表明，絲綢蛋白無(wú)定形區(qū)發(fā)生氧化、二級(jí)結(jié)構(gòu)變化使得晶體結(jié)構(gòu)規(guī)則度降低[10]。XRD作為獲取生物大分子結(jié)構(gòu)的主要技術(shù)之一[11]，也用于文物加固材料性能的表征，Hao等[12]指出，老化絲織品經(jīng)加固后，結(jié)晶度提高、微缺陷被修復(fù)，結(jié)構(gòu)排列逐步規(guī)則化。本研究以中國(guó)古代彩繪文物最常見(jiàn)膠料豬皮膠、蛋類和牛奶[13]為研究對(duì)象，利用上述方法探討了膠料在土壤埋藏老化前后的形貌、結(jié)晶度、FTIR吸收特征及二級(jí)結(jié)構(gòu)的變化，為文物蛋白膠料的準(zhǔn)確鑒定和保護(hù)修復(fù)材料的選擇奠定了科學(xué)基礎(chǔ)。

2實(shí)驗(yàn)部分

2.1儀器、試劑與材料

VEGA3XM鎢燈絲型掃描電子顯微鏡（捷克泰斯肯公司）; Smart LAB型X射線衍射儀（日本理學(xué)株式會(huì)社）; Bruker Tensor 27型FTIR光譜儀（德國(guó)布魯克公司）; PP20E手動(dòng)電動(dòng)一體式壓片機(jī)（天津瑞岸科技有限公司）; MasterS HitechSciencetool實(shí)驗(yàn)室超純水系統(tǒng)（上海和泰儀器有限公司）。

氨水（色譜純，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所）; KBr粉末（光譜純，天津天光光學(xué)儀器有限公司）; 乙醇（分析純，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司）; 鐵粉（分析純，天津市東麗區(qū)天大化學(xué)試劑廠）; 蛋白膠料：市售全蛋、蛋清和蛋黃（機(jī)械分離全蛋獲得），銀橋全脂牛奶，豬皮膠依據(jù)《齊民要術(shù)》所述傳統(tǒng)制膠技術(shù)由市售新鮮豬皮熬制[14]。

2.2蛋白膠樣的制備及樣品前處理

2.2.1新鮮蛋白樣品的制備稱取不同質(zhì)量的豬皮膠（含蛋白85%）、全蛋（含蛋白12.8%）、蛋清（含蛋白11.5%）、蛋黃（含蛋白17.5%）和牛奶（含蛋白3%），使其均含有0.6 g蛋白。蛋白樣品用超純水溶解后于載玻片上成膜，陰干至水份完全揮發(fā)后，備用。每種膠制備2組，其中一組按照2.2.3節(jié)處理后作為新鮮蛋白樣品，另一組按照2.2.2節(jié)處理后作為老化蛋白樣品。

2.2.2老化蛋白樣品的制備取墓葬底土層土若干（本實(shí)驗(yàn)用土取自陜西韓休唐墓新鮮開(kāi)挖的墓葬土，離地表10 m深），參考文獻(xiàn)[15]的方法進(jìn)行樣品的土壤埋藏，具體如下：經(jīng)分樣篩（孔徑0.2 mm）過(guò)篩后排除大顆粒土塊等雜質(zhì)，于255℃下滅菌處理24 h，加超純水制得含水率12%的滅菌土樣，裝入玻璃罐中。將2.2.1節(jié)制備的另一組膠樣埋入土中，并在上、中、下層分別鋪置10%的鐵粉，將土壓實(shí)、擰緊罐蓋并用蠟密封罐體，遮黑后于5℃存放，使樣品處于缺氧、避光、低溫、密閉的穩(wěn)定環(huán)境中，以模擬彩繪文物在土壤埋藏中的老化狀態(tài)。埋藏一年后，清除膠樣表面的土，按2.2.3節(jié)處理后，制得老化蛋白樣品。

2.2.3樣品前處理分別取1 g土壤埋藏老化前后的豬皮膠、全蛋、蛋清、蛋黃、牛奶膠樣，加入2.5 mol/L氨水溶液2 mL，超聲萃取1.5 h，5000 r/min離心5 min，吸取上清液，以排除土壤中無(wú)機(jī)鹽、顏料等的干擾[13，16]。上述操作重復(fù)兩遍，將上清液烘干，備用。

2.3測(cè)試方法及條件

2.3.1形貌觀察取3×3 mm蛋白膠樣放在粘有導(dǎo)電膠的樣品座上，噴金后置于掃描電子顯微鏡樣品倉(cāng)中，抽真空后觀察蛋白膠樣的顯微形貌。測(cè)試條件：電壓20 kV，工作距離15 mm，使用二次電子探頭。

2.3.2XRD測(cè)試取3～5 mg蛋白膠樣，研磨至粉末后平鋪于單晶硅載物片上并壓平，置于X射線衍射儀試樣倉(cāng)中進(jìn)行測(cè)試。測(cè)試條件：銅靶，管電壓40 kV，管電流150 mA，寬度0.02°，掃描速度15°/min。

2.3.3FTIR測(cè)試取3～5 mg蛋白膠樣與200 mg KBr粉末混合，研磨至均勻粉末后，用壓片機(jī)于10 MPa下壓制窗片進(jìn)行FTIR分析。測(cè)試條件，掃描次數(shù)：64次，波數(shù)范圍：4000～675 cm，譜帶增強(qiáng)因子取3），使用SavitzkyGolay函數(shù)對(duì)光譜求二階導(dǎo)。對(duì)得到的子峰峰位進(jìn)行二級(jí)結(jié)構(gòu)指認(rèn)，在Origin 8.5中對(duì)譜圖各子峰進(jìn)行多次高斯曲線擬合，使殘差最小，根據(jù)各子峰面積，計(jì)算各二級(jí)結(jié)構(gòu)組分的百分含量。

3結(jié)果與討論

3.1蛋白膠樣土壤埋藏老化方法的選擇

我國(guó)幅員遼闊，地下埋藏環(huán)境雖受地理位置、水文條件等影響而有所差異，但多數(shù)考古遺址和遺物均深埋于地下，如秦始皇兵馬俑彩繪陶人和陶馬位于地下5 m以下，該層屬于底土層（距地表>50～60 cm），土體緊實(shí)，環(huán)境缺氧、無(wú)光、低溫，物質(zhì)代謝極其緩慢，地表氣候很難影響到該層。因此，本研究選擇缺氧、避光、低溫、穩(wěn)定密閉的底土層土壤進(jìn)行文物蛋白膠樣的老化實(shí)驗(yàn)。

3.2形貌觀察

由SEM結(jié)果（圖1）可知，土壤埋藏老化后，5種膠料微觀形貌均出現(xiàn)不同程度的變化。全蛋、蛋黃和牛奶樣品出現(xiàn)溶蝕、鱗片化及脫落現(xiàn)象，其中，蛋黃和全蛋樣品（圖1C、1D、1G和1H）的整體完整性未遭到破壞，而牛奶樣品（圖1I和1J）出現(xiàn)了碎裂，分散成大小不等的塊體; 蛋清樣品整體結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯斷裂（圖1E和1F）; 豬皮膠樣品（圖1A和1B）老化后結(jié)構(gòu)出現(xiàn)輕微疏松化，但整體形貌變化最小，土壤埋藏老化的樣品穩(wěn)定性最高。

3.3XRD分析

由5種蛋白膠料土壤埋藏老化前后的XRD結(jié)果（圖2）可以獲取其特征峰所對(duì)應(yīng)的衍射角（2θ）、峰半高寬度（β）及峰面積（Area），利用Bragg方程、Scherrer公式分別計(jì)算晶面間距（d）和晶粒大小（D），其中入射X射線Cu靶波長(zhǎng)為0.154 nm，Scherrer常數(shù)取0.89，結(jié)果見(jiàn)表1。

豬皮膠和牛奶樣品經(jīng)1年老化后的衍射角不變，蛋類的衍射角樣品較老化前略有減小，但降幅極低（<1%）。根據(jù)文獻(xiàn)[17]可知，衍射角變化不大，說(shuō)明土壤埋藏老化未改變蛋白膠的物質(zhì)成分。

由Bragg方程計(jì)算所得的晶面間距可知，蛋類（包括全蛋、蛋清和蛋黃）樣品老化后的d值略增（<1%），豬皮膠和牛奶樣品均未變化，說(shuō)明土壤埋藏老化對(duì)5種蛋白膠料的晶面間距無(wú)明顯影響。

由Scherrer公式計(jì)算所得的晶粒大小可知，老化前后5種膠的D值變化程度較低（<5%），說(shuō)明土壤埋藏老化并未明顯影響晶體尺寸。

所有膠老化后，吸收峰面積均減小，但減少程度不同，其中牛奶樣品減少最顯著（67%），蛋清和全蛋樣品減少程度居中（23%～43%），蛋黃和豬皮樣品的變化小（分別減少9%和2%）。由此可知，豬皮樣品最穩(wěn)定，蛋黃樣品次之，牛奶樣品老化最嚴(yán)重。由文獻(xiàn)[18]可知，峰面積與結(jié)晶度呈正相關(guān)。因此，土壤埋藏老化使蛋白膠料的結(jié)晶度均降低，蛋白質(zhì)的有序性降低。

3.4FTIR分析

由老化前后的FTIR譜圖（圖3）可見(jiàn)，5種蛋白膠在老化后出現(xiàn)1654～1657 cm

5種蛋白膠的α螺旋含量均明顯降低，其中，蛋清樣品降低最顯著（39.06%）。5種蛋白膠的β折疊含量呈增加趨勢(shì)，平均增量為5.79%。豬皮膠和蛋黃樣品的反平行β折疊結(jié)構(gòu)、平行β折疊結(jié)構(gòu)含量基本未發(fā)生改變，而其余3種樣品的反平行β折疊含量減少（7.05%～13.96%），平行β折疊含量增加（14.01%～23.89%）。5種蛋白膠的無(wú)規(guī)則卷曲含量增加，平均增量為11.93%; β轉(zhuǎn)角含量呈升高趨勢(shì)（4.10%～15.97%）。豬皮膠和蛋黃樣品的6種二級(jí)結(jié)構(gòu)含量變化整體小于其它樣品，從分子層面說(shuō)明其土壤埋藏穩(wěn)定性相對(duì)較高。

5種蛋白膠的二級(jí)結(jié)構(gòu)含量均存在α螺旋含量降低、β折疊和無(wú)規(guī)則卷曲含量升高的變化規(guī)律，牛奶樣品的變化尤為顯著，說(shuō)明所有膠料結(jié)構(gòu)均從有序趨于無(wú)序狀態(tài)[25]，與上述XRD有序性降低、酰胺A帶變寬、結(jié)構(gòu)出現(xiàn)解螺旋的結(jié)論相吻合。膠料蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)會(huì)出現(xiàn)上述變化是因?yàn)楦缓谅菪牡鞍踪|(zhì)存在由α螺旋向β折疊轉(zhuǎn)變的趨勢(shì)[26]。Chen等[27]使用統(tǒng)一的勢(shì)能模型計(jì)算出α螺旋和β折疊的勢(shì)能，指出前者的勢(shì)能（Symbolm@@7.1ε）高于后者（Symbolm@@7.4ε），前者可轉(zhuǎn)化為后者。Ding等[28]通過(guò)離散分子動(dòng)力學(xué)算法得出α螺旋、β折疊和無(wú)規(guī)則卷曲的熵值（α螺旋<β折疊<無(wú)規(guī)則卷曲）。由熱力學(xué)第二定律可知：在自然過(guò)程中，一個(gè)孤立系統(tǒng)的總混亂度（熵）會(huì)增大（熵增原理）。因此，土壤埋藏老化后，膠料呈現(xiàn)α螺旋含量降低 、β折疊和無(wú)規(guī)則卷曲含量增大的趨勢(shì)。

3.5不同蛋白膠料土壤埋藏穩(wěn)定性差異的討論綜上，由幾種常見(jiàn)蛋白膠料的顯微形貌、結(jié)晶度、FTIR吸收和二級(jí)結(jié)構(gòu)含量變化可知，豬皮膠的土壤埋藏老化穩(wěn)定性高于其它樣品，這取決于其分子組成和結(jié)構(gòu)。

3.5.1分子中疏水性氨基酸含量的影響

本研究組前期研究獲取了豬皮膠、全蛋和牛奶樣品的氨基酸含量分布特征[29]，其中，豬皮膠含疏水性氨基酸丙氨酸（Ala）、甘氨酸（Gly）、纈氨酸（Val）、亮氨酸（Leu）、異亮氨酸（Ile）、脯氨酸（Pro）、苯丙氨酸（Phe）高達(dá)73.11%，而全蛋和牛奶樣品含疏水性氨基酸僅52.19%和52.40%。同時(shí)相關(guān)研究表明，含疏水性氨基酸[30]高的蛋白質(zhì)，穩(wěn)定性通常更高[31]。因此，從分子中疏水性氨基酸含量影響可知，豬皮膠土壤埋藏的穩(wěn)定性高于蛋類和牛奶樣品。

3.5.2蛋白結(jié)構(gòu)的影響豬皮膠的主要成分膠原蛋白為非常特殊的螺旋結(jié)構(gòu)，具體而言，GlyXY（X和Y 為Gly之外的氨基酸，X 主要是 Pro，Y 主要是羥脯氨酸Hyp）三肽周期結(jié)構(gòu)先組成左手螺旋肽鏈，3條此肽鏈再以右手螺旋方式形成穩(wěn)定的三股螺旋結(jié)構(gòu)[32，33]。豬皮膠這種獨(dú)特的結(jié)構(gòu)比含球狀[34]、球狀膠體[35]的蛋類和牛奶樣品的穩(wěn)定性更高。

4結(jié) 論

通過(guò)對(duì)5種常見(jiàn)彩繪文物蛋白膠料在土壤埋藏老化前后的形貌、結(jié)構(gòu)的對(duì)比研究表明，老化膠料表面規(guī)則結(jié)構(gòu)和紋理均遭破壞，整體變得松散化，膠料的衍射角、晶面間距和晶粒大小基本保持不變，結(jié)晶度整體減小。老化膠料雖具有蛋白質(zhì)酰胺Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ帶紅外光譜的典型吸收特征，但α螺旋含量降低、β折疊和無(wú)規(guī)則卷曲含量增高，說(shuō)明蛋白結(jié)構(gòu)從有序趨于無(wú)序狀態(tài)。在5種膠料中，牛奶的形貌、結(jié)構(gòu)變化相對(duì)較大，而豬皮膠相對(duì)小，說(shuō)明后者的土壤埋藏老化穩(wěn)定性優(yōu)于前者。后期可進(jìn)一步展開(kāi)老化前后氨基酸一級(jí)結(jié)構(gòu)含量的分析，以探討一級(jí)結(jié)構(gòu)與二級(jí)結(jié)構(gòu)變化之間的關(guān)系，為彩繪文物的劣化機(jī)理研究提供科學(xué)依據(jù)。

References

1Horn K R. J. Archaeol. Sci. Rep.， 2018， 21： 10-20

2Chua L， Head K， Thomas P， Stuart B. Microchem. J.，2017，? 134： 246-256

3Orsini S， Parlanti F， Bonaduce I. J. Anal. Appl. Pyrol.，? 2017，? 124： 643-657

4YANG Lu， HUANG JianHua， SHEN MaoSheng， WANG LiQin， WEI YinMao. Chinese J. Anal. Chem.，? 2019，? 47（5）： 695-701

楊 璐， 黃建華， 申茂盛， 王麗琴， 衛(wèi)引茂. 分析化學(xué)， 2019，? 47（5）： 695-701

5DONG ShuLing， WANG ShengNan， WANG XiuLing， LIU YongJian. Chinese J. Lumin.，? 2019， ?40（4）： 453-458

董淑玲， 王勝男， 王秀玲， 劉勇健. 發(fā)光學(xué)報(bào)，? 2019，? 40（4）： 453-458

6ZHU Bo， GAO YongWei， LIU ZhiChen， LUO YaNan. Chinese Opt.，? 2019，? 12（2）： 302-309

祝 波， 高永為， 劉芷晨， 羅亞楠. 中國(guó)光學(xué)，? 2019，? 12（2）： 302-309

7Bahners T， Gebert B， Prager A， Hartmann N， Hagemann U， Gutmann J S. Appl. Surf. Sci.，? 2018，? 436： 1093-1103

8Barbabietola N， Tasso F， Alisi C， Marconi P， Perito B， Pasquariello G， Sprocati A R. Int. Biodeter. Biodegr.，? 2016，? 109： 53-60

9Sotiropoulou S， Papliaka Z E， Vaccari L. Microchem. J.，? 2016，? 124： 559-567

10BadilloSanchez D， Chelazzi D， Giorgi R， Cincinelli A， Baglioni P. Polym. Degrad. Stabil.，? 2018，? 157： 53-62

11Gavira J A. Arch. Biochem. Biophys.，? 2016，? 602： 3-11

12Hao X Y， Wang X， Yang W M， Ran J B， Ni F F， Tong T， Dai W， Zheng L Y， Shen X Y， Tong H.Int. J. Biol. Macromol.，? 2019，? 124： 71-79

13WU Chen， WANG LiQin， YANG Lu， MA ZhenZhen. Chinese J. Anal. Chem.，? 2013，? 41（11）： 1773-1779

吳 晨， 王麗琴， 楊 璐， 馬珍珍.? 分析化學(xué)， 2013，? 41（11）： 1773-1779

14JIA SiXie. Qi Ming Yao Shu Correction. Beijing： Agricultural Press，? 1982：? 461-465

賈思勰.? 齊名要術(shù)校譯.? 北京： 農(nóng)業(yè)出版社，? 1982：? 461-465

15GUO JianBo， WANG LiQin， HAN Ming， FU Fei. J. Text. Res.，? 2013，? 34（11）： 66-70

郭建波， 王麗琴， 韓 明， 付 菲.? 紡織學(xué)報(bào)，? 2013，? 34（11）： 66-70

16Colombini M P， Andreotti A， Bonaduce I， Modugno F， Ribechini E. Acc. Chem. Res.，? 2010，? 43（6）： 715-727

17FANG ZhongYan， LIAO Wei， YU LiPing， XIANG JinBing. J. West. China. Forestr. Sci.，? 2018，? 47（1）： 92-96

方忠艷， 廖 薇， 余麗萍， 向進(jìn)兵.? 西部林業(yè)科學(xué)，? 2018，? 47（1）： 92-96

18TIAN Wei， KONG Jie， HU SiHai. Modern Methods of Polymer Research. Xian， Northwestern Polytechnic University Press，? 2014：? 249

田 威， 孔 杰， 胡思海.? 高聚物的現(xiàn)代研究方法.? 西安： 西北工業(yè)大學(xué)出版社，? 2014：? 249

19Bortoletto D R， Lima C A， Zezell D， Sato E T， Martinho H. Vib. Spectrosc.，? 2018，? 97： 135-139

20MA ZhenZhen， WANG LiQin， Gabriela Krist， Tatjana Bayerova， YANG Lu. Spectorsc. Spectr. Anal.，? 2017，? 37（9）： 2712-2716

馬珍珍， 王麗琴， Gabriela Krist， Tatjana Bayerova， 楊 璐.? 光譜學(xué)與光譜分析，? 2017，? 37（9）： 2712-2716

21Duce C， Porta V D， Tiné M R， Spepi A， Ghezzi L， Colombini M P， Bramanti E. Spectrochim. Acta A，? 2014，? 130： 214-221

22Luo Y， Li M， Zhu K X， Guo X N， Peng W， Zhou H M. Food. Chem.，? 2016，? 197： 699-708

23Ulrichs T， Drotleff A M， Ternes W. Food. Chem.， ?2015，? 172： 909-920

24Grewal M K， Huppertz T， Vasiljevic T. Food. Hydrocolloid，? 2018，? 80： 160-167

25Wu X M， Liu Y W， Liu A J， Wang W H. Int. J. Biol. Macromol.，? 2017，? 98： 292-301

26Zhao Q， Buehler M J. Phys. Rev. Lett.， 2010，? 104： 198304

27Chen J Z Y， Imamura H. Phys. A，? 2003，? 321： 181-188

28Ding F， Borreguero J M， Buldyrey S V， Stanley H E， Dokholyan N V. Proteins，? 2003，? 53： 220-228

29MA ZhenZhen， WANG LiQin， YANG Lu. Chin. J. Anal. Lab.，? 2016，? 35（7）： 800-805

馬珍珍， 王麗琴， 楊 璐.? 分析試驗(yàn)室，? 2016，? 35（7）： 800-805

30DENG MingXia， WANG HaiBo， YANG Ling， LIU LiangZhong， HUANG AiNi， ZHANG HanJun. Modern. Food. Sci. Tech.，? 2015，? 31（12）： 111-120

鄧明霞， 汪海波， 楊 玲， 劉良忠， 黃愛(ài)妮， 張含俊.? 現(xiàn)代食品科技，? 2015，? 31（12）： 111-120

31Damodatan S， Parkin K I， Fennema O R. Fennemas Food Chemistry， Translated by JIANG Bo， YANG RuiJin， ZHONG Fang， ZHANG XiaoMing， LU RongRong. Beijing： Beijing Light Industry Press，? 2013：? 223

Damodatan S， Parkin K I， Fennema O R.? 食品化學(xué) （第四版）. 江 波， 楊瑞金， 鐘 芳， 張曉鳴， 盧蓉蓉譯. 北京： 中國(guó)輕工業(yè)出版社， 2013：? 223

32Sun XX， Fan J， Hou Y N， Liang S， Zhang Y P， Xiao J X. Chin. Chem. Lett.，? 2017，? 28： 963-967

33WANG XueChuan， ZOU YiShan， QIANG TaoTao. J. Shaanxi Uni. Sci. Tech.，? 2013，? 31（5）： 28-34

王學(xué)川， 宗奕珊， 強(qiáng)濤濤.? 陜西科技大學(xué)學(xué)報(bào)，? 2013， ?31（5）： 28-34

34Sheng L， Huang M J， Wang J， Xu Q， Hammad H H M， Ma M H. J. Food Eng.，? 2018，? 219： 1-7

35Huppertz T， Fox P F， Kelly L. Proteins in Food Processing. Woodhead Publishing， London，? 2018：? 49-92