?高致病性豬藍耳病免疫抗體檢測結果及防控策略

王秋艷

高致病性豬藍耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒高致病性毒株引起的豬的一種病毒性傳染病。世界動物衛生組織（OIE）將其列為必須報告的動物疫病，我國將其列為一類傳染病。為更好地應對高致病性豬藍耳病，筆者對新野縣45家規模養豬場進行了為期2年的抗體水平實驗室檢測。從整體上看，大多數豬場豬群的免疫效果較好，但部分豬場的少數豬只抗體水平偏低，不足以抵抗強毒侵襲而發病或成為帶毒豬，威脅易感豬群，必須采取綜合措施，防止高致病性豬藍耳病的發生。

一、材料和方法

（一）采集樣品

樣品均采自新野縣年出欄量1500頭以上規模豬場，其中漢城辦事處5個場、漢華辦事處9個場、城郊鄉7個場、溧河鋪鎮8個場、沙堰鎮9個場、樊集7個場，共采集血清樣本1380份。其中，母豬血清300份、仔豬血清420份、育肥豬660份，采集血清后置于低溫冰箱保存備用。

（二）診斷

診斷試劑豬藍耳病病毒抗體檢測試劑盒（酶聯免疫吸附法），具體做法是將濃縮液用純化水進行20倍稀釋，充分搖勻后備用。每次試驗在包被板上設陰性對照孔和陽性對照孔。用加樣器在包被板的待檢樣品中加入樣品稀釋液，每孔100 uL;陰性對照孔和陽性對照孔不加樣品稀釋液。分別于各待檢樣品孔中加入待檢樣品10 uL，陰性對照孔中加入陰性對照血清100 uL，陽性對照孔中加入陽性對照血清100 uL。充分混勻，貼上封板膜，37 ℃溫育30 min。傾去內容物，用洗液注滿反應孔，靜置10 s后棄去，在吸水紙上拍干。洗板重復5次。各孔中加入酶標結合物100 uL。貼上封板膜，37 ℃溫育30 min。傾去內容物，用洗液注滿反應孔，靜置10 s后棄去，在吸水紙上拍干。洗板重復5次。每孔加入顯色劑A50 uL，全部加完后再在每孔中加入顯色劑B50 uL，混勻。37 ℃顯色10 min。顯色完畢后立即于每孔中加50 uL終止液，混勻。用酶標儀在450 nm波長處測定吸光值。

（三）判定標準

在酶標儀上測各孔OD450值。試驗成立的條件是陽性對照孔平均OD450值與陰性對照OD450值之差≥

0.5。試劑盒Cut Off值=0.1+陰性對照孔OD平均值（陰性對照孔OD平均值≥0.05，按實際值計算;陰性對照孔OD平均值<0.05，按0.05計算）。若待檢樣品OD值

Cut Off值，結果判陽性。

二、免疫抗體檢測結果

在所檢測的1380份血清中，420份母豬血清有43份血清樣品OD450值<0.15，占10%，其余374份血清樣品OD630值>0.15，免疫抗體合格率89%;育肥豬960份血清有768份血清樣品OD450值>0.15，免疫抗體合格率80%，母豬免疫抗體合格率高出育肥豬抗體合格率9個百分點。在所檢測的45個規模養殖場，有40個豬場豬瘟免疫抗體合格率≥75%（其中，18個豬場>90%，12個豬場≥80%～≤90%，10個豬場≥75%～<80%），有5個豬場豬瘟免疫抗體合格率<75%，分別是72%、70%、63%、60%、57%。豬場與豬場之間的免疫效果相差很大，合格率為57%～95%。若以豬場豬藍耳病免疫合格率≥75%以上判為免疫合格，則有40個豬場免疫合格占89%，5個豬場免疫不合格占11%。

三、防控策略

（一）免疫預防

根據流行狀況和風險評估結果，制定本區域切實可行的免疫方案，并做好免疫效果評價。目前，國內已研制成功高致病性豬藍耳病滅活疫苗和高致病性豬藍耳病弱毒疫苗，通過幾年來的區域試驗證明，疫苗免疫是控制高致病性豬藍耳病傳播與蔓延的有效途徑。現在普遍認為弱毒疫苗存在同群感染、病毒重組返強的危險，雖然只是推測，未得到證實，但已有試驗證明高致病性豬藍耳病弱毒疫苗可以在同群豬中相互傳播，并且不能完全阻止強毒的潛伏感染。因此，我們提倡，種豬群和健康豬群全部應用滅活疫苗免疫。

（二）監測凈化

加大疫情監測力度，及時準確掌握病原分布和疫情動態，科學評估發生風險，及時發布預警信息。對免疫抗體合格率達不到70%的要及時補免，確保免疫效果;對凈化場按照“一場一策、一病一案”要求，根據各場實際，制定切實可行的凈化方案，有計劃地實施監測凈化。同時，嚴把種豬引進關，種豬引進之前必須進行高致病性豬藍耳病檢測，嚴禁從疫場引進種豬。

（三）檢疫監管

不斷加強生豬產地檢疫和屠宰檢疫，建立以實驗室檢測和動物衛生風險評估為依托的產地檢疫機制，不斷提升檢疫化科學水平。強化生豬移動監管，做好跨省調運種豬產地檢疫和監管工作。做到跨省調運電子出證，實現檢疫數據互聯互通。