松毛蟲赤眼蜂一氧化氮合酶基因的克隆、原核表達及在不同滯育階段的表達譜分析

姜雪冰, 張 雪, 杜文梅, 鄒 振, 張俊杰,*

(1. 吉林農業大學生物防治研究所, 生物防治技術工程研究中心, 長春 130118; 2. 中國科學院動物研究所, 農業蟲害鼠害綜合治理研究國家重點實驗室, 北京 100101)

松毛蟲赤眼蜂Trichogrammadendrolimi隸屬于膜翅目(Hymenoptera)赤眼蜂科(Trichogrammatidae)赤眼蜂屬Trichogramma，能寄生多種農林害蟲的卵，如亞洲玉米螟Ostriniafurnacalis、水稻二化螟Chilosuppressalis等(李麗英, 1984; 林乃銓, 1987)。在松毛蟲赤眼蜂工廠化生產的過程中，天敵昆蟲的保存是一個十分重要的環節(張俊杰等, 2015)。傳統的方法是利用低溫對松毛蟲赤眼蜂商品進行保存，但低溫保存的劣勢也是比較明顯的，經過低溫冷藏的松毛蟲赤眼蜂在寄生率、羽化率等指標上均顯著下降，直接地影響了松毛蟲赤眼蜂的防治效果(張俊杰等, 2018)。滯育技術的應用能很好地解決松毛蟲赤眼蜂商品的保存問題。盡管滯育技術已經在松毛蟲赤眼蜂工廠化生產中得以應用(Zhangetal., 2018)，但對于松毛蟲赤眼蜂滯育誘導及解除的機制還不甚了解，這也使得滯育技術的運用存在著極大的局限性。因此，為了進一步促進松毛蟲赤眼蜂的工廠化生產進程，提高生物防治的效果，亟需對影響滯育的分子機制進行深入的探究。

一氧化氮(nitric oxide, NO)作為一種具有自由基特性的活性分子，參與多種昆蟲的生命活動，如激活昆蟲的先天性免疫(Ishiietal., 2013; Sadekuzzamanetal., 2018)，激活精子(Nagaokaetal., 2017)，并可以作為神經系統的信號分子(Müller, 1997)。還有報道證實，NO對蜜蜂Apis的嗅覺記憶及嗅覺馴化均有重要作用(Müller and Hildebrandt, 2002)。在其他動物如鹵蟲中，NO還可以作為活性氮物質促進個體囊胚發育(Villalobo, 2006; Formanetal., 2008; 杜濱, 2012)。……