氯化鉀緩釋片在不同介質中溶出曲線的對比研究

王蓀璇，妙苗，王嫦鶴，劉雪峰，鄧穎鵬

作者單位：陜西省食品藥品監督檢驗研究院，陜西 西安710065

氯化鉀緩釋片的主成分為氯化鉀（KCl），屬于電解質補充藥，主要用于治療各種原因引起的低鉀血癥，如進食不足、嘔吐、嚴重腹瀉、應用排鉀利尿藥、低鉀性家族周期性癱瘓、長期應用糖皮質激素和補充高滲葡萄糖等［1］；還用于預防低鉀血癥，如病人存在失鉀的情況，尤其是如果低鉀血癥對病人危害較大時（如洋地黃化的病人），需預防補充鉀鹽［2］。

溶出度試驗在評價口服固體制劑內在品質和仿制藥研發中越來越發揮舉足輕重的作用，在多種溶出介質中進行藥品溶出曲線的測定，是評價口服固體制劑內在質量的一種重要手段。本研究自2018年6—9月選擇4種不同溶出介質測定不同批次樣品的累積溶出量，繪制體外多條溶出曲線，從而模擬藥物的體內釋放行為。國家食品藥品監督管理總局發布的仿制藥參比制劑目錄（第八批）通告中氯化鉀緩釋片參比制劑的規格分別為600毫克∕片和750毫克∕片，國內仿制藥的規格為500毫克∕片，因規格不同，故本研究中未使用參比制劑。

溶出曲線相似性的比較，多采用非模型依賴法中的相似因子（?2）法，計算?2因子時，采用互相之間作為參比的計算方法，通過?2因子計算結果可進一步分析出三批樣品之間工藝與釋放情況的差異。

1 儀器與試藥

1.1儀器SOTAX AT.7X溶出儀；METTLER XPE105電子分析天平；METTLER T5電位滴定儀；METTLER 411-SG電極；Thermo ICE 3500原子吸收分光光度計；天大天發ZKT-18F真空脫氣儀。

1.2試劑與藥品氯化鉀對照品（中國食品藥品檢定研究院，生產批號100708-200401）；氯化鉀緩釋片（某企業提供）3批（生產批號：S01、S02、S03）；鹽酸（優級純，國藥集團化學試劑有限公司）；硝酸銀滴定液（0.01 mol∕L，F＝1.000）；鉻酸鉀（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；磷酸（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；氫氧化鉀（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；磷酸二氫鉀（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；氯化鈉（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；水為自制脫氣純化水。

2 溶出條件的選擇

根據《普通口服固體制劑溶出度試驗技術指導原則》以及日本橙皮書相關內容，采用《中國藥典》2015年版四部通則0931第二法裝置，轉速為50r∕min，分別以水、pH 4.5緩沖液、pH 6.8緩沖液和pH 1.2鹽酸溶液為溶出介質，介質體積為900 mL，取樣時間為1、2、4、6、8、10 h，取樣體積為10 mL并即時補充相同體積相同溫度的相同溶出介質。

3 累積溶出量測定

3.1電位滴定法［6］

3.1.1 供試品溶液的制備 取3批樣品各12片，分別在3種溶出介質（pH 4.5緩沖液、pH 6.8緩沖液和水）中試驗，按“2”項下的溶出條件取不同時間點的溶出液，用0.45μm濾膜濾過，分別精密量取續濾液各5mL，加純化水適量，沒過電極，再加入鉻酸鉀指示液4滴。

3.1.2 空白溶液的制備 精密量取溶出介質5 mL，按“3.1.1”項下的方法同法制備。

3.1.3 測定方法 分別取“3.1.1”、“3.1.2”項下供試品溶液、空白溶液，用硝酸銀滴定液（0.01 mol∕L，F＝1.000）滴定，使用銀電極滴定至電位突躍點，每1 mL硝酸銀滴定液（0.01 mol∕L，F＝1.000）相當于0.745 5 mg的KCl。同步測定空白，計算每杯在不同取樣時間點的累積溶出量。

3.2火焰原子吸收法

3.2.1 供試品溶液的制備 取三批樣品各12片，分別在溶出介質（pH 1.2鹽酸溶液）中試驗，按“2”項下的溶出條件取不同時間點的溶出液，用0.45μm濾膜濾過，分別精密量取1 h時溶出液600μL；2、4 h時溶出液各350 μL；6、8、10 h時溶出液各250μL，分別置50 mL量瓶中，精密加入20%氯化鈉溶液1 mL，用鹽酸溶液（2.7→100）稀釋至刻度，搖勻。

3.2.2 系列對照品溶液的制備 取氯化鉀對照品約0.1 g，精密稱定，置100 mL量瓶中，加純化水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置100 mL量瓶中，用鹽酸溶液（2.7→100）稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。精密量取對照品儲備液2、3、4、5、6 mL，分別置100 mL量瓶中，各精密加入20%氯化鈉溶液2 mL，用鹽酸溶液（2.7→100）稀釋至刻度，搖勻。

3.2.3 空白溶液 精密量取20%氯化鈉溶液2 mL，置100 mL量瓶中，用鹽酸溶液（2.7→100）稀釋至刻度，搖勻。

3.2.4 測定方法 分別取“3.2.1”、“3.2.2”、“3.2.3”項下供試品溶液、系列對照品溶液、空白溶液，采用火焰原子吸收法，計算每片在不同取樣時間點的累積溶出量。

4 結果

4.1累積溶出量相對標準偏差（RSD）分別計算三批樣品在4種溶出介質中各取樣時間點的12片累積溶出量間的RSD，見表1。

表1 三批樣品在4種溶出介質中平均累積溶出量結果

圖1 4種不同介質溶出曲線：A為水中平均累積溶出曲線，B為pH 4.5磷酸鹽緩沖液中平均累積溶出曲線，C為pH 6.8磷酸鹽緩沖液中平均累積溶出曲線，D為pH 1.2鹽酸溶液中平均累積溶出曲線

4.2繪制溶出曲線取三批樣品各12片，按“2”項下的溶出條件取不同時間點的溶出液，以“3.1”、“3.2”項下的方法計算累積溶出量，分別以4種溶出介質中的取樣時間為橫坐標（X），每批12片的平均累積溶出量為縱坐標（Y），繪制溶出曲線，見圖1。

4.3 ?2因子的計算根據《普通口服固體制劑溶出度試驗技術指導原則》，?2因子計算公式如下：

式中，n為取樣時間點個數，Rt為t時間參比樣品平均溶出量，Tt為t時間受試樣品平均溶出量［10］。

4.3.1 相同介質不同批次間的?2因子 取三批樣品各12片在同一種溶出介質中不同取樣時間點的平均累積溶出量，計算互相之間的?2因子，見表2。

表2 相同介質不同批次樣品間?2因子計算結果

4.3.2 相同批次不同介質間的?2因子 取同一批次樣品12片在4種溶出介質，不同取樣時間點的平均累積溶出量，計算互相之間的?2因子，見表3。

表3 同一批次樣品不同介質間?2因子計算結果

4.4結論根據國家局發布的《仿制藥質量一致性評價—普通固體口服制劑溶出度試驗技術指導原則（草案）》可知，“3.1.3”項下除0時外，選取的第一個取樣時間點溶出結果的相對標準偏差應不得過20%，自第二個取樣時間點至最后一個取樣時間點溶出結果的相對標準偏差應不得過10%。由表1結果可得，三批樣品第一個取樣時間點各12片間的累積溶出量的RSD值最大為7.9%，最小為1.9%，均小于20%；自第二個取樣時間點至最后一個取樣時間點累積溶出量的RSD值最大為5.0%，最小為1.1%，均小于10%。據實驗結果表明樣品均勻，工藝比較成熟。

根據國家局發布的《仿制藥質量一致性評價——普通固體口服制劑溶出度試驗技術指導原則（草案）》可知，當兩條溶出曲線?2因子數值不小于50時，可認為兩條溶出曲線具有相似性。由表2結果可得，相同介質不同批次樣品間的?2因子最大值為97.78，最小值為64.41，均大于50；由表3結果可得，同一批次樣品不同介質間的?2因子最大值為95.40，最小值為64.86，均大于50。實驗結果所得的12條溶出曲線的?2因子均大于50，可認為氯化鉀緩釋片溶出曲線均相似。

5 討論

在體外溶出實驗中，溶出介質中的氣體會影響藥品的崩解、溶出和擴散，因此本研究中采用了脫氣純化水。每次取出溶出液后都及時補充了相同溫度相同體積的溶出介質［3-5］。

采用電位滴定法測定氯化鉀溶出量時，空白溶液會消耗一定量的滴定液，對實驗結果影響較大，因此在每次測定樣品溶出量時同步測定空白溶液，并扣除空白溶液消耗的滴定液體積。

由表1各批次各時間點累積溶出量RSD計算結果，可以看出每片釋放行為基本一致；由表3?2因子計算結果，可看出該企業氯化鉀緩釋片生產工藝穩定，從而進一步證明該企業生產的氯化鉀緩釋片工藝成熟；由表2中?2因子計算結果，可看出溶出介質對氯化鉀的溶出影響不大。綜上所述，該企業生產的氯化鉀緩釋片的體外釋放行為基本不存在問題，體內生物利用度還有待研究［7-11］。