MiR-4429/NQO1對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞損傷及炎癥因子分泌的影響

周燕 郭珊嵐 蘭秀君 鄭紅

641300 資陽，四川省資陽市第一人民醫(yī)院腎病內(nèi)科(周燕，蘭秀君),病理科(郭珊嵐),檢驗(yàn)科(鄭紅)

糖尿病腎病(DN)是糖尿病的并發(fā)癥之一，腎小管上皮細(xì)胞損傷在DN發(fā)生過程中發(fā)揮重要作用，而腎小管上皮細(xì)胞損傷主要包括炎性損傷、細(xì)胞凋亡等[1]。研究表明高糖環(huán)境可誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞損傷[2]。目前關(guān)于腎小管上皮細(xì)胞損傷的分子機(jī)制尚未完全闡明，國外研究表明miR-29c、miR-216a-5p等miRNA可通過調(diào)控靶基因表達(dá)從而參與DN發(fā)生及發(fā)展過程[3-4]。但仍有部分miRNA在DN發(fā)生過程中的作用機(jī)制尚未闡明。因而探究其發(fā)生機(jī)制有助于診斷及治療DN。miR-4429在DN患者中呈高表達(dá)，但關(guān)于其具體作用機(jī)制尚未闡明[5-6]。生物信息學(xué)分析顯示依賴還原型輔酶/醌氧化還原酶1(NADH quinone dehydrogenase 1，NQO1)可能是miR-4429的靶基因，研究表明NQO1屬于抗氧化基因，并可拮抗高糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激反應(yīng)[7-8]。但miR-4429是否可通過調(diào)控NQO1從而參與腎小管上皮細(xì)胞損傷過程尚未可知。本研究通過高糖誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞建立細(xì)胞損傷模型，觀察細(xì)胞中miR-4429與NQO1的表達(dá)，分析miR-4429與NQO1對(duì)高糖誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞損傷及炎性因子分泌的影響，旨在為進(jìn)一步揭示腎小管上皮細(xì)胞損傷的分子機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)。

材料與方法

一、材料與試劑

人腎小管上皮細(xì)胞HK-2購自上海通派生物科技有限公司；D-葡萄糖購自上海甄準(zhǔn)生物科技有限公司；杜氏改良培養(yǎng)基(DMEM)、胎牛血清購自美國Gibco公司；胰蛋白酶購自美國Thermo Fisher公司；Lipofectamine2000購自上海潤成生物科技有限公司；miR-4429特異性寡核……