干擾素-γ作用后的小鼠肺微血管內皮細胞對共培養T淋巴細胞增殖的影響及機制

徐金環，尹琎，李琳，李赟，張義成

華中科技大學同濟醫學院附屬同濟醫院，武漢430030

血管內皮細胞是移植排斥過程中最先接觸到反應性T淋巴細胞的異體細胞，而T淋巴細胞識別異型抗原對其后的異基因反應有至關重要的作用[1]。研究報道，將T淋巴細胞暴露于血管內皮細胞可導致T淋巴細胞無反應性[2]。在急性移植物抗宿主病(aGVHD)的發病過程中，Th1細胞通過干擾素-γ(IFN-γ)啟動異體免疫反應后的炎癥反應，且IFN-γ又可通過不同的途徑來誘導免疫耐受及減輕異體免疫反應[3]。除公認的抑制性DC細胞外，血管內皮細胞可能在IFN-γ誘導的免疫耐受過程中也發揮重要作用，但目前相關研究較少。吲哚胺-2，3-加氧酶(IDO)是免疫反應中的一種重要調控酶，表達IDO的細胞能抑制T淋巴細胞反應和促進耐受形成[4]。研究表明，心臟移植大鼠移植心臟小血管IDO表達量及表達細胞數與移植物獲得耐受的時間均呈正相關關系，且在aGVHD小鼠靶器官的血管內皮細胞可檢測到IDO表達[5,6]。2017年1月～2018年12月，本研究將IFN-γ作用后的小鼠肺微血管內皮細胞(PMVECs)與T淋巴細胞共培養，觀察其對T淋巴細胞增殖的影響，并探討其機制是否與IDO有關。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 實驗動物：健康8～10周齡雌性Balb/C小鼠16只，體質量18～20 g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司。主要試劑：RPMI 1640培養液和胎牛血清(FBS)購自美國Gibco公司，小鼠IFN-γ和小鼠淋巴細胞分離液購自深圳達科為生物技術有限公司，蛋白Marker購自立陶宛Fermentas公司，Kyn和Trp標準品購自美國Sigma公司，BCA法蛋白定量試劑盒、SDS-PAGE凝膠制備試劑盒購自上海碧云天生物技術有限公司。……