液相色譜串聯質譜法測定河豚毒素標準品

□ 李春青 付志茹 高麗娜 時文博 陳永平 天津市農業生態環境監測與農產品質量檢測中心

河鲀毒素（TTX）是鲀魚等魚類體內的一種有神經毒性的生物堿。河鲀毒素熱穩定性和化學穩定性都很好，一般的腌漬、日曬和烹飪都不能破壞其化學結構。目前，諸多檢測機構開展了對河豚毒素的檢測工作[1]。然而，各個儀器廠商生產的儀器在質譜參數方面有一定差別，使得某些檢測方法通用性不強，需要重新優化質譜參數。本文在3個不同品牌的液質上分別建立了測定河豚毒素標準品的儀器方法，希望可為檢測人員提供參考。

1 實驗部分

1.1 質譜儀

AB Sciex 4000質譜、Thermo TSQ質譜、Waters Premier XE質譜。

1.2 液相色譜條件

①色譜柱：島津Shim-pack C8色譜柱，75 mm×2.0 mm，2.2 μm；②進樣量：2 μL；③柱溫：40 ℃；④流動相：A.2 mmol/L醋酸銨溶液；B.乙腈；梯度洗脫程序見表1[2]。

表1 流動相梯度洗脫程序

1.3 AB 4000質譜條件

①離子化模式：大氣壓電噴霧離子源（ESI），正離子模式；②噴霧電壓IS：5 500 V；③加熱溫度TEM：400 ℃；④霧化氣 GS1：55 psi； ⑤ 輔 助 加 熱 氣GS2：55 psi；⑥去簇電壓DP：100 V；⑦射入電壓EP：10.8 V；⑧碰撞室射出電壓CXP：6.9 V；⑨掃描模式：選擇反應監測（MRM），母離子、子離子和碰撞能量見表2。

表2 選擇反應監測母離子、子離子和碰撞能量

1.4 Thermo TSQ質譜條件

①離子源：電噴霧源（ESI）；②掃描模式：正離子掃描；③噴霧電壓（Spray voltage）：4 800 V；④鞘氣流量（Shealth gas pressure）：12 L/min；⑤ 輔 助 氣 流 量（Aux valve fl ow）：2 L/min；⑥離子傳輸管溫度（Capillary temperature）：350 ℃；⑦源內碰撞誘導解離電壓（Source CID）：10 V；⑧掃描模式：選擇反應監測模式,母離子、子離子和碰撞能量見表2；⑨碰撞氣壓力：氬氣，1.5 mTorr。

1.5 Waters Premier XE質譜條件

①電噴霧離子源，正離子掃描（ESI+）；②檢測方式：多反應監測（MRM）；③毛細管電壓：3 000 V；④離子源溫度：110 ℃；⑤脫溶劑氣溫度：350 ℃；⑥錐孔氣流量：50 L/h；⑦脫溶劑氣流量：600 L/h；⑧錐孔電壓、碰撞能量、分析物母離子及子離子等條件如表2所示。

1.6 河豚毒素標準曲線

3臺儀器在標準品濃度為10～120 ng/ml條件下，測得的標準曲線如表3所示。由相關系數可知，該上述儀器條件滿足實驗所需。

表3 河豚毒素的標準曲線

2 比較與討論

采取高溫高電壓的方式進行離子化。各個儀器參數的區別主要體現在各種輔助氣體和電壓的名稱及數值上。這就使得某些方法或文獻中的儀器參數通用性不強。希望本文所做工作可為檢測人員提供一定參考。