彝族藥物朵基諾(鐵掃把)抗煙堿急性毒性作用研究

趙有亮，李蓉

(楚雄醫藥高等專科學校，云南 楚雄 675000)

朵基諾為彝族藥物名稱，其漢譯意為“馬蜂叮的藥”，為楚雄地區民間廣泛使用的一種民族藥物，漢藥名為：鐵掃把，又叫“大夜關門”“地膚”，為蝶形花科胡枝子屬(LespedezacuneataG.Don)植物，以根和全株入藥，夏秋季采收[1]。近年來，研究者們對本藥在止咳、化痰、平喘作用及對子宮平滑肌的影響、胃腸活動影響、免疫系統影響、體外抗菌作用方面進行了一定的研究，提出了一些藥用價值。除了以上藥用價值外，楚雄地區彝族居民長期以來用水煎煮后內服用于食物藥物中毒的解救。現通過動物實驗研究，進一步確定藥物有效性，為民族藥物資源開發提供一定理論基礎。

1 材料

1.1 藥材 從云南省楚雄市區域內采集，經生藥學鑒定為彝族藥物朵基諾，漢藥名為鐵掃把的全草(包括根、徑、葉)，晾干，陰涼處保存。

1.2 動物 普通級昆明種小鼠200只，雌雄不限，6～7周齡，體重(19.7±2.2)g，昆明醫科大學實驗動物學部提供，許可證號：SCXK(滇)K2015-0002。飼養于楚雄醫藥高等專科學校實驗動物室，室溫(23±1)℃，自由飲水攝食。

2 方法

2.1 供試品的制備 取備好的朵基諾干燥藥材，切成小段，稱取200 g，加純化水適量浸泡30 min，加熱煎煮兩次，第一次30 min，第二次20 min，過濾，合并兩次濾液，濃縮至400 mL(每毫升藥液相當于原藥材0.5 g)。

2.2 煙堿液的制備 自制吸煙裝置，準備某煙草企業生產的香煙2盒(煙堿含量：1.0 mg，焦油含量：10 mg)，點燃香煙抽取煙霧，將煙霧通入生理鹽水溶液讓其充分溶解(每3只香煙煙霧通入10 mL生理鹽水液)，得到煙堿溶液，以供實驗造模使用。

2.3 實驗方法

2.3.1 常規劑量下朵基諾藥液的解毒效果研究 隨機選取小鼠80只，分為兩組，每組40只。

①甲組(對照組)：以0.2 mL·(10 g)-1的劑量灌服生理鹽水，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1劑量腹腔注射煙堿溶液，觀察小鼠的活動及存活情況。

②乙組(實驗組)：以0.2 mL·(10 g)-1的劑量灌服朵基諾藥液，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1劑量腹腔注射煙堿溶液，觀察小鼠的反應和生存情況。

2.3.2 不同劑量朵基諾的解毒效果研究隨機選取小鼠60只，分為3組，每組20只。

①甲組(高劑量組)：將朵基諾供試藥液濃縮至原體積一半后，以0.2 mL·(10 g)-1的劑量對小鼠灌服給藥，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1劑量腹腔注射煙堿溶液，觀察小鼠的反應和生存情況。

②乙組(中劑量組)：以0.2 mL·(10 g)-1的劑量灌服朵基諾供試藥液，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1劑量腹腔注射煙堿溶液，觀察小鼠的反應和生存情況。

③丙組(低劑量組)：將朵基諾供試藥液稀釋1倍后，以0.2 mL·(10 g)-1的劑量對小鼠灌服給藥，30 min后以0.2 mL·(10 g)-1劑量腹腔注射煙堿溶液，觀察小鼠的反應和生存情況。

2.3.3 不同劑量煙堿下朵基諾的解毒效果研究將煙堿液濃度分別增加到1.5倍、2倍、2.5倍量，以供實驗用。隨機選取小鼠60只，分為3組，每組20只。

①甲組(煙堿高劑量一組)：以0.2 mL·(10 g)-1的劑量灌服朵基諾藥液，30 min后腹腔注射煙堿液(2.5倍致死量)，觀察小鼠的反應和生存情況。

②乙組(煙堿高劑量二組)：以0.2 mL·(10 g)-1的劑量灌朵基諾藥液，30 min后腹腔注射煙堿液(2倍致死量)，觀察小鼠的反應和生存情況。

③丙組(煙堿高劑量三組)：以0.2 mL·(10 g)-1的劑量灌服朵基諾藥液，30 min后腹腔注射煙堿液(1.5倍致死量)，觀察小鼠的反應和生存情況。

3 結果

3.1 常規劑量下朵基諾解毒作用 用藥后2 min后，甲組動物出現不同程度煩躁、興奮、抽搐、扭體反應，5 min出現死亡，1 h后34只小鼠死亡，72 h后存活6只；乙組動物出現煩躁、興奮、抽搐等反應，用藥10 h后7只小鼠死亡，33只小鼠存活，之后72 h內未見其他小鼠死亡(見表1)。

表1 常規劑量下朵基諾的解毒情況統計表

實驗結果顯示，兩組動物用藥后中毒程度有較大的差別，存活情況有顯著性差異(P<0.001)，實驗組生存率明顯高于陽性對照組。朵基諾水煎液對煙堿液所致急性中毒有一定的對抗作用，可明顯緩解中毒癥狀、提高實驗動物的生存率。

3.2 不同劑量朵基諾的解毒作用 用藥后2 min后，甲組動物出現輕度煩躁、興奮、扭體反應，20 min后鎮靜，未出現死亡情況；乙組動物出現一定程度興奮、抽搐等反應，用藥后10 h有4只小鼠死亡，16只存活，之后72 h內未見其他小鼠死亡；丙組動物出現煩躁、興奮、抽搐、扭體反應，10 min后9只死亡,4只出現強烈驚厥，11只小鼠存活，之后48 h內未新增小鼠死亡(見表2)。

表2 不同劑量下朵基諾的解毒情況統計表

實驗結果顯示，3組動物的中毒程度、存活率與劑量呈現一定的依賴關系，高劑量組小鼠的中毒程度較輕，且存活率高；低劑量組的中毒程度重，且存活率降低，提示在臨床用藥中需確保一定的劑量。

3.3 不同劑量煙堿下朵基諾的解毒作用 用藥2 min后，甲、乙、丙3組動物出現明顯的煩躁、興奮、抽搐、扭體反應，10 min出現死亡，30 min后甲乙2組40只小鼠全部死亡。丙組動物14只小鼠死亡，之后48 h內僅有6只存活(見表3)。

表3 不同劑量煙堿條件下朵基諾的解毒情況統計表

實驗結果顯示，朵基諾緩解煙堿急性中毒過程中，實驗動物的存活率與中毒程度成反比關系，甲乙兩組動物煙堿的用量過大，中毒程度過深，無解救的機會，實驗動物全部死亡；丙組動物中毒程度相對較淺，有30%的動物存活。朵基諾解救急性中毒與用藥對象中毒程度有關，中毒程度在一定范圍內方可發揮其解毒功效，中毒程度過深藥物作用無法發揮。

4 討論

通過香煙煙霧制備煙堿液所含化學成分復雜，包括尼古丁、焦油、糖醛、酚類、烯類化合物等[2]，可經皮膚、黏膜、消化道等多途徑快速吸收，對神經細胞、肺纖維細胞、肝細胞、視網膜細胞等具有廣泛的細胞毒作用，可引起急性中毒反應，表現出神經系統、心血管系統、消化系統、呼吸系統復雜的癥狀，致死機制主要是中樞神經和N膽堿能神經興奮性改變、呼吸麻痹或呼吸衰竭[3]，也可能與廣泛的細胞毒和氧化損傷有關。機體長期接觸煙堿可引起細胞DNA、RNA、蛋白質損傷，產生致癌、致畸等特殊毒性[4]，對多個臟器表現出不同程度損害作用。朵基諾抗煙堿急性毒性作用可能與改變中樞神經系統、膽堿能神經興奮性和兒茶酚胺、內源性前列腺素有關，也可能與穩定細胞膜，減少煙堿的細胞毒性有關，具體作用機理有待于進一步研究。

朵基諾(鐵掃把)性甘、微苦、涼，具有清熱利濕、消食除積、行氣止痛、祛痰止咳等功效[1]，主要含有萜類、皂苷、揮發油等化學成分[5-7]，可用于小兒疳積、消化不良、胃腸炎、細菌性痢疾、胃痛、黃疸型肝炎、糖尿病、腎炎水腫、尿路感染、口腔炎、咳嗽、支氣管炎；外用治療濕疹、皮膚瘙癢、帶狀皰疹、滴蟲病、毒蛇咬傷等[8]。朵基諾(鐵掃把)藥用價值廣，對生長環境要求不高，可進行大面積栽培，具有廣闊的發展前景和開發價值，但其解毒機理至今尚未清楚，有待于進一步深入研究。