肺炎支原體感染合并川崎病患兒血清IL-6、IL-8及IL-10水平與冠狀動(dòng)脈損傷的相關(guān)性

郭璇 宋瑤 阿布來提·阿不都哈爾★

川崎病（Kawasaki disease，KD）為兒科常見疾病，發(fā)病與細(xì)菌、病毒感染密切相關(guān)，免疫損傷以及免疫系統(tǒng)高度活化等為本病的主要特征，冠狀動(dòng)脈損傷（Coronary artery lesions，CAL）是其最嚴(yán)重并發(fā)癥之一，而CAL 被視為引起兒童后天性心臟病的重要原因，嚴(yán)重威脅小兒生命健康［1-2］。肺炎支原體感染（Mycoplasma pneumoniae，MP）是引起KD 患兒呼吸系統(tǒng)疾病的關(guān)鍵，有研究表明肺炎支原體感染對(duì)CAL 有明顯促進(jìn)作用，其可促進(jìn)動(dòng)脈粥樣斑塊破裂而誘發(fā)一系列炎性和應(yīng)激反應(yīng)，最終增加患兒心肌梗死的風(fēng)險(xiǎn)［3］，因此早期預(yù)測(cè)肺炎支原體合并KD 患兒CAL 發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)合理防治方案的制定有重要臨床意義。現(xiàn)階段臨床對(duì)KD 診斷主要通過臨床癥狀及體征變化、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)變化等來評(píng)估，尚缺乏特異性指標(biāo)，隨著臨床對(duì)KD 分子生物學(xué)致病機(jī)制認(rèn)識(shí)地不斷加深，近期有文獻(xiàn)報(bào)道KD 患兒血清白介素-6（Interleukin-6，IL-6）、白介素-8（Interleukin-8，IL-8）及白介素-10（Interleukin-10，IL-10）等因子異常變化，在KD 診斷和病情評(píng)估中有重要臨床意義［4-5］。為此本文展開臨床對(duì)照性研究，旨在為KD 患兒早期合理治療方案的制定提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2016年6月至2019年6月本院診治的86例MP 感染合并KD 患兒（觀察組）以及35 例MP感染患兒（對(duì)照組）臨床資料，疾病組男49 例、女37 例，年齡（5.06±1.03）歲，MP 感染病程（6.19±1.03）天，對(duì)照組男19 例、女16 例，年齡（5.03±1.01）歲，MP 感染病程（5.99±1.04）天，符合美國(guó)心臟協(xié)會(huì)制定的有關(guān)KD 診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］；②初次發(fā)病；經(jīng)心電圖、心肌酶譜檢查排除其他因素所致心肌損害；③無(wú)抗生素以及皮質(zhì)類固醇類激素使用史；④臨床資料以及隨訪資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在慢性疾病或其他疾病等；②合并有腫瘤、血液病或先天性畸形或重要臟器功能障礙；③合并先心病；無(wú)法配合完成超聲心電圖等檢查。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究已獲本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2 試劑/儀器

①主要試劑：血清IL-6、IL-8 及IL-10 檢測(cè)試劑盒（購(gòu)自北京百晶生物技術(shù)有限公司）②主要儀器：全自動(dòng)酶標(biāo)儀（法國(guó)Biomerieux 公司提供，型號(hào)為mini-VIDAS），彩色多普勒超聲儀（美國(guó)GE公司生產(chǎn)，型號(hào)為L(zhǎng)OC-ZQ9）。

1.3 方法

①治療前后采集病例患兒晨起空腹靜脈血5 mL，置于抗凝管中，常規(guī)離心（3 500 rpm）分離血清，取血清2 mL，低溫保存待測(cè)，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)兩組血清IL-6、IL-8 及IL-10 水平。②冠狀動(dòng)脈損傷情況檢測(cè)：病例患兒均行心臟超聲和心電圖檢查，心臟彩色多普勒超聲儀（探頭頻率為2～5 MHz）檢測(cè)所有患兒冠狀動(dòng)脈損傷情況，根據(jù)冠狀動(dòng)脈病變程度進(jìn)行分類［7］，分為0 度、1 度、2 度、3度。冠脈損傷率=（1 度+2 度+3 度）/總例數(shù)×100%。其中將1～3 度冠狀動(dòng)脈病變歸為CAL 組，0 度歸為無(wú)CAL 組。③臨床資料收集：收集入組病例患兒性別、年齡、病程、體重等一般資料以及紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白等實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（±s）描述，組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以n（%）進(jìn)行描述，行χ2檢驗(yàn)，二元Logistic 回歸分析MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生的影響因素；相關(guān)性分析采用Spearman 相關(guān)分析。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般基線比較

觀察組血清IL-6、IL-8 水平、CAL 發(fā)生率明顯高于對(duì)照組，IL-10 明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），疾病組性別、年齡、MP 感染病程比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組一般基線比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general baseline between 2 groups［n（%），（±s）］

表1 兩組一般基線比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of general baseline between 2 groups［n（%），（±s）］

分類性別年齡MP 感染病程（d）IL-6（pg/mL）IL-8（pg/mL）IL-10（pg/mL）CAL 發(fā)生率男女≥6 歲＜6 歲疾病組（n=86）49（56.98）37（43.02）36（41.86）50（58.14）6.19±1.03 105.64±10.43 99.34±7.26 14.36±1.53 24（27.91）對(duì)照組（n=35）19（54.29）16（45.71）11（31.43）24（68.57）5.99±1.04 65.23±6.29 52.31±5.19 29.29±2.45 2（5.71）t/χ2值0.073 1.140 0.966 21.363 34.834 40.461 7.262 P 值0.787 0.286 0.336 0.000 0.000 0.000 0.007

2.2 影響MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生的單因素分析

CAL 組年齡≥6 歲占比明顯低于無(wú)CAL 組，血清IL-6、IL-8 水平明顯高于無(wú)CAL 組，而IL-10 水平明顯低于無(wú)CAL 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 影響MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生的單因素分析［n（%），（±s）］Table 2 Single factor analysis of the occurrence of CAL in children with MP infection on and KD［n（%），（±s）］

表2 影響MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生的單因素分析［n（%），（±s）］Table 2 Single factor analysis of the occurrence of CAL in children with MP infection on and KD［n（%），（±s）］

分類性別（男）年齡（≥6 歲）MP 感染病程（d）體重（kg）紅細(xì)胞數(shù)（×109/L）白細(xì)胞數(shù)（×109/L）中性粒細(xì)胞（×109/L）血紅蛋白（g/L）IL-6（pg/mL）IL-8（pg/mL）IL-10（pg/mL）n 49 36 86 86 86 86 86 86 86 86 86 CAL 組（n=24）11（45.83）5（20.83）6.11±1.00 29.32±3.06 4.24±1.03 8.25±1.06 4.03±1.01 128.24±10.65 111.61±10.59 103.14±8.66 10.16±1.23無(wú)CAL 組（n=62）38（61.29）31（50.00）6.23±1.06 30.06±2.99 3.99±1.04 7.98±1.03 3.86±0.99 130.24±9.99 94.64±8.41 81.05±7.04 15.36±1.70 χ2/t 值1.686 6.048 0.478 1.023 1.003 1.082 0.710 0.818 7.792 12.222 15.734 P 值0.194 0.014 0.634 0.309 0.319 0.283 0.480 0.416 0.000 0.000 0.000

2.3 影響MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生的二元Logistic 回歸分析

以MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生情況為應(yīng)變量（有CAL 發(fā)生=1、無(wú)CAL 發(fā)生=0），年齡（＜6 歲=1、≥6 歲=0）、血清IL-6、IL-8、IL-10 水平（均以實(shí)際檢測(cè)值為準(zhǔn)）為自變量，進(jìn)行二元Logistic 回歸分析，結(jié)果顯示年齡、血清IL-6、IL-8 水平是MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生的高危因素，而IL-10 則是保護(hù)因素，見表3。

表3 影響MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生的二元Logistic 回歸分析Table 3 Binary logistic regression analysis of the occurrence of CAL in children with MP infection and KD

2.4 血清IL-6、IL-8、IL-10 水平與CAL 發(fā)生率相關(guān)性分析

Spearman 相關(guān)分析顯示MP 感染合并KD 患兒血清IL-6（r=0.593）、IL-8（r=0.615）水平與CAL 發(fā)生呈明顯正相關(guān)，而IL-10（r=-0.638）水平與CAL發(fā)生呈明顯負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

KD 患兒臨床轉(zhuǎn)歸良好，但治療不及時(shí)心血管損害發(fā)生率約為10%～45%，CAL 已成為KD 患兒最為嚴(yán)重并發(fā)癥之一［8-9］。文獻(xiàn)報(bào)道CAL 診治不及時(shí)會(huì)逐步出現(xiàn)冠狀動(dòng)脈阻塞、狹窄以及鈣化和血栓形成等，增加小兒死亡風(fēng)險(xiǎn)［10］。研究表明MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生感染后機(jī)體炎癥反應(yīng)以及免疫損傷性血管炎隨之加重，肺炎支原體感染可引起KD 合并CAL 患兒心功能損害并降低患兒免疫力［11］，另有研究指出病原菌感染與KD發(fā)病密切相關(guān)，可增加冠狀動(dòng)脈損傷風(fēng)險(xiǎn)［12］，而這些病理過程會(huì)引起血清炎性反應(yīng)，推測(cè)IL-6、IL-8與CAL 的發(fā)生有關(guān)。KD 患者CAL 發(fā)生可能與T細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能失衡有關(guān)，IL-10 作為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞分泌的抑制性調(diào)節(jié)因子，研究發(fā)現(xiàn)IL-10 在KD合并CAL 患兒血清中含量高［13］。故而我們推測(cè)病原感染時(shí)免疫反應(yīng)的細(xì)胞因子不僅參與MP 感染致病過程，也與MP 感染合并KD 的患兒有關(guān)。

本研究結(jié)果表明MP 感染合并KD 患兒CAL發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)明顯高（為27.91%），較廉婕等［14］研究證實(shí)的幽門螺桿菌感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生率42.86%低，可能與兩項(xiàng)研究中患兒感染的病原微生物不同有關(guān)，說明臨床需重視對(duì)MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生的早期預(yù)測(cè)。研究證實(shí)KD 發(fā)病中免疫功能低下及其產(chǎn)生的細(xì)胞因子活性與CAL 發(fā)生密切相關(guān)［15］，年齡低下患兒各器官發(fā)育尚不成熟，機(jī)體抵抗力低，發(fā)生CAL 風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)更高，提示臨床工作中需加強(qiáng)對(duì)年齡較小MP 感染合并KD 患兒的重視，積極預(yù)防CAL 發(fā)生。IL-6屬于一種促炎因子，其可刺激T 淋巴細(xì)胞增殖以及B 細(xì)胞增殖分化，引發(fā)免疫損傷，IL-6 水平與CAL 發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)密切相關(guān)［16］。IL-8 可趨化并激活中性粒細(xì)胞，加重血管炎性損害，在炎癥誘發(fā)細(xì)胞因子級(jí)聯(lián)反應(yīng)中發(fā)揮重要作用［17］，故而推測(cè)血清IL-8 水平與MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生密切相關(guān)。IL-10 主要由單核/巨噬細(xì)胞、B 細(xì)胞分泌，其可調(diào)節(jié)T 細(xì)胞以及B 細(xì)胞和NK 細(xì)胞等的產(chǎn)生，抑制多種免疫活性細(xì)胞因子的表達(dá)、抑制炎性細(xì)胞因子分泌，具備免疫細(xì)胞以及免疫分子的雙向調(diào)節(jié)作用，對(duì)心肌有保護(hù)作用［18］，故而推測(cè)血清IL-10 水與MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生率存在明顯的負(fù)相關(guān)。

基于以上分析，年齡、血清IL-6、IL-8 及IL-10水平均為MP 感染合并KD 患兒CAL 發(fā)生的影響因素，加強(qiáng)對(duì)低齡MP 感染合并KD 患兒血清IL-6、IL-8 及IL-10 水平的監(jiān)測(cè)，或可為MP 感染合并KD患兒早期防治提供參考。