全自動快速溶劑萃取-氣相色譜法測定蔬菜、水果中29種有機磷農藥

□ 高 慧 汪 洋 王 敏 邢 燕 劉婷婷 淄博市疾病預防控制中心

在蔬菜、水果的種植過程中，有機磷農藥是常用的防治蟲害的有機化合物。這一類農藥品種多、藥效高，用途廣，易分解，因此，其使用極為廣泛。目前測定有機磷的方法有氣相色譜法[1—3]、氣相色譜—質譜聯用儀法[4—5]等方法，氣相色譜—質譜聯用儀法具有檢測靈敏度高、分析速度快等優點，但對儀器和技術的要求高，價格昂貴，應用不夠廣泛；氣相色譜法測定有機磷技術比較成熟，儀器普及率高，因此應用比較廣泛。因有機磷類農藥在環境中不太穩定，用傳統的固相萃取柱進行檢測凈化效果好，但步驟繁瑣，回收率不高；用QuECHERS方法提取回收率較高，但基質效應明顯，故本研究選用了快速溶劑萃取氣相色譜法進行檢測。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

安捷倫7890A氣相色譜儀，配火焰光度檢測器（FPD），全自動快速溶劑萃取儀，氮吹儀，離心機、分析天平等。敵敵畏、丙溴磷、甲胺磷、乙酰甲胺磷、滅線磷、甲拌磷、氧化樂果、二嗪農、乙拌磷、氯唑磷、久效磷、樂果、甲基毒死蜱、毒死蜱、甲基對硫磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷、對硫磷、水胺硫磷、喹硫磷、殺撲磷、乙硫磷、三唑磷、亞胺硫磷、辛硫磷、伏殺硫磷、甲拌磷砜、甲拌磷亞砜與甲基異柳磷，濃度均為100 μg/mL，定值單位為農業部環境保護科研監測所。

1.2 氣相色譜儀器條件

色譜柱：DB—1701（30 m×0.32 mm 25 μm），進樣口溫度220 ℃，檢測器溫度250 ℃。柱溫升溫程序：初始50 ℃，以20 ℃/min的速率上升至200 ℃，保持20 min，以40 ℃/min的速率升至240 ℃，保持15 min，共43.5 min。柱流量1.0 mL/min，不分流進樣。空氣流速100 mL/min，氫氣流速75 mL/min，尾吹氣60 mL/min，進樣量 1.0 μL。

1.3 樣品處理

將樣品勻漿粉碎后，準確稱取5.0 g樣品，均勻混入適量預先在600 ℃烘烤4 h的硅藻土固相萃取材料，填于專用的34 mL快速萃取池中，池的底部和頂端均放入玻璃纖維濾膜，加蓋篩板，擰緊密封，填入過程中不斷震動，防止池中有空隙或者螺紋口有顆粒，影響其氣密性，導致檢測結果不理想。放入全自動快速溶劑萃取儀中進行萃取，接收瓶體積為70 mL。

1.4 萃取與凈化

萃取用溶劑為乙腈，載氣：高純氮（99.999%），壓力：0.8 MPa；預熱時間：60～90 s；加熱時間：300 s；淋洗體積：40～60 mL，氮吹60～120 s；萃取溫度：100 ℃；萃取池壓強：10 MPa；循環次數：2次；總萃取時間：25 min。將上述操作所得取液，用氮吹儀濃縮至1.0 mL，進樣氣相色譜儀分析。

2 結果與討論

2.1 樣品前處理條件的優化

本實驗分別試用了C18、PSA、硅藻土3種固相萃取材料，結果顯示，硅藻土的回收率最高，在85%～110%，C18和PSA的回收率均在80%以下，干擾物的凈化效果也不理想，干擾物質雜峰較多，故選用了硅藻土為固相萃取材料。

2.2 樣品取樣量的優化

本實驗分別精確稱取了2.5、5.0、7.5 g與10.0 g樣品進行全自動快速溶劑萃取處理，檢測結果顯示，稱取2.5 g樣品時，雖然凈化和提取效果很好，但由于取樣量少，檢出限較高，不能滿足本研究的要求。取樣量為10.0 g時，由于水分和干擾物去除效果不夠理想，色譜圖干擾物較多，且水分去除也不夠理想，峰形拖尾嚴重。取樣量為5.0 g時，樣品的凈化和萃取效率最好，回收率和凈化效果也最理想，分析色譜圖符合本實驗的要求。

2.3 儀器條件的優化

分 別 比 較 了 DB—1、DB—1701 和HP—5氣相色譜柱，相同條件下，DB—1柱峰形拖尾嚴重，HP—5柱的辛硫磷和甲拌磷亞砜響應值較低，檢出限達不到實驗要求；DB—1701柱的分離效果好，峰形尖銳，故選用了DB—1701氣相色譜柱。根據29種有機磷的不同沸點和化學性質，不斷調整程序升溫梯度，以達到29種有機磷基線完全分離，峰形尖銳無拖尾，響應信號完全符合實驗要求的目的。

2.4 標準

按照儀器色譜條件，將上述29種有機磷標準溶液配制成0.10～2.00 μg/mL的混合標準系列進樣分析，以29種有機磷的濃度為橫坐標，29種有機磷的峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，結果顯示其線性相關系數R值均＞0.998，即該方法線性關系良好，符合本實驗要求。檢出限為0.01～0.05 mg/kg。

3 實際樣品測試

本實驗檢測了60份蔬菜樣品，60份水果樣品，檢出率為3.56%，3份溴氰菊酯超標，其他符合國標要求。其中蔬菜中萵苣、韭菜、小油菜、娃娃菜與生菜相對檢出較多，水果中草莓、獼猴桃檢出較多。采用生菜、獼猴桃陰性樣品，分別以0.05、0.10 mg/kg和0.20 mg/kg 3個濃度水平作為樣品加標回收的添加濃度測定回收率，得加標回收率在72.3%～105.8%，相對偏差在3.12%～9.76%，達到本研究的理想測定值，檢測結果見表1。

表1 生菜、草莓在不同加標量下的加標回收率及相對偏差

4 結論

本研究通過對樣品前處理條件、樣品取樣量、儀器條件的優化，建立了全自動快速溶劑萃取—氣相色譜法測定蔬菜、水果中29種有機磷農藥的方法，實現了蔬菜、水果中29種有機磷的快速、高效測定。在0.01～0.05 mg/kg的添加濃度范圍內，回收率和精密度均符合農藥殘留量分析要求，該方法簡便、快速、準確率高、精密度好，適合于蔬菜、水果樣品中有機磷農藥的檢測。