不穩(wěn)定性心絞痛患者血清Vaspin水平及與血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子的相關(guān)性

劉海寧，蒲冬玉，畢方杰，尹 波

(濱州醫(yī)學(xué)院附屬淄博市中心醫(yī)院 心內(nèi)科，山東 淄博 255036)

動(dòng)脈粥樣硬化是一種血管炎性疾病，血管內(nèi)皮的損傷是血管炎性反應(yīng)的始動(dòng)因素。血管內(nèi)皮的損傷首先表現(xiàn)為血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子的表達(dá)，且貫穿于動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展的全過程，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展起著至關(guān)重要的作用。脂肪組織不僅是能量的存儲(chǔ)器官，更是一個(gè)非常重要的內(nèi)分泌器官，分泌多種脂肪因子，通過內(nèi)分泌、旁分泌的方式參與了動(dòng)脈粥樣硬化病理生理過程。血清內(nèi)臟脂肪組織來源的絲氨酸蛋白酶抑制劑(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor, Vaspin)，是近年來新發(fā)現(xiàn)的脂肪因子，是絲氨酸蛋白酶抑制劑家族中的一員[1]，在肥胖、2型糖尿病、胰島素抵抗中扮演著重要角色[2-4]。基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)，Vaspin能夠影響血管內(nèi)皮功能[5]、抑制血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移[6]，具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。那么對(duì)于不穩(wěn)定性心絞痛患者，其血清Vaspin表達(dá)如何？與血清可溶性黏附分子的表達(dá)是否具有相關(guān)性？本研究對(duì)此進(jìn)行了探討，旨在從臨床角度探討Vaspin與血管內(nèi)皮功能之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1病例選擇 2019年7月至2020年1月我院住院的不穩(wěn)定性心絞痛患者90例，所有入選患者均符合2016年中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病分會(huì)“非ST段抬高型急性冠狀動(dòng)脈綜合征診斷和治療指南”中不穩(wěn)定性心絞痛的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中11例接受了冠狀動(dòng)脈CT血管成像檢查，79例接受了冠狀動(dòng)脈造影檢查。選擇同時(shí)期住院及門診的穩(wěn)定性心絞痛患者90例，所有入選患者均符合2018年中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)“慢性穩(wěn)定性心絞痛診斷與治療指南”中穩(wěn)定性心絞痛的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中42例接受了冠狀動(dòng)脈CT血管成像檢查，48例接受了冠狀動(dòng)脈造影檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)肝腎功能異常；(2)自身免疫性疾病；(3)發(fā)熱及感染性疾病；(4)腫瘤；(5)血液系統(tǒng)疾病；(6)糖尿病；(7)其他器質(zhì)性心臟病。選擇年齡、性別、體重相匹配的健康者80例作為對(duì)照組，對(duì)照組健康者均來自本院體檢中心。

1.2Vaspin、sVCAM-1及sICAM-1的測(cè)定 采用定量夾心酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行測(cè)定。所有患者清晨抽空腹外周靜脈血于血液采集管中，室溫放置30 min，3 000 r/min離心15 min，移取上層血清，存放于-70 ℃超低溫冰箱，標(biāo)本在半個(gè)月內(nèi)測(cè)定。人Vaspin試劑盒購自上海酶聯(lián)生物有限公司，人sVCAM-1、sICAM-1酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒均購自美國Aviscera Bioscience公司。試驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明要求進(jìn)行。

1.3血生物化學(xué)指標(biāo)檢測(cè) 清晨抽空腹外周靜脈血，室溫下存放，2 h內(nèi)送檢。采用Beckman 5800型血生物化學(xué)分析儀進(jìn)行生物化學(xué)指標(biāo)常規(guī)檢測(cè)。

1.4體質(zhì)指數(shù)測(cè)量 體質(zhì)指數(shù)(body mass index，BMI)計(jì)算公式：BMI=體重/身高2(kg/m2)。測(cè)量時(shí)，身高精確到0.1 cm，體重精確到0.1 kg。18 kg/m2≤BMI<24 kg/m2。

2 結(jié) 果

2.1一般臨床資料比較 3組間年齡、性別、BMI、血脂、空腹血糖、肌酐、尿酸等指標(biāo)比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。UA組和SA組間收縮壓(systolic blood pressure，SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure，DBP)、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、hs-CRP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但均顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，見表1。

表1 3組研究對(duì)象一般臨床資料比較

服用藥物情況[例(%)]U值P值 抗血小板藥物85(94.44)81(90.00)-1.10>0.05 他汀類80(88.89)76(84.44)-0.82>0.05 β受體阻滯劑72(80.00)51(56.67)-3.28<0.01 ACEI/ARB25(27.78)29(32.22)-1.48>0.05 硝酸酯類69(76.67)53(58.89)-2.54<0.05

2.2血清Vaspin、sVCAM-1、sICAM-1 UA組血清Vaspin水平顯著高于SA組及對(duì)照組(分別P<0.01)，但SA組與對(duì)照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。UA組血清sVCAM-1及sICAM-1水平均顯著高于SA組和對(duì)照組(分別P<0.01)，且SA組與對(duì)照組相比也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 3組血清Vaspin、sVCAM-1、sICAM-1水平比較

2.3UA組血清Vaspin與sVCAM-1、sICAM-1及其他指標(biāo)的相關(guān)性分析 UA組血清Vaspin與sVCAM-1、sICAM-1、hs-CRP均呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)，見圖1～3，而與體重指數(shù)、SBP、DBP、總膽固醇、甘油三酯、LDL-C、HDL-C、肌酐、尿酸、空腹血糖等均無明顯相關(guān)性(P>0.05)，見表3。

表3 UA組血清Vaspin與各指標(biāo)的Pearson相關(guān)性分析

3 討 論

Vaspin最早是在肥胖的2型糖尿病大鼠(Otsuka Long-Evans Tokushima fatty rat, OLETF)模型的內(nèi)臟脂肪組織中發(fā)現(xiàn)的[7]，動(dòng)物與人的Vaspin氨基酸組成有所不同，人的Vaspin是由395個(gè)氨基酸組成的，為絲氨酸蛋白酶抑制劑家族的成員。研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病、胰島素抵抗和肥胖患者的血清Vaspin水平均明顯升高，Vaspin通過抑制緩激肽釋放酶7介導(dǎo)的胰島素降解發(fā)揮其胰島素增敏作用[8]。而肥胖和胰島素抵抗在動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病中則扮演者極其重要的角色。然而，當(dāng)患者冠狀動(dòng)脈受到損傷出現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化病變時(shí)，其血清Vaspin水平表達(dá)卻是降低的，這在多項(xiàng)臨床研究中已經(jīng)得到證實(shí)[9-11]，且低水平的血清Vaspin可以預(yù)測(cè)心血管事件的發(fā)生[12]。為了排除血糖對(duì)血清Vaspin水平的影響，本研究所納入的研究對(duì)象均剔除了糖尿病及糖耐量異常的冠心病患者。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不穩(wěn)定性心絞痛組血清 Vaspin水平顯著低于穩(wěn)定性心絞痛組及正常對(duì)照組，而在穩(wěn)定性心絞痛組與正常對(duì)照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示血清 Vaspin水平降低是不穩(wěn)定性心絞痛患者一個(gè)重要的預(yù)測(cè)指標(biāo)，與冠心病及其嚴(yán)重程度密切相關(guān)。Al-Kuraishy等[13]研究發(fā)現(xiàn)，肥胖合并急性冠脈綜合征患者的血清Vaspin水平是明顯降低的，在予以瑞舒伐他汀治療后，其血清Vaspin水平顯著高于非瑞舒伐他汀治療組，說明他汀的多效性能夠增加缺血性心臟病患者Vaspin血清濃度，間接證明Vaspin對(duì)冠脈的保護(hù)作用，具有抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。在頸動(dòng)脈球囊損傷的小鼠模型中，Nakatsuka 等[14]予以載有Vaspin的腺病毒進(jìn)行治療，可顯著抑制單核細(xì)胞趨化因子(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)的表達(dá)、保護(hù)血管免受損傷，直接證明了Vaspin對(duì)血管的保護(hù)作用。本研究結(jié)果則發(fā)現(xiàn)不穩(wěn)定性心絞痛組中的血清Vaspin水平與炎性指標(biāo)hs-CRP呈顯著負(fù)相關(guān)，這與Al-Kuraishy等[13]的研究相一致，進(jìn)一步說明Vaspin具有抗炎、抗動(dòng)脈粥樣硬化作用，對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病具有保護(hù)作用。

對(duì)于單純肥胖和胰島素抵抗的患者，血清Vaspin可作為保護(hù)性代償而明顯升高[4, 15]；一旦合并出現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化性病變，血清Vaspin則會(huì)呈現(xiàn)降低趨勢(shì)。但這其中的原因和機(jī)制是什么呢？還需要做進(jìn)一步的研究。

動(dòng)脈粥樣硬化是血管的炎性反應(yīng)，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的各種危險(xiǎn)因素和促炎性分子如腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白細(xì)胞介素6等均可損害血管內(nèi)皮細(xì)胞，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子的表達(dá)以及隨后巨噬細(xì)胞在血管內(nèi)皮的黏附。因此，血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子的表達(dá)是導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的起始因素。黏附分子包括血管細(xì)胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)、細(xì)胞間黏附分子-1( intercelluar cell adhesion molecule-1, ICAM-1)和E-選擇素的表達(dá)主要依賴于核轉(zhuǎn)錄因子(nuclear factor-κB, NF-κB)[16]。以往臨床研究均已證實(shí)，急性冠脈綜合征患者血清可溶性ICAM-1(sICAM-1)、可溶性VCAM-1(sVCAM-1)水平顯著升高，與冠狀動(dòng)脈病變程度呈顯著正相關(guān)。本研究得到了同樣的結(jié)果，不穩(wěn)定性心絞痛患者和穩(wěn)定性心絞痛患者的血清sICAM-1、sVCAM-1水平均顯著高于正常對(duì)照組，尤以不穩(wěn)定性心絞痛組升高更為顯著。Jung等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在體外培養(yǎng)的人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中，Vaspin能夠顯著抑制TNF-α誘導(dǎo)的NF-κB的激活以及NF-κB介導(dǎo)的ICAM-1、VCAM-1、E-選擇素、 MCP-1基因水平和蛋白水平的表達(dá)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，Vaspin是通過激活A(yù)MPK這一信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)抑制了TNF-α誘導(dǎo)的NF-κB的激活以及黏附分子的表達(dá)。本臨床研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不穩(wěn)定性心絞痛患者的血清vaspin水平與血清sICAM-1、sVCAM-1水平均呈顯著負(fù)相關(guān)，進(jìn)一步證實(shí)了體外研究的結(jié)果，Vaspin水平降低，意味著對(duì)血管內(nèi)皮的保護(hù)作用降低，血清Vaspin水平與冠脈病變程度呈負(fù)相關(guān)，因此血清Vaspin可以作為不穩(wěn)定性心絞痛重要的生物標(biāo)志物。

目前認(rèn)為Vaspin可能通過多個(gè)靶點(diǎn)發(fā)揮其抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用[5]，具體的作用機(jī)制，尤其是細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制正在被更深入的研究[18-19]。Vaspin與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性之間的關(guān)系是我們下一個(gè)的研究重點(diǎn)。如何提高冠心病患者血清Vaspin濃度，充分發(fā)揮其抗動(dòng)脈粥樣硬化作用將是未來臨床研究的方向。