小麥TaTCTP 蛋白的原核表達及抗體制備

麻 楠, 孫天杰, 劉 超, 焦園園, 王冬梅

(華北作物改良與調控國家重點實驗室/ 河北省植物生理與分子病理學重點實驗室/ 河北農業大學 生命科學學院， 河北 保定 071001)

小麥(Triticum aestivum L.)是世界上重要的糧食作物，而其產量受到多種病害的影響。由小麥葉銹菌(Puccinia triticina)引起小麥葉銹病，是造成小麥產量減少的主要病害之一［1-2］。減少真菌病害是提高小麥產量的有效途徑，盡管化學藥劑可用于防治小麥真菌病原體，但培育抗病品種是一種更具成本效益和有利于環境保護的主要措施［3］。

翻譯控制腫瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein, TCTP)是廣泛存在于真核細胞中的一種蛋白，并且高度保守［4-5］。在動物中，TCTP 可以調控生長發育［6］、保護染色體［7］、參與細胞凋亡［8］、調節組胺的釋放［9,10］和調控微管穩定性［11］等生物學功能。到目前為止，對于TCTP 在植物中的功能的相關研究相對較少。在擬南芥中TCTP 參與細胞生長及分裂，且當TCTP 沉默后，其花粉管的形成及生長發育受阻［12］。在煙草中，TCTP 通過與組氨酸激酶(Tobacco histidine kinase, NTHK)相互作用來響應乙烯信號［13］。而水稻TCTP 可以響應重金屬汞的脅迫，并減少活性氧對植物造成的傷害［14］。此外，在植物與病原菌互作方面，對TCTP 的功能研究也少有報導。鄭舒暢等研究表明TCTP 參與了小麥抵御白粉菌的侵染過程［15］。番茄和煙草植株中的TCTP 響應胡椒黃花葉病毒(Pepper yellow mosaic virus, PepYMV)的侵染［16］。煙草中的NbTCTP 沉默后，由青枯病菌、菊苣假單胞桿菌和丁香假單胞桿菌誘發的超敏性反應-細胞程序性死亡(Hypersensitive response- programmed cell death, HR-PCD)面積增加［17］，表明TCTP 的功能與植物受病原菌侵染時HR-PCD 的誘發有關。

本課題前期研究發現，HR-PCD 是小麥抵抗葉銹菌侵染的重要防衛反應［18-20］?！?br>