高效液相色譜法測定黑色素瘤小鼠尿液中達卡巴嗪

岳玉華, 周炳均, 艾佳媛, 封 順

(西南交通大學生命科學與工程學院, 四川 成都 610031)

圖 1 達卡巴嗪的結構式Fig. 1 Structure of dacarbazine

黑色素瘤是皮膚癌中惡性程度最高的一種腫瘤,近年來其發(fā)病率和死亡率急劇增加[1-4]。目前臨床治療黑色素瘤多采用手術切除、放療、化療和免疫治療等手段[5]。達卡巴嗪(dacarbazine, DTIC)是美國食品藥品監(jiān)督管理局(Food and Drug Administration, FDA)批準的第一個治療黑色素瘤的化療藥物[6,7],目前仍被廣泛應用于黑色素瘤的治療。DTIC在體內(nèi)主要經(jīng)肝臟代謝,但部分藥物仍以原藥形式經(jīng)尿液排出[8]。這就意味著可以通過監(jiān)測尿液中DTIC的含量來評估其在人體內(nèi)的利用率和轉化率,進而對其治療效果進行評價。

尿液作為唯一能夠在無損條件下大量獲得的體液,在生命分析中有著重要的地位。然而尿液成分相對復雜,基體干擾大,對尿液中微量或痕量組分的分析存在著一定困難。從圖1結構式可以看出DTIC是一種強極性弱堿性化合物,這使得采用常規(guī)反相色譜分離時,DTIC會出現(xiàn)嚴重拖尾;同時極性又非常大,使得其在C18柱上保留較弱,出峰時間過早,基質(zhì)干擾較大,難以實現(xiàn)準確定量[9]。為實現(xiàn)對尿液中DTIC的準確分離與分析,人們進行了大量工作,如Fiore等[10]以C18為分離柱,0.5 mol/L NaAc (10%的濃磷酸調(diào)到pH 7.0)和含25%乙腈的0.05 mol/L NaAc (10%的濃磷酸調(diào)到pH 5.5)為流動相,采用梯度洗脫的方式,初步實現(xiàn)了對尿液中DTIC的分析,但峰拖尾嚴重,效果不佳。Tate等[11]在流動相中引入甲酸銨,以0.1%甲酸銨水溶液(pH 5.5)/甲醇/水(90∶5∶5)為流動相,峰形得到了一定程度的改善,但DTIC在3 min即出峰,與死時間相隔過短。……