聚維酮碘對角膜上皮細胞氧化損傷的影響

鄭永征,劉光輝,潘銘東

0引言

眼內炎是眼科手術的嚴重并發癥，嚴重影響視力。術前結膜囊內聚維酮碘消毒是最為有效地預防術后眼內炎的方法[1]。目前國內外主要使用50g/L聚維酮碘結膜囊內消毒3min[2-3]。但部分患者術后出現眼干、眼痛等角膜刺激征。2017年《我國白內障摘除手術后感染性眼內炎防治專家共識》建議對眼表有問題患者使用10g/L或低于50g/L聚維酮碘結膜囊消毒[4]。聚維酮碘是廣譜殺菌消毒劑，聚維酮碘殺菌的主要原理是氧化損傷。聚維酮碘在水中能緩慢釋放出游離碘，游離碘可與菌體蛋白的氨基酸結合使其變性，游離碘還可氧化細菌蛋白中的SH-、OH-、NH-等活性基團和不飽和脂肪酸的雙鍵，從而滅活微生物的活力，殺滅微生物，抑制微生物繁殖、釋放毒素[5]。但聚維酮碘的作用沒有特異性。除微生物外，它還可以作用于正常的角膜上皮細胞。本研究通過體外培養角膜上皮細胞，研究聚維酮碘對角膜上皮細胞氧化損傷的影響。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1細胞來源人角膜上皮細胞株(Scien Cell，Cat.6510)。

1.1.2試劑及儀器50g/L聚維酮碘(上海利康消毒高科技有限公司)，DMEM培養基、小牛血清、2.5g/L胰酶(美國HyClone)，CCK-8試劑盒(碧云天生物技術公司)，人丙二醛(malondialdehyde,MDA)、人超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)ELISA試劑盒(MDA：CSB-E08557h；SOD：CSB-E08554h，北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司)，Annexin V-FITC/PI流式試劑盒(美國Beckman Coulter)。酶標儀(美國Thermo公司，軟件版本SkanIt Software 5.0 for Microplate Readers RE,ver.5.0.0.42)。

1.2方法

1.2.1細胞培養角膜上皮細胞接種于直徑10cm的培養皿，加入含100g/L胎牛血清的DMEM培養基10mL，置于37℃ 5%CO2飽和濕度培養箱內培養，2d后換液一次，細胞融合達80%時按照1∶3傳代。……